常用酶标记法介绍

酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室温放置30分钟后加入含5(g纯化抗体的水溶液1ml,混匀并装透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中慢慢搅拌透析6小时(或过夜)使之结合,然后吸出,加硼氢化钠(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小时,将上述结合物混合液加入等体积饱和硫酸铵溶液,置4℃冰箱30分钟后离心,将所得沉淀物溶于少许0.02mol/L、pH7.4PBS中,并对之透析过夜(4℃),次日离心除去不溶物,即得到酶标抗体,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,......阅读全文

常用酶标记法介绍

酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 , 取出

改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体

HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基,再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联,在标记前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后,再加入硼氢化钠还原成稳定的结合物。 (1) 取HRP 5mg溶

实验动物常用的标记法

常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。二)烙印法用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。(三)针刺法用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠

什么是酶标记法?

  酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 ,

关于酶标记法的基本信息介绍

  酶标记法:酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30

酶标仪酶标法介绍

酶联免疫吸附试验方法简称酶标法,是标记技术中的一种,是从荧光抗体技术,同位素免疫技术发展而来的一种敏感,特异,快速并且能自动化的现代技术。酶标法的基本原理是将抗原或抗体与酶用胶联剂结合为酶标抗原或抗体,此酶标抗原或抗体可与固相载体上或组织内相应抗原或抗体发生特异反应,并牢固地结合形成仍保持活性的免疫

酶标法的相关介绍

  酶标法是指使用 酶联免疫吸附试验( ELISA)来检测HIV抗体。这种方法是根据酶免疫测定原理发展的一种技术,其基本方法分三类:间接法、双抗原夹心法和抗体竞争法。 目前国内外主要使用的是第三代(双抗原夹心法)试剂。血源筛查以第三代 ELISA为主,国际上有些国家和地区已经将第四代 ELISA试剂

免疫电镜胶体金标记法(简称金标法)

1、 包埋后染色 (超薄切片的金标记法)(1)超薄切片厚50~70nm左右,载于200~300网孔的镍网上;(2)滴1%的H2O2液1滴于蜡板上,将网的载片面轻浮于液滴上10min至1h;(3)双蒸水洗3次,每次10分钟。第1、2次洗法如(2),浮于液面上,第3次以盛双蒸水的注射器沿镍网面冲洗,水流

酶联免疫吸附酶标记法的方法特点介绍

酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 , 取出

酶标仪采用的酶标法介绍

 酶标仪即酶联免疫检测仪,是酶联免疫吸附试验的专用仪器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量。  酶标法是什么?  酶联免疫吸附试验方法简称酶标法,是标记技术中的一种,是从荧光抗体技术,同位素免疫技术发展而来的一种敏感

关于酶标板的分类介绍

  类型主要根据酶标仪进行选择。又分可拆和不可拆的,对于不可拆的,就是一整块板上的板条都是连在一起的,那么可拆的就是板子上面的板条是分开的,分出来的板条又有12孔和8孔之分。一般用的较多的是可拆的酶标板,如果你之前买了一些这样的板子,那么完全可以只买些酶标板条就可以了。不同的厂家做出来的酶标板虽然整

酶标分析仪的用途介绍

  酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,例如低紫外区的DNA、RNA定量及纯度分析(A260/A280)和蛋白定量,酶活、酶动力学检测,酶联免疫测定(ELISAs),细胞增殖与毒性分析,细胞凋亡检测(MTT),报告基因检测及G蛋白偶联受体分析(GPCR)等。特别在近几

关于酶标抗体法的基本介绍

  酶标抗体法,又名酶联免疫吸附法(ELISA),利用酶标记抗原或抗体以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。其基本原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性,而相对应的抗体或抗原与某种酶连接成酶标抗体或抗原,酶标抗体或抗原既保留了免疫活性可以与固相载体表面的抗原或抗体结合,又保留

常用免疫组织化学方法的原理免疫酶标方法

免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是最常用的技术。本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是:定位准确,

酶标洗板机

酶标洗板机是全自动处理效果,具备多点定位吸液功能,每孔清洗液残留量

免疫酶标技术

免疫酶标技术1)  直接法1.标本固定。2.PBS洗涤2×3分钟。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6.PBS洗涤3×3分钟。7.DAB+H2O2显色5~10分钟

免疫酶标技术

中文名称免疫酶标技术英文名称immunoenzymatic technique定  义以酶标记抗体(或抗原),通过相应底物被酶解后的显色反应,对细胞和组织标本中的抗原-抗体复合体进行定位、定性分析和鉴定的方法。也可根据酶催化底物显色的深浅程度,定量测定体液标本中待测抗原或抗体的含量。应用学科细胞生物

免疫酶标技术

1) 直接法1.标本固定。2.PBS洗涤2×3分钟。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6.PBS洗涤3×3分钟。7.DAB+H2O2显色5~10分钟,镜下控制染色

免疫酶标技术

实验方法原理 先将酶与抗体结合形成酶标抗体,然后和相应的抗原反应,使抗原抗体复合物上带有酶分子,再与酶的底物H2O2—DAB(3’3—二胺荃联苯胺)发生显色反应,在显微镜下观察,根据颜色产物检测相应抗原。实验材料 抗体试剂、试剂盒 PBSH2O2血清仪器、耗材 显微镜实验步骤 1.  标本固定;2.

自旋标记法的方法介绍

自旋标记 (spin label), 很多物质的分子不表现电子自旋共振(ESR),但对这些分子,人工地使之与自由基(free radical)结合从而得以用ESR法来研究,获得独特的ESR信息,这就是自旋标记法。

酶最常用的纯化方法介绍

酶的纯化属于一种后处理工艺,包括粗制工艺与精制工艺,对超酶液进行浓缩精制是生产高质量酶制剂的重要环节。其提纯手段一般是依据酶的分析大小、形状、电荷性质、溶解度、专一结合位点等性质而建立。要得到纯酶,一般需要将各种方法联合使用。最常用的纯化方法有根据溶解度特性的沉淀法;根据电荷极性的离子交换层析、等电

酶标抗体法检测农药残留的介绍

  农药残留常用的快速检测方法有酶抑制法和ELISA。酶试剂易失活导致反应不稳定,检测结果误差较大,重复性差。ELISA法操作步骤简便,适用于样品量较大的分析筛选,但是ELISA受限于抗体和抗原的制备和提取。已建立检测毒死蜱残留的ELISA方法,检测DDT及其相关化合物的ELISA方法,测定套种氰戊

关于酶标分析仪的相关介绍

  1、 测量准确,重复性好,具有质控功能,无须外接计算机即可自动提供31天质控数据及X平均值、 SD、CV值  2、 能做定性、定量、基因检测  3、 开放型软件,可适应目前国内外任何厂家的试剂  4、 可预设操作程序,并可储存检测结果  5、 检测结果既可直接显示在屏幕上,也可打印保存  6、

酶标检测仪的产品说明介绍

  1、酶标、酶标动力学、紫外、凝集四种功能检测  2、多通道光纤测量系统,2秒检测96孔  3、CUT OFF定性处理系统  4、直线、曲线、直线回归定量系统  5、震板装置、震动时间、程度任意调节  6、可内置8个滤光片。自动转换,单、双多波长检测  7、随机赠送计算机操作软件,随时与计算机实行

酶标抗体法—生物毒素检测的介绍

  酶标抗体法—生物毒素检测:以免疫学为基础的检测方法如ELISA具有实验周期短、设备简单、操作简便等特定而被广泛应用。已建立检测黄曲霉毒素B1直接竞争ELISA法,检测猪肉和鸡肉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素的直接竞争ELISA法,基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析检测赭曲霉毒素A的方法等。

酶标抗体法—转基因检测的介绍

  检测转基因物质的双抗体夹心ELISA具备多克隆抗体费用较低。单克隆抗体亲和力高的特点,使得后续研究开发的试剂盒检测成本低廉,灵敏可靠,而且可以稳定、方便地提供标准化试剂,便于实现工业化生产。双抗体夹心ELISA检测方法的研究和建立,为制备免疫胶体金试纸条提供了便利,为建立转基因动物的现场、快速查

酶标分析仪的相关知识介绍

    国产实验室仪器近年来发展迅猛,在技术上已经较以往有了大幅度的提升,在价格上更是有较大的优势,因此当前国产实验室仪器的应用前景非常广阔,而随着实验室仪器种类和数量的不断增多,酶标分析仪这种仪器在实验室中也常能看到它的身影,为了让大家对其有更深的了解,这里就酶标分析仪的功能、工作原理和清洁等方面

关于酶标板的选择和分类介绍

  要根据您的酶标仪进行选择。  另外,又分可拆和不可拆的,对于不可拆的,就是一整块板上的板条都是连在一起的,那么可拆的就是板子上面的板条是分开的,分出来的板条又有12孔和8孔之分。一般现在用的较多的是可拆的酶标板,如果你之前买了一些这样的板子,那么现在完全可以只买些酶标板条就可以了。不同的厂家做出

关于酶标板的基本信息介绍

  酶标板(ELISA PLATE)在酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,参与免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和离子强度、pH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。

酶标板的分类

  这这要根据您的酶标仪进行选择。  要根据您的酶标仪进行选择。  另外,又分可拆和不可拆的,对于不可拆的,就是一整块板上的板条都是连在一起的,那么可拆的就是板子上面的板条是分开的,分出来的板条又有12孔和8孔之分。一般现在用的较多的是可拆的酶标板,如果你之前买了一些这样的板子,那么现在完全可以只买