双链DNA探针切口平移法
当双链DNA 分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA 聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA 链移动,用放射性核苷酸代替原先无放射性的核苷酸，将放射性同位素掺入到合成新链中。最合适的切口平移片段一般为50-500个核苷酸。切口平移反应受几种因素的影响: (a) 产物的比活性取决于[α-32 P]dNTP的比活性和模板中核苷酸被置换的程度。(b) DNA 酶Ⅰ的用量和E.coli DNA 聚合酶的质量会影响产物片段的大小。(c) DNA 模板中的抑制物如琼脂糖会抑制酶的活性, 故应使用仔细纯化后的DNA 。材料： 待标记的DNA 。设备： 高速台式离心机，恒温水浴锅等。试剂：(1)10×切口平移缓冲液:0.5mol/L......阅读全文
DNA双链末端的概念
中文名称平端英文名称blunt end定 义DNA双链末端平齐而无突出单链。应用学科遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
双链DNA的结构特点
中文名称双链DNA英文名称double-stranded DNA;dsDNA定 义由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
双链DNA探针标记法
分子生物研究中，最常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 1.切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连
双链互补DNA的定义
中文名称双链互补DNA英文名称double-strand cDNA;dscDNA定 义以双链互补DNA为模板合成的双链DNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
双链DNA的结构特点
中文名称双链DNA英文名称double-stranded DNA;dsDNA定 义由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
细胞化学词汇双链DNA
中文名称：双链DNA英文名称：double-stranded DNA;dsDNA定 义：由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科：遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
解旋酶打开DNA双链过程破解
美国温安洛研究所近日发布公告称，该所科学家和洛克菲勒大学合作，成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA（脱氧核糖核酸）复制的结构过程，并首次观察到其与DNA间的相互作用。这项发表在美国《国家科学院学报》上的最新研究，为生命繁殖之谜提供了全新注解。 温安洛研究所教授李慧琳（音译）从酵母生物体内提
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,用
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA 分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA 聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA
解旋酶打开DNA双链过程破解
美国温安洛研究所近日发布公告称，该所科学家和洛克菲勒大学合作，成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA（脱氧核糖核酸）复制的结构过程，并首次观察到其与DNA间的相互作用。这项发表在美国《国家科学院学报》上的最新研究，为生命繁殖之谜提供了全新注解。 温安洛研究所教授李慧琳（音译）从酵母生物体内提
细胞化学词汇DNA双链体
中文名称：DNA双链体英文名称：DNA duplex定 义：两条以3′，5′-磷酸二酯键相连而成的反向多核苷酸链通过沿着其轴向的互补碱基对的氢键交联在一起形成的双链DNA，通常形成双螺旋的结构。可以共价闭合成环状分子，形成超螺旋DNA。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,
双链DNA探针标记法介绍
分子生物研究中，最常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。1. 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的
细胞化学词汇双链互补DNA
中文名称：双链互补DNA英文名称：double-strand cDNA;dscDNA定 义：以双链互补DNA为模板合成的双链DNA。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
抗双链DNA抗体(aniDNA)的简介
抗DNA抗体包括抗双链DNA抗体、抗单链DNA抗体和抗zDNA抗体。 检验中一般是指与双链DNA和单链DNA都反应的抗双链DNA抗体。 抗双链DNA抗体阳性是系统性红斑狼疮的标志，阳性率达90%以上，有较高的特异性，因而抗双链DNA抗体对系统性红斑狼疮的诊断和治疗监控极重要。抗双链DNA抗体在其
细胞化学词汇双链DNA结合域
中文名称：双链DNA结合域外文名称：dsDNA-binding domain定 义：双链DNA结合域，DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。作 用：双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains)：一个DNA结合域，它可以结合一段特异的DNA
什么是抗双链DNA抗体测定
抗双链DNA抗体测定是对抗双链DNA抗体的测定。抗双链DNA抗体又称为抗天然DNA抗体，是抗核抗体的一种类型，几乎所有红斑狼疮病人都有该抗体的升高。目前认为，它在红斑狼疮的发病中起一定的作用，在一些病人中，DNA的大分子可存在于循环血液中或者粘附于多种器官的微血管上，如肾脏、肺和脑组织，与血液中
双链DNA探针标记法的介绍
分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。 双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到
DNA双链体的结构和功能
中文名称DNA双链体英文名称DNA duplex定 义两条以3′，5′-磷酸二酯键相连而成的反向多核苷酸链通过沿着其轴向的互补碱基对的氢键交联在一起形成的双链DNA，通常形成双螺旋的结构。可以共价闭合成环状分子，形成超螺旋DNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
限制酶切割双链DNA的方式
限制酶切割双链DNA的方式有两种，产生的末端也有两种：第一种是交错切割，即两条链的切点不在同一水平而是相隔数个碱基，故断口产生两小段自身互补的单链，这种末端容易互补连接，称为粘性末端（cohesive terminus）；第二种为平整切割。
分子遗传学词汇双链DNA
中文名称：双链DNA英文名称：double-stranded DNA;dsDNA定 义：由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科：遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
双链DNA探针随机引物合成法
随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是：(1)Klenow片段没有5'→3'外切
DNA测序——双脱氧链末端终止法
实验方法原理DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3'-OH末端上进行的。由于2’，3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3'-位脱氧而失去游离-OH，当它参入到DNA链后，3'-OH末端消失，使DNA链的延伸终止。 本实验根据此原理，将待测DNA片段插入单链噬菌体M13载体，
抗双链DNA抗体参考值
健康人血清1：10稀释为阴性（绿蝇短膜虫法）。 健康人结合率≤20%（放射免疫分析法Farr试验）。 一般以待测血清A值/阴性对照A值（P/N）≥2.1为阳性，正常人P/N值＜2.1（ELISA法）。 正常人为阴性（NC膜上不出现着色点）（滴金免疫渗滤试验）。
抗双链DNA抗体的检测方法
检测抗DNA抗体的方法有多种，如ELISA、IIF、金标法、免疫印记法、放免法等。其中最特异敏感的是应用锥虫或血鞭毛虫（如绿蝇短膜虫）作基质测定抗dsDNA抗体。因为这些血寄生虫的动基体内含大量的纯dsNDA，无其他抗原干扰；在阳性结果时，可见鞭毛一端的动基体显示清晰的荧光。因此该试验用于测定抗
抗双链DNA抗体(aniDNA)的临床意义
阳性或增高： 可能为系统性红斑狼疮，还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。 结果阳性可能疾病： 系统性红斑狼疮 、 系统性红斑狼疮性关节炎 、 系统性红斑狼疮所致脊髓病。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的正常值
Farr法结合活性小于或等于20%。 间接免疫荧光法阴性。 斑点免疫结合试验小于1:40（阴性）。 （注具体参考值请根据各实验室而定。）
抗双链DNA抗体(aniDNA)的正常值
Farr法结合活性小于或等于20%。 间接免疫荧光法阴性。 斑点免疫结合试验小于1:40（阴性）。 （注具体参考值请根据各实验室而定。）
抗双链DNA抗体(aniDNA)的检查过程
检查方法：测定抗双链dSDNA的方法有多种，如免疫扩散、对流免疫电泳、凝集试验、科体结合试验、间接免疫荧光法、放射免疫分析、酶联免疫吸附法等。目前最常用的是放射免疫分析、间接免疫荧光和酶联免疫吸附法。
抗双链DNA抗体(aniDNA)的注意事项
检查时要求：一般认为抗双链DNA的效价与病情相平行，即病情活动时，抗DNA抗体效价升高，病情缓解时，效价降低。由于各地测定的方法不同，所以正常值也不同，一般来说，结合率要大于20%以上才有临床意义。 检测技术的特异性都不是100%的。例如，绿蝇短膜虫动基体中虽不含ssDNA，但可能含少量组蛋白