HE染色的方法步骤及注意事项

一、实验步骤:(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。(2)样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。(3)染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。(4)分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。(5)染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。(6)吹干或自然晾干细胞 爬片后,中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。二、注意事项:1、染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染苏......阅读全文

HE4一种新的肿瘤标志物

   HE4中文名叫人附睾蛋白4,最早在人附睾远端的上皮细胞中发现。由两个核心结构组成:约25KDa的天然N端糖基化蛋白和两个乳清酸性蛋白核心区域(WAP,由4个二硫键核心区域和8个半胱氨酸残基组成)。  HE4的编码基因有多个同源兄弟,同样编码WAP核心蛋白。SLPI和Elafin蛋白就是其中研究

人附睾蛋白4(HE4)酶联免疫分析(ELISA)

人附睾蛋白4(HE4)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中付睾蛋白4(HE4)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人附睾蛋白4(HE4)水平。用纯化的人附睾蛋白4(HE4)抗体包被微孔板,制成

人附睾蛋白4(HE4)为女性带来福音

什么是HE4?人附睾蛋白4(HE4)是一种肿瘤标志物。正常生理情况下,HE4在人体中有非常低水平的表达,但在卵巢癌组织和患者血清中均高度表达,可用于卵巢癌的早期诊断、鉴别、治疗监测及预后评估。88%的卵巢癌患者都会出现HE4升高的现象。此前因为缺乏可针对性用于卵巢癌早期诊断的检测手段,因此,卵巢癌患

糖类染色实验——糖原染色

实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水

人类染色体姊妹染色单体差别染色

     姊妹染色单体区分染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是70年代中期发展起来的染色体处理技术。Latt(1973)在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),当用Hoechst33258 荧光染料染色时,发现了姊妹染色单体的色差反映和它们

亚太15国批准HE4用于卵巢癌早期诊断

HE4作为卵巢癌的血清标志物,可用于诊断卵巢癌。卵巢癌是妇科常见且死亡率较高的肿瘤之一,在欧美等地区卵巢癌发病率高达十万分之十五。卵巢癌因早期临床症状不明显极易造成漏诊与误诊。来自美国国立癌症研究所的报告指出,近20年来卵巢癌的5年生存率一直徘徊在较低水平,而5年

微生物培养基的原理、制作和现象:HE琼脂

成分  脙胨     12g  牛肉膏    3g  乳糖     12g  蔗糖     12g  水杨素    2g  胆盐     20g  氯化钠    5g  琼脂     18~20g  蒸馏水           1000mL  0.4%溴麝香草酚蓝溶液    16mL  Andrad

HE4肿瘤标志物检测助力远离卵巢癌

  “近30年来卵巢癌患者的5年生存率没有明显提升,主要原因是早诊早查意识不够、规范化治疗和治疗方式选择不当。”近日,重庆市肿瘤医院妇科肿瘤中心首席专家、学科带头人周琦指出,卵巢癌可防可治,而治愈的关键就在于“早”。  现阶段,临床应用于诊断卵巢癌常用的方法为阴道超声检测(TVU)和卵巢癌生物标志物

为什么俄歇电子能谱不能分析h与he元素

俄歇电子谱不能探测He元素,因为He只有一层电子,不能产生俄歇效应;X射线光电子谱不能探测He元素,X射线光电子能谱仪是使样品内层电子产生光电子,但是He只有一层电子,不能探测。

姐妹染色单体分化染色方法

姐妹染色单体差别染色可使中期染色体显示深浅不同的两条单体,能借以观察姐妹染色单体互换(SCE)现象。SCE是两条染色单体在DNA合成中核苷酸序列发生互换而表现出来一种现象。即是细胞分裂是DNA同源重组的结果。SCE既是一种无害的变化(有生理波动),也可受射线、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一

姐妹染色单体分化染色实验

实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体

姐妹染色单体分化染色实验

实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister  chromatid  differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处

革兰氏染色液染色法

  1.葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。    2.结晶紫染色液。    3.革兰氏碘液。    4.95%酒精。    5.番红染液。    6.载玻片。方   法     一、涂片标本的制备(见实验一)    二、革兰氏染色法     1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗

间接染色步骤(细胞表面染色)

实验概要间接标记需要两个孵育步骤,先与一抗再与合适的第二抗体孵育,二抗(不是一抗)结合了荧光染料(FITC、PE、Cy5 等)。请注意这是一个普遍的程序,您可以根据自己的使用情况进行调整。实验步骤1. 收集并洗涤细胞,然后确定细胞总数。细胞通常在聚苯乙烯的圆底 12 x 75 mm2 Falcon

糖类染色实验——黏液物质染色

实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质,依其物质中含有的酸基不同,所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应(ABPAS)染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香

姐妹染色单体分化染色实验

实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体D

染色质染色体和染色单体的区别

  (1)、染色质和染色体的主要成分都是DNA和蛋白质,它们之间的不同,不过是同一物质在细胞分裂间期和分裂期的不同形态表现而已。  染色质出现于间期,呈丝状。它们在核内的螺旋程度不一,螺旋紧密的部分,染色较深,有的螺旋松疏染色较浅,染色质在光镜下呈现颗粒状,不均匀地分布于细胞核中。细胞分裂时染色质细

用HeNe激光器的632.-8nm测试

摘要:我们曾在多功能紫外可见分光光度计的研制工作中,用He-Ne激光器的632. 8nm这根特征谱线来测试波长准确度,得到了满意的结果。 我们曾在多功能紫外可见分光光度计的研制工作中,用He-Ne激光器的632. 8nm这根特征谱线来测试波长准确度,得到了满意的结果。具体作法是:将He-Ne

新型生物标志物HE4助力早期诊断卵巢癌

过去10年间,我国卵巢癌发病率增长了30%,死亡率增加了18%。由于早期症状不明显,且早期肿瘤在盆腔检查中难以察觉,导致70%~75%的卵巢癌患者在确诊时已属晚期,卵巢癌因此被称为"沉默的杀手"。 更为遗憾的是,最近30年来,卵巢癌患者5年生存率都没有明显提升。6月2日,在上海举办的一场主

血细胞化学染色的染色法—铁染色的介绍

  (1)血细胞化学染色的染色法—铁染色的原理:人体内有一定量的以铁蛋白和含铁血黄素形式贮存的铁元素,这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液中反应,生成蓝色的亚铁氰化铁沉淀(普鲁士蓝),定位于含铁的部位。  (2)血细胞化学染色的染色法—铁染色的操作方法:将染色液滴加在骨髓小粒丰富的骨髓涂片上,室温20~30

血细胞化学染色的染色方法—-糖原染色(PAS)的介绍

  (1)血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的原理:过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合,形成紫色化合物,定位于细胞质中。  (2)血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分钟,流水冲洗,晾干。滴加过碘酸溶液

鞭毛染色配制及染色方法实验

实验步骤改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸:     10ml鞣酸:            2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中取

姐妹染色单体分化染色法

1. 实验原理 姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处理技术。1973年Latt在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromode Oxyurdine,BrdU),用Hoechst 3

细菌的简单染色和革兰氏染色

(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。(二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔

细菌的简单染色和革兰氏染色

(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。(二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔

细菌的简单染色和革兰氏染色

(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。 (二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或

脂质染色实验_苏丹-III-染色

实验材料冰冻切片试剂、试剂盒苏丹 III乙醇蒸馏水自来水甘油明胶盐酸乙醇Harris 苏木精仪器、耗材弯钩玻璃棒载玻片实验步骤苏丹 III 染色液:苏丹 III 2.5 g,70% 乙醇 500 ml,充分溶解后,室温下形成饱和溶液,可存放较长时间。1. 冰冻组织切片厚 10~20 μm 左右,采用

抗酸染色配置以及染色方法实验

实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当曾加标本涂片的厚度,以提高检出率。染厚涂片时,须掌握复染色时间,如果背景过深,影响镜检。实验步骤碱性复红染色法:(萋纳Ziehl-Neelsen法)一、实验试剂:1. 萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液:10ml5%石炭酸溶液:       90m

鞭毛染色配制及染色方法实验

实验步骤 改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸:     10ml鞣酸:            2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中

电子染色的染色特点介绍

电子染色(electron stain)是利用某些重金属盐(铀、铅等)能与细胞的某些结构和成分结合,以提高电子密度来增强结构的反差。