胶体金标记的抗体是什么意思
胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。 1971年Faulk 和Taytor将胶体金引入免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法(immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA),用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点。 免疫胶体金技术的基本原理: 胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,......阅读全文
乳胶和胶体金区别
应该是胶体金贵因为原理不同,普通聚苯乙烯乳胶和抗体的结合是无选择性的物理静电吸附,抗体很难结合到乳胶表面,即使致敏上的抗体也容易从乳胶微球上脱落或者变性失活,而使用多肽缩合剂或者交联剂则操作过程繁琐和耗时。胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸作用下,可以聚合成一
免疫胶体金技术1
(一) 原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与
胶体金法的特点
胶体金技术具有方便快捷、特异敏感、稳定性强、不需要特殊设备和试剂、结果判断直观等优点, 因而特别适合于广大基层检验人员以及大批量检测和大面积普查等, 具有巨大的发展潜力和广阔的应用前景。
什么是胶体金法
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是
胶体金法怎么用
胶体金与标记蛋白简介在不同还原剂的作用下,由氯金酸(HAuCL4)可以制备出金颗粒直径在0.8-500nm的胶体金。制备好的胶体金保存时间较长,可在4℃保存6个月以上,或在室温下可保存1-2个月。胶体金在做为标记探针时,不同用途选用的胶体金的直径范围也不同,用于免疫快速检测的胶体金颗粒直径范围一般在
免疫胶体金技术2
(3)配制胶体金溶液的pH以中性(pH7.2)较好。(4)氯金酸的质量要求上乘,杂质少。最好是进口的。(5)氯金酸配成1%水溶液在4℃可保持数月稳定,由于氯金酸易潮解,因此在配制时,最好将整个小包装一次性溶解。 (三) 胶体金标记蛋白的制备 胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在
胶体金与蛋白制备
胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。1.待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.005Mo
胶体金标记蛋白A技术
胶体金标记蛋白A技术(Protein A-gold technique, PAg法) PAg复合物制备方法简便,作为第二抗体,无种属特异性,可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结
胶体金法怎么用
胶体金与标记蛋白简介在不同还原剂的作用下,由氯金酸(HAuCL4)可以制备出金颗粒直径在0.8-500nm的胶体金。制备好的胶体金保存时间较长,可在4℃保存6个月以上,或在室温下可保存1-2个月。胶体金在做为标记探针时,不同用途选用的胶体金的直径范围也不同,用于免疫快速检测的胶体金颗粒直径范围一般在
胶体金标记蛋白A技术
胶体金标记蛋白A技术(Protein A-gold technique, PAg法) PAg复合物制备方法简便,作为第二抗体,无种属特异性,可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A
什么是胶体金法
什么是胶体金法1. 胶体金法是指在白磷、抗坏血酸、柠檬酸钠、单宁酸等还原剂的作用下,氯金酸(HAuCl4)能聚合一定大小的金颗粒,在静电作用下形成稳定的胶体态,形成带负电荷的疏水凝胶溶液,又在静电作用下形成稳定的胶体态,故称胶体金法。2. 胶体金也是一种理想的免疫电子显微镜免疫标记物。
常用的免疫胶体金检测技术免疫胶体金光镜染色法
细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强胶体金标记的敏感性。免疫胶体金电镜染色法可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负染。可用于病毒形态的观察和病毒检测。
免疫胶体金技术测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定
胶体金探针的质量鉴定
1 .金颗粒的大小及均匀度 用有Formvar支持膜的镍网蘸取金标记 试剂 ,空气干燥后,透射电镜下观察金颗粒的大小及均匀度,计算平均直径,如电镜放大倍数10万,照片放大为2.5倍,100000×2.5=250000=25nm。空气中干燥后乙酸铀负染,在透射电镜下观察,可见金颗粒周围有一明显的空晕,
免疫胶体金的应用特点
1971年Faulk 和Taytor将胶体金引入免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatography)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay
免疫胶体金技术的简介
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,英文缩写为:GICT。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一
胶体金怎么样制备?
(一)制备原理:一般采用还原法,常用的还原剂有枸橼酸钠、鞣酸、维生素C、白磷、硼氢化钠等。向金溶液内加入还原剂,使金离子还原成金原子,形成金颗粒悬液,也称金溶胶。(二)技术要点:金溶胶的光散射性与溶胶颗粒的大小密切相关,一旦颗粒大小发生变化,光散射也随之发生变异,产生肉眼可见的显著的颜色变化,这就是
免疫电镜胶体金标记法
第四节 免疫电镜胶体金标记法 金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,
胶体金法检测流程
这个要看哪家生产的什么产品了,检测的样本不同,一般检测方法也不大相同,但是基本上都是先采样、后样本处理(非必须)、后滴加检测液,后判读结果。胶体金检测法快速准确,操作简单,结果直观,适合基层检测和大众使用,以上海快灵的黄曲霉毒素检测卡为例,样本前处理(粉碎)-----样本提取(10分钟)-----样
胶体金标记实验步骤
1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。(1)待标记蛋白溶液
为什么叫胶体金法
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是
胶体金分散颗粒制备实验
实验方法原理 白磷还原法的建立已有近百年的历史,由于此法操作较为简便,制备出来的胶体金颗粒大小较一致,因而应用较为广泛,现以 Faulk 和 Taylor(1971)的报道为基础介绍这一方法。试剂、试剂盒 氯化金K2CO3双蒸水实验步骤 1. 取 1% 氯化金 1.5 ml、0.1mol/L K2C
胶体金技术是什么原理
胶体金法是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等还原剂的作用下,聚合成相应大小的金颗粒,并由于静电作用而使金颗粒成为一种稳定的胶体状态,形成携带着负电的疏水胶溶液,因为成为了稳定的胶体状
了解胶体金读数仪---l
胶体金读数仪是一种能够快速、准确读取试纸测量结果,使得试纸法检测由传统的定性检测转化为定量分析的仪器,其内嵌反射式光度计。胶体金对光的吸收(反射)具有选择性,对绿光(波长在530nm附近)的反射率随胶体金沉淀量的增加而减少,由此可计算被测物的浓度。 奥盛TSR-200胶体金读数仪适用于胶体
免疫胶体金的制备过程
1蛋白质的处理:由于盐类成分能影响金溶胶对蛋白质的吸附,并可使溶胶聚沉,故致敏前应先对低离子强度的水透析。必须注意,蛋白质溶液应绝对澄清无细小微粒,否则应先用微孔滤膜或超速离心除去。一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在,因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附。2蛋白质最适用量的
免疫胶体金技术的应用
胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。 1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检
胶体金的制备常用方法
胶体的制备一般采用还原法,常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。2.1柠檬酸三钠还原法制备金溶胶取0.01%氯金酸水溶液100mL加热至沸,搅动下准确加入1%柠檬酸三钠(Na3C6H5O7·2H2O)水溶液0.7mL,金黄色的氯金酸水溶液在2min内变为紫红色,继续煮沸15min
胶体金检测常用检测技术
免疫胶体金光镜染色法 细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强胶体金标记的敏感性。 免疫胶体金电镜染色法 可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负
poct的过去:胶体金时代
虽然对于公众来讲,“胶体金”的知名度远没有现在的“土豪金”这样高,但对于检验学的业内人士来讲,“胶体金”代表着一个时代。胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 自从16世纪欧洲现代化学的奠基人、杰出的医师、化学家Paracelsus制备出“饮用金”
免疫胶体金(Immune-colloidal-gold)
原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸( HAuCl4 )在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基