利用双重组酶揭示冠状血管转变为心内膜的潜能
近日，中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）周斌团队与复旦大学附属中山医院王利新团队合作，以Coronary vessels contribute to de novo endocardial cells in the endocardium-depleted heart为题在Cell Discovery上发表研究成果。该研究利用双同源重组酶介导的谱系示踪技术揭示了心脏冠状血管转变为心内膜的潜能。 在心脏的发育过程中，冠状血管主要来源于两群祖细胞，第一群祖细胞为将血液循环回心脏的静脉窦（sinus venous, SV），另一群祖细胞则是排列在心腔内的内皮细胞层，即心内膜（endocardium）。在小鼠的心脏中，静脉窦来源的冠状血管主要分布在心室壁的外侧，而心内膜来源的冠状血管主要分布在心室壁的内侧。先前已有文章表明，在静脉窦来源的冠状血管缺失时，心内膜来源的冠状血管能够向外扩展并代偿缺失的冠状......阅读全文
心内膜炎的病因
引起心内膜感染的因素有： 防御机制的抑制： 例如肿瘤患者使用细胞毒性药物和器官移植患者用免疫抑制剂时。病因包括各种细菌、真菌及贝纳特考克斯体(coxiella burnettii)等。临床经过与病原微生物有关，传统分为急性和亚急性两类，其临床经过及病理变化均有所不同。急性感染性心内膜炎(ac
心内膜炎的检查
1、血液检查：常见的血象为进行性贫血，多为正细胞性贫血与白细胞增多，中性粒细胞升高。血沉增快，C反应蛋白阳性。当合并免疫复合物介导的肾小球肾炎、严重心衰或缺氧造成红细胞增多症时，血清球蛋白常常增多，甚至白蛋白、球蛋白比例倒置。免疫球蛋白升高，γ-球蛋白升高，循环免疫复合物增高及类风湿因子阳性。
心内膜炎的鉴别
1、发热性疾病，如以发热为主要表现者，需与伤寒、败血症、结核、风湿热和系统性红斑狼疮等相鉴别。 2、心力衰竭，以心力衰竭为主要表现伴有低热或无发热者，应与心脏病并发心力衰竭相鉴别。 3、风湿性心肌炎，活动性风湿性心肌炎与本病的鉴别较困难，因二者均可有发热、贫血、血沉增快以及心脏损害，但如有栓
心内膜炎的简介
心内膜炎(infective endocarditis)是指由病原微生物直接侵袭心内膜而引起的一种炎症性疾病，常累及心脏瓣膜，也可累及室间隔缺损处、心内壁内膜或未闭动脉导管、动静脉瘘等处。心内膜炎可由细菌、霉菌、立克次氏体及病毒致病。[1]
心内膜炎的症状
起病缓慢，症状多种多样。大多数患者有器质性心脏病，部分患者发病前有龋齿、扁桃体炎、静脉插管、介入治疗或心内手术史。 1.感染症状；发热是最常见的症状。几乎所有的病例都有过不同程度的发热，热型不规则，热程较长，个别病例无发热。此外患者有疲乏、盗汗、食欲减退、体重减轻、关节痛、皮肤苍白等表现，病情
什么是心内膜炎？
心内膜炎是一种心脏疾病，指心脏内膜(包括心瓣膜和心腔内壁)的炎症。该病通常由细菌感染引起，但也可能由真菌、病毒或其他微生物引起。 心内膜炎的症状包括发热、乏力、食欲不振、关节疼痛、皮肤出现小红点等。严重的病例可能导致心脏衰竭、脓毒症、脑梗死等并发症。 治疗心内膜炎的方法包括使用抗生素或抗真菌
双链酶皮内试验的正常值
阴性为(-)：无红肿、硬结或硬结直径15mm。
临床化学检查方法介绍双链酶试验介绍
双链酶试验介绍： 用从溶血性链球菌培养液中提取的链激酶（SK）及链道酶（SD）制成的抗原。双链酶试验正常值： 局部不出现红肿反应者阴性，硬结直径＞5mm者为阳性。双链酶试验临床意义： 意义SK-SD试验阴性者，很可能是细胞免疫功能低下，亦可能是被检者未受相应链球菌的感染。此外，尿毒症者对SK-
双链酶试验抽血前的注意事项
1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后，应禁食，以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。 3、抽血时应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩，增加采血的困难。
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响
双酶切连接反应之全攻略
在进行PCR扩增时候，给引物两端设计好酶切位点，一般说来，限制酶的 选择非常重要，尽量选择粘端酶切和 那些酶切效率高的限制酶，如BamHI、HindIII，提前看好各公司的双切酶所用公用的BUFFER，以及各酶在公用BUFFER里的效率。选好酶切位点后，在各个酶的两边加上保护碱基，其原则可
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响
双链酶试验的注意事项有哪些
一、抽血前的注意事项 1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后，应禁食，以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。 3、抽血时应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩，增加采血的困难。 二、抽血后应注意 1、抽血后，需
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响
双酶切连接反应之全攻略
前一阵子一直在做双酶切质粒重组，失败了 很多次，不过很快改善了 实验方法，用2周重组了 14个质粒。现就自己的体会，结合丁香园战友的宝贵经验，谈一下质粒重组的一些个人经验。1、回收PCR产物：在进行PCR扩增时候，给引物两端设计好酶切位点，一般说来，限制酶的 选择非常重要，尽量选择粘端酶切和 那些酶
双抗体夹心酶标抗体法的相关介绍
双抗体夹心酶标抗体法是检测抗原最常用的方法。将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体，洗涤除去未结合的抗体及杂质。加受检标本，使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。加酶标抗体使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合，彻底
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响
如何使用多功能酶标仪检测双荧光素酶
报告基因检测被广泛应用于研究基因表达及外部刺激下原核和真核细胞的反应。Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。但是报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响
酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于双抗体夹心法ELISA
该法多用于检测多价大分子抗原，但不能用于检测半抗原等小分子物质。 【试剂及配制】 （1） 包被液（pH 9.6 碳酸盐缓冲液） Na2CO3 0.16g NaHCO3 0.29g 蒸馏水加至 100ml (2)稀释液(pH 7.4 -Tween 20) KH2PO4 0.
关于位点特异重组的重组效应简介
位点特异性重组既可以发生在一个DNA分子中，也可以发生在两个DNA分子间。重组酶识别位点有方向性，所以重组时两个重组位点的排列有方向性。 1．插入 当位点特异性重组发生在两个闭环DNA之间或一个闭环DNA与一个线性DNA之间时，重组的结果是DNA插入（即整合），并且插入之后在两端形成同向重复序
重组体配子
中文名称重组体配子英文名称recombinant gamete定 义遗传物质发生重组后形成的配子。应用学科遗传学（一级学科），细胞遗传学（二级学科）
重组DNA转化
目的：在体外连接组装而成的重组DNA分子只能转入合适的受体细胞，才能大量地进行复制、增殖和表达。通过实验学会重组DNA转化的最基本的操作以及如何提高转化效率的基本思路。 原理：带有外源DNA片段的重组体分子在体外构建成后，需要导入适当的宿主细胞内进行繁殖或表达出具有一定生物活性的蛋白。能够作为重组体
DNA重组技术
连接反应的策略 可以采用几种策略来进行外源ＤＮＡ片段和质粒载体的连接。对此，可依据外源ＤＮＡ片段未的性质，以及质粒载体与外源ＤＮＡ上限制酸切位点的性质来作出选择。（一）外源ＤＮＡ片段未的性质带有各种未的外源ＤＮＡ的克隆方法见下表：────────────────────────────────
揭示基因重组过程中关键酶错配容忍度差异机制
近日，中科院大连化学物理研究所研究员李国辉团队与清华大学教授王宏伟团队、陈春来团队合作，在揭示基因重组过程中关键酶错配容忍度差异机制研究中取得新进展。相关研究成果发表在《核酸研究》上。 同源重组是主要的DNA双链断裂修复机制，在真核细胞中主要的重组酶为Rad51和Dmc1。Rad51和Dmc
重组腺病毒转染细胞前为什么要用pacI酶切线性化
包装前需要将腺病毒质粒用PacI酶切线性化与腺病毒的基因组结果及腺病毒的复制机制有关。腺病毒质粒是双链环状DNA，而腺病毒的基因组DNA是双链线性DNA。腺病毒基因组复制的时，先解链暴露出两个反向末端重复序列，然后这两个反向末端重复序列退火，形成锅柄结构，腺病毒基因组的复制是从锅柄的位置开始的。包装
构建重组载体时用两种限制酶切割目的基因的原因
（1）如果将抗虫基因直接导入棉花细胞，由于该基因上缺少复制原点以及启动子和终止子，因此在棉花细胞中不能稳定存在并复制和表达，因此一般情况下，棉花不会具有抗虫特性，需要构建基因表达载体．（2）质粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalI、Hindm、BamHI三种限制酶切割位点，其中BamHI的
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定1
重组DNA是在体外用限制性内切酶，将不同来源的DNA分子进行特异地切割，获得的目的基因或DNA片段与载体重新连接，从而组成一个新的DNA杂合分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞，在宿主细胞中进行无性增殖，获得大量的目的基因或DNA片段，此过程称基因克隆。重组的DNA分子也能够在