蛋白质分离纯化的5种方法

蛋白质分离纯化常用方法有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动.根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等.3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法.4、层析:a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋白质的电荷量及性质不同,故可以通过离子交换层析得以分离.如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来.b.分子筛,又称凝胶过滤.小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能时入孔内而径直流出.5、超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量.不同蛋白质其密度与形态各不相同而分开.......阅读全文

细菌分离纯化的详细方法

平板划线分离,在平板培养出单个细菌菌落后可以做镜检观察。稀释倒平板法:先把微生物悬液作一系列的稀释,分别取不同稀释液少许,与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中

羧肽酶的分离纯化方法

实验概要本实验以面包酵母为初始材料,制备了高纯度羧肽酶Y,并对羧肽酶Y的生化性质进行了检测。实验原理羧肽酶Y(Carboxypeptidase   Y)是由面包酵母中分离得到的一种蛋白水解酶,它对肽和蛋白质羧基末端的各种氨基酸(包括脯氨酸)具有广泛的水解能力,因此该酶已成为C末端分析中常用的一种工具

简述核酸分离纯化的原则

  (一)材料与方法的选择  临床常见的标本有血液,尿液,唾液,组织及培养细胞等;核酸分离与纯化的方法非常多,如何恰当地收集与准备材料,选择适宜的分离与纯化方法是一个首要的问题。首先我们应当明确核酸的分离与纯化并不是最终的目的,不同的实验研究与应用对核酸的产量,完整性,纯度和浓度可能有不同的要求;至

蛋白质的纯化方法

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:1. 机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备

蛋白质的纯化实验

实验材料 Sephacryl S-300胶体试剂、试剂盒 缓冲液buffer A-150仪器、耗材 色析管柱铁夹试管铁架水平仪收集器浓缩用离心机 浓缩用离心管实验步骤 一、仪器设备色析管柱 (Pharmacia C column, 1.6×100 cm)、铁架、铁夹及水平仪;部分收集器(frac

蛋白质的纯化实验

胶体过滤法             实验材料 Sephacryl S-300胶体 试剂、试剂盒

蛋白质纯化的原则

蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。蛋白的纯化大致分为粗分

蛋白质纯化的意义

蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术。 一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质,一些含量十分丰富,一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质,必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。

蛋白质的纯化实验

不发生电泳现象,蛋白质粒子带负电荷,在电场中向负极移动,蛋白质粒子带正电荷;在等电点偏碱性溶液中,在电场中向正极移动,可以将蛋白质进行分离纯化。这种现象称为蛋白质电泳(Electrophoresis).蛋白质的分离纯化的一般原则①高回收率②高纯度③高活性④方便与快捷⑤经济蛋白质的分离纯化的一般步骤①

蛋白质纯化的特点

  1、处理过程为单纯物理过程,无任何相变。设备操作温度低,避免了传统工艺的种种弊端;  2、系统采用先进的膜分离技术,工艺简单,运行稳定可靠,处理效率高;  3、可以对生产废水中的有用物质进行提纯回用,实现经济、环保双赢;  4、设备投资少,运行费用低。[1]

小鼠胰岛分离与纯化

实验概要小鼠胰岛分离与纯化实验步骤一、准备工作:1、小鼠:小鼠应该毛色光滑,并根据实验需要选择合适的性别及年龄。2、准备试剂:Hanks液 、P型酶(Roche) 、FBS 、1640培养基(含7mM glucose 10%FBS)3、准备器具:眼科剪1把 ,眼科镊(直)2把,动脉止血夹(75px)

微生物分离纯化

  微生物:分离纯化  含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(pureculture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。  1、倾

什么叫分离纯化技术

将混合物质通过各种分离方式进行提取。当然分离后的浓缩也是一个纯化的步骤。纯化方式有很多种,溶剂萃取,树脂,膜分离等等。

蛋白质纯化仪

蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分开,必要时可加入相应的保护剂(例如蛋白酶抑制剂),

蛋白质纯化原则

蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。蛋白的纯化大致分为粗分

蛋白质纯化方法

蛋白质的提纯    蛋白质纯化方法属于生物化学技术。1、超速离心法    此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内,达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。    用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时,除个

蛋白质纯化-程序

分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。前处理分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去种皮以免受单宁等物质的污染,油料种子最好先用低沸点

提高面粉色度的5种方法

  小麦面食品是我国城乡居民,尤其是北方居民的主要食品,以小麦面粉为原料制作的食品种类繁多。我国及亚洲其它国家和地区的消费者特别偏爱洁白的面粉及用其制成的馒头、面条和水饺等食品。面粉色度是小麦磨粉品质的主要指标,由于其与出粉率、灰分和麸星含量等有着内在的联系,在很大程度上反映了面粉的质量和制粉精度,

蛋白质分离实验_分离已知pI-的蛋白质

实验材料含10 mg蛋白质/ml 的溶于水的样品试剂、试剂盒缓冲液(pH>pI)仪器、耗材50 μm 内径的未包被的融合硅毛细管柱CE 仪器实验步骤1. 用 pH 高于蛋白质的pI的 5 mmol/L 缓冲液 1/10 (V/F) 稀释蛋白质样品,使蛋白质(终浓度 = 1.0 mg/ml) 产生电荷

高速离心机分离的几种方法

制备型超高速离心机的几种分离方法: A.差速离心:逐次增加离心力,每次可沉降样品溶液中的一些组份。   差速离心是一种最常用的方法。在这种方法中,离心管在开始时装满了均一的样品溶液。通过在一定速度下一定时间的离心后,就可得到两个部份:沉淀和上清液。   通常在第一次离心时把大部分不需要的大粒子沉降去

高速离心机分离的几种方法

 离心分离的几种方法    制备型超高速离心机的几种分离方法:    A.差速离心:逐次增加离心力,每次可沉降样品溶液中的一些组份。    差速离心是一种zui常用的方法。在这种方法中,离心管在开始时装满了均一的样品溶液。通过在一定速度下一定时间的离心后,就可得到两个部份:沉淀和上清液。    通常

高速离心机分离的几种方法

制备型超高速离心机的几种分离方法:    A.差速离心:逐次增加离心力,每次可沉降样品溶液中的一些组份。    差速离心是一种z常用的方法。在这种方法中,离心管在开始时装满了均一的样品溶液。通过在一定速度下一定时间的离心后,就可得到两个部份:沉淀和上清液。    通常在*次离心时把大部分不需要的大粒

高速离心机分离的几种方法

  制备型超高速离心机的几种分离方法:  A.差速离心:逐次增加离心力,每次可沉降样品溶液中的一些组份。  差速离心是一种最常用的方法。在这种方法中,离心管在开始时装满了均一的样品溶液。通过在一定速度下一定时间的离心后,就可得到两个部份:沉淀和上清液。  通常在第一次离心时把大部分不需要的大粒子沉降

浅谈常用纯化制备纯水的六种方法

实验室纯水的制备方法有多种,最常用的为离子交换、活性炭吸附、微孔过滤、超滤、反渗透、紫外线照射等六种。1、离子交换法离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水,水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透(RO)处理之前,先将水

AKTAavant蛋白质分离纯化系统获2010国际工业博览会银奖

AKTAavant蛋白质分离纯化系统获得“2010中国国际工业博览会银奖”    承接世博会在上海成功举办,2010中国国际工业博览会于11月9日 -13日在上海新国际博览中心举行。中国工博会是由国家发展和改革委员会、商务部、工业和信息化部、科学技术部、教育部、中国科学院、中国工程院

离子交换层析法分离纯化蛋白质有哪些局限性

1,离子交换树脂固定床的床层压力会随着分离过程的进程而不断加大,需要重新填充。同时,也造成固定床填充过程操作麻烦,而且密封性要求高。2,蛋白质分离纯度问题,如果在出峰之后再行切换接收馏分,而在峰行下降后提前切换,虽可以保证纯度,但蛋白分离收率则会下降。3,由于交换层析介质决定,不同蛋白质相互分离效果

蛋白质及蛋白质含量测定的几种方法

蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。蛋白质主要用于维持、生长、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白质含量的检测成为一项日常性且必需性的工作。 蛋白质含量测定的几种方法  1紫外分光光度法 蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范围内,蛋白质溶

蛋白质及蛋白质含量测定的几种方法

   蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。蛋白质主要用于维持、生长、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白质含量的检测成为一项日常性且必需性的工作。    蛋白质含量测定的几种方法   1紫外分光光度法   蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,使蛋白质对280nm的光波具