DNA双链体的结构和功能
中文名称DNA双链体英文名称DNA duplex定 义两条以3′,5′-磷酸二酯键相连而成的反向多核苷酸链通过沿着其轴向的互补碱基对的氢键交联在一起形成的双链DNA,通常形成双螺旋的结构。可以共价闭合成环状分子,形成超螺旋DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)......阅读全文
双链DNA探针标记法的介绍
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,用
解旋酶打开DNA双链过程破解
美国温安洛研究所近日发布公告称,该所科学家和洛克菲勒大学合作,成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA(脱氧核糖核酸)复制的结构过程,并首次观察到其与DNA间的相互作用。这项发表在美国《国家科学院学报》上的最新研究,为生命繁殖之谜提供了全新注解。 温安洛研究所教授李慧琳(音译)从酵母生物体内提
细胞化学词汇双链互补DNA
中文名称:双链互补DNA英文名称:double-strand cDNA;dscDNA定 义:以双链互补DNA为模板合成的双链DNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA 分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA 聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA
解旋酶打开DNA双链过程破解
美国温安洛研究所近日发布公告称,该所科学家和洛克菲勒大学合作,成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA(脱氧核糖核酸)复制的结构过程,并首次观察到其与DNA间的相互作用。这项发表在美国《国家科学院学报》上的最新研究,为生命繁殖之谜提供了全新注解。 温安洛研究所教授李慧琳(音译)从酵母生物体内提
双链DNA探针标记法介绍
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。1. 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的
单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备
实验方法原理 这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA,因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体,以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA,如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时。实验材料 大肠杆菌 F' 菌株M13 噬菌体原液
单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备
实验方法原理 这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA,因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体,以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA,如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时
单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备
这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA,因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体,以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA,如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这个方案主
链孢红素的结构和功能特点
中文名称链孢红素英文名称neurosporene定 义类胡萝卜素家族的成员,化学成分为:7,8-二氢-ψ-胡萝卜素。存在于蕃茄、南瓜、胡萝卜等植物中,由去饱和酶作用于八氢蕃茄红素而产生。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),激素与维生素(二级学科)
大连化物所发现G四链体DNA的手性催化功能
中科院大连化学物理研究所李灿院士研究组(503组)在生物催化的相关研究中观察到G四链体DNA在不对称Diels−Alder反应和Friedel−Crafts反应中显示出手性催化功能。相关研究结果近日分别发表在《德国应用化学》(Angew. Chem. Int. Ed., DOI: 10.1002
细胞化学词汇DNA三链体
中文名称:DNA三链体英文名称:DNA triplex定 义:DNA的一种特殊的结构,是由第三条核苷酸链通过胡斯坦碱基配对,与双螺旋DNA中的一条链以特殊的氢键相连形成的一种三股螺旋DNA结构。三股链均为同型聚嘌呤或聚嘧啶;第三个碱基以A或T与A≒T碱基对中的A配对;G或C与G≒C碱基对中的G配对
细胞化学词汇DNA四链体
中文名称:DNA四链体英文名称:DNA tetraplex定 义:富含鸟嘌呤序列的四链DNA所形成的一种结构。已发现两种主要的类型,一类为重复的鸟嘌呤序列的回折形成的反平行链;另一类由四条独立的平行链相系而成。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
如何判断提取的DNA是高纯度的双链DNA
首先:可以通过分光光度计A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm.纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者2.0(RNA).如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A 230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚
DNA促旋酶的结构和功能
在ATP存在下,可将负超螺旋引入双链环状DNA中的酶。由两个亚基组成,其中一个具有切割DNA形成缺口及封闭缺口的功能,另一个则有水解ATP从而提供形成超螺旋所需的能量。参与DNA复制、转录、修复与重组。
动质体DNA的结构和功能
中文名称动质体DNA英文名称kinetoplast DNA定 义位于锥虫和相关的寄生原生动物线粒体扩张区域内的细胞器DNA。由一类数量很大的长度约为2kbp的小环DNA和另一类长度约为37 kbp的大环DNA组成。具有自我复制的能力,在细胞分裂中先于细胞核进行分裂。应用学科生物化学与分子生物学(一
标记双链DNA的3突出端
实验材料限制性内切核酸酶小牛胸腺末端转移酶模板 DNA试剂、试剂盒乙酸铵乙醇酚氯仿末端转移酶缓冲液仪器、耗材Sephadex G-50 离心柱实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液乙酸铵(10 mol/L )乙醇酚:氯仿(1:1,V/V)2. 酶和缓冲液适当的限制性内切核酸酶小牛胸腺末端转移酶5X 末端
关于抗双链DNA抗体的基本介绍
抗双链DNA抗体是抗DNA抗体中的一种,是系统性红斑狼疮(SLE)的血清学标志物,而且是临床上最常进行的一项实验室检测指标。SLE是一种常见的慢性自身免疫性疾病,其发病原因和机制尚未明确,通常认为,是由于细胞和体液免疫紊乱,机体正常的免疫耐受性受损,导致对自身组织产生免疫反应而出现组织损害。抗d
简述抗双链DNA抗体的检测方法
1、间接免疫荧光法(IIF):以绿蝇短膜虫虫体为包被基质,其上只含有一个单纯的、完整的dsDNA分子,不含有任何其他物质,特异性好;由于只结合血清中的高亲和力抗体,故灵敏度有一定限制。 2、免疫印迹法(LIA):综合了十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳高分辨率和酶免疫吸附技术的高特异度,广泛用于
抗双链DNA抗体的临床意义
抗dsDNA自身抗体是SLE的最重要的自身抗体,检出率40%~70%.高滴度抗dsDNA的存在是SLE诊断的重要依据,也是疾病活动性特别是肾脏损伤的标志。除用于SLE的诊断外,也可用于临床病程和治疗效果的监测,对判断预后也有一定价值。但也有人报道在肝脏疾病、青少年型类风湿性关节炎,乃至正常人中发
什么是抗双链DNA抗体测定
抗双链DNA抗体测定是对抗双链DNA抗体的测定。抗双链DNA抗体又称为抗天然DNA抗体,是抗核抗体的一种类型,几乎所有红斑狼疮病人都有该抗体的升高。目前认为,它在红斑狼疮的发病中起一定的作用,在一些病人中,DNA的大分子可存在于循环血液中或者粘附于多种器官的微血管上,如肾脏、肺和脑组织,与血液中
抗双链DNA抗体参考值
健康人血清1:10稀释为阴性(绿蝇短膜虫法)。 健康人结合率≤20%(放射免疫分析法Farr试验)。 一般以待测血清A值/阴性对照A值(P/N)≥2.1为阳性,正常人P/N值<2.1(ELISA法)。 正常人为阴性(NC膜上不出现着色点)(滴金免疫渗滤试验)。
细胞化学词汇双链DNA结合域
中文名称:双链DNA结合域外文名称:dsDNA-binding domain定 义:双链DNA结合域,DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。作 用:双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains):一个DNA结合域,它可以结合一段特异的DNA
分子遗传学词汇双链DNA
中文名称:双链DNA英文名称:double-stranded DNA;dsDNA定 义:由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
DNA测序——双脱氧链末端终止法
实验方法原理DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3'-OH末端上进行的。由于2’,3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3'-位脱氧而失去游离-OH,当它参入到DNA链后,3'-OH末端消失,使DNA链的延伸终止。 本实验根据此原理,将待测DNA片段插入单链噬菌体M13载体,
双链DNA探针随机引物合成法
随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是:(1)Klenow片段没有5'→3'外切
抗双链DNA抗体(aniDNA)的临床意义
阳性或增高: 可能为系统性红斑狼疮,还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。 结果阳性可能疾病: 系统性红斑狼疮 、 系统性红斑狼疮性关节炎 、 系统性红斑狼疮所致脊髓病。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的临床意义
阳性或增高: 可能为系统性红斑狼疮,还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。 结果阳性可能疾病: 系统性红斑狼疮 、 系统性红斑狼疮性关节炎 、 系统性红斑狼疮所致脊髓病。