尿中包涵体检查的临床意义
异常结果:对肾小球疾病患者进行尿病毒包涵体检测。结果尿病毒包涵体与血清HBV 抗原及肾组织 HBsAg 沉积检测呈阳性。尿病毒包涵体的检测为HBV相关肾炎诊断提供重要依据. 需要检查的人群:肾小球疾病患者。......阅读全文
尿中包涵体检查的临床意义
异常结果:对肾小球疾病患者进行尿病毒包涵体检测。结果尿病毒包涵体与血清HBV 抗原及肾组织 HBsAg 沉积检测呈阳性。尿病毒包涵体的检测为HBV相关肾炎诊断提供重要依据. 需要检查的人群:肾小球疾病患者。
尿中包涵体检查的简介
尿中包涵体检查是一项用于检查尿液是否正常的辅助检查方法。包涵体即表达外源基因的宿主细胞,可以是原核细胞,如大肠杆菌;也可以是真核细胞,如酵母细胞、哺乳动物细胞等。包涵体是病毒在增殖的过程中,常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构,在光学显微镜下可见。多为圆形、卵圆形或不定形。一般是由完整的病
尿中包涵体检查的检查过程
医生收集患者的尿液,通过检验科对尿液的分离检查,测定尿液中病毒包涵体的数目其其它病原体,检查时医生小心操作,以免出错。
尿中包涵体检查的正常值及临床意义
正常值 健康人的体检正常时是检查不到包涵体的。 临床意义 异常结果:对肾小球疾病患者进行尿病毒包涵体检测。结果尿病毒包涵体与血清HBV 抗原及肾组织 HBsAg 沉积检测呈阳性。尿病毒包涵体的检测为HBV相关肾炎诊断提供重要依据. 需要检查的人群:肾小球疾病患者。
尿中包涵体检查的临床意义及注意事项
临床意义 异常结果:对肾小球疾病患者进行尿病毒包涵体检测。结果尿病毒包涵体与血清HBV 抗原及肾组织 HBsAg 沉积检测呈阳性。尿病毒包涵体的检测为HBV相关肾炎诊断提供重要依据. 需要检查的人群:肾小球疾病患者。 注意事项 不合宜人群: 一般无不适合人群。 检查前禁忌:检查前一天晚
尿中包涵体检查的注意事项
不合宜人群: 一般无不适合人群。 检查前禁忌:检查前一天晚上九点以后不要进食,可喝水,检查当天早上起床后不吃东西也不喝水,便于检查准确。 检查时要求:1、留尿液标本时预先选好能装20毫升以上的广口玻璃瓶,用前一定要洗干净。 2、最好留取早上第一次尿标本送检。取尿时,最好先尿出一些再取。
临床化学检查方法介绍尿中包涵体检查介绍
尿中包涵体检查介绍: 尿中包涵体检查是一项用于检查尿液是否正常的辅助检查方法。包涵体即表达外源基因的宿主细胞,可以是原核细胞,如大肠杆菌;也可以是真核细胞,如酵母细胞、哺乳动物细胞等。包涵体是病毒在增殖的过程中,常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构,在光学显微镜下可见。多为圆形、卵圆形或不定
尿中包涵体检查的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群: 一般无不适合人群。 检查前禁忌:检查前一天晚上九点以后不要进食,可喝水,检查当天早上起床后不吃东西也不喝水,便于检查准确。 检查时要求:1、留尿液标本时预先选好能装20毫升以上的广口玻璃瓶,用前一定要洗干净。 2、最好留取早上第一次尿标本送检。取尿时,最好先尿出一
红细胞包涵体试验的临床意义
不稳定血红蛋白病:孵育1~3小时多数红细胞内可出现变性珠蛋白肽链沉淀形成的包涵体。 HbH病:孵育1小时就可出现包涵体,也叫HbH包涵体。G-6-PD缺乏或红细胞还原酶缺乏及化学物质中毒等,红细胞中也可出现包涵体。
从包涵体中纯化表达蛋白
实验材料 表达靶蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液 I细胞裂解缓冲液Ⅱ脱氧胆酸浓盐酸包涵体溶解缓冲液 I包涵体溶解缓冲液ⅡKOHPMSFSDS 凝胶加样缓冲液含尿素的 Tris-ClDNaseI溶菌酶SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 Sorvall GSA 转头或相当的转头pH 试纸磨光
从包涵体中纯化表达蛋白
实验方法原理 蛋白质在大肠杆菌中的高水平表达,常常导致形成相差显微镜下可见的细胞质颗粒或包涵体。这些由表达蛋白聚集成的包涵体很容易与可溶性蛋白和膜结合蛋白分离。高水平表达外源蛋白的细菌经离心浓缩后,可通过机械法、超声处理法或溶菌酶加去污剂的方
从包涵体中纯化表达蛋白
实验方法原理蛋白质在大肠杆菌中的高水平表达,常常导致形成相差显微镜下可见的细胞质颗粒或包涵体。这些由表达蛋白聚集成的包涵体很容易与可溶性蛋白和膜结合蛋白分离。高水平表达外源蛋白的细菌经离心浓缩后,可通过机械法、超声处理法或溶菌酶加去污剂的方法进行裂解。包涵体经离心沉淀后,可用Triton X-100
关于包涵体肌炎的检查介绍
1.实验室检查 血清CK可以正常或升高数倍,但不超过正常值上限的12倍;红细胞沉降率正常。血清免疫球蛋白和自身免疫指标多无异常。 2.肌电图 提示肌源性及神经源性损害。 3.肌肉活检 显示肌纤维大小不一,萎缩肌纤维呈小圆形和小角形,可见肌纤维坏变,尤其是可见较多的肌纤维出现镶边空泡,且
尿素在包涵体复性中的作用
①包涵体就是蛋白的变性聚集后的产物,6M盐酸胍及8M尿素是作为溶解包涵体的溶剂。②复性的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素,从而使得蛋白天然构象逐步形成。所以一般如果起始使用的是6M盐酸胍进行包涵体溶解,这个过程中逐步降低的是盐酸胍的浓度。
关于包涵体肌炎与遗传性包涵体肌病的检查方法介绍
实验室检查: 血清肌酶检查s-IBM的血清CK水平可正常或轻度增加,一般不超过正常值的10~12倍。 其他辅助检查: 肌电图检查s-IBM的EMG特点与PM-DM相似,表现为异常自发性活动增多,短时程运动单位电位和多相波增多。所不同的是s-IBM长时程和短时程运动单位可在同一块肌肉同时出现
包涵体的纯化
关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器
包涵体的纯化
关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器
包涵体的简介
基因工程定义:在某些生长条件下,大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子,它们致密地集聚在细胞内,或被膜包裹或形成无膜裸露结构,这种水不溶性的结构称为包涵体(Inclusion Bodies,IB)。病毒在增殖的过程中,常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构,在光学显微镜下可见。多为圆形、卵圆形或不定
包涵体的纯化4
9、什么叫复性成功 复性效果的检测: 根据具体的蛋白性质和需要,可以从生化、免疫、物理性质等方面对蛋白质的复性效率进行检测。 1,凝胶电泳:一般可以用非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳可以检测变性和天然状态的蛋白质,或用非还原的聚丙烯酰胺电泳检测有二硫键的蛋白复性后二硫键的配对情况。 2,光谱学方法:可以用
包涵体的纯化2
1.2.7重组融合蛋白的纯化 PrP-pET-32a(+)转化表达菌E.coli BL21(DE3),TB培养基中,25℃,AMP 200 ug/ml,摇床(250 r/min)培养至OD600约为1.5,更换等体积新鲜TB培养基,加入IPTG至终浓度1 mM,AMP 200 ug/ml,25℃,4
包涵体的纯化3
做完裂解之后加Triton X-100轻摇30min,蛋白溶解的会多些! 四、包涵体的复性 1、包涵体如何复性 包涵体的复性主要有两种方式: 1,稀释溶液,但是操作的液体量大,蛋白稀释 2,透析,超滤或电渗透析去除变性剂 其中透析很适合实验室应用,但是时间长。另外,如果蛋白质右两个以上的2硫键,很可
包涵体的纯化2
4、超声破碎的条件选择 超声破碎的条件不能一概而论,要看你的实验要求,有的是细菌破碎,有的是对组织细胞进行破碎,要掌握好功率和每次超声时间,功率大时,每次超声时间可缩短,不能让温度升高,必要时在冰浴条件下进行超声破碎。至于每次超声时是否起泡沫到不是关键的问题,这与你超声的量明显有关。 5、如何鉴定细
包涵体的纯化5
还原剂: 由于蛋白间二硫键的存在,在增溶时一般使用还原剂。还原剂的使用浓度一般是50-100mM2-BME或DTT,也有文献使用5mM浓度。在较粗放的条件下,可以使用5ml/l的浓度。还原剂的使用浓度与蛋白二硫键的数目无关,而有些没有二硫键的蛋白加不加还原剂无影响,如牛生长激素包涵体的增溶。对于目标
沙眼包涵体观察
沙眼病人眼结膜刮片,经姬姆萨染色,沙眼包涵体嗜碱性,染成蓝色,位于上皮细胞胞浆内。
红细胞包涵体试验的原理、结果与临床意义
原理:将煌焦油蓝液与新鲜血液一起孵育,不稳定血红蛋白易变性沉淀形成包涵体。结果:阴性。临床意义:不稳定血红蛋白病、HbH病呈阳性。
巨细胞包涵体病的病毒学检查
1、病毒分离 CMV感染,最可靠的直接证据是病毒分离,阳性即可确诊。CMV可从尿、唾液、脑脊液、乳汁及活检组织中分离。婴儿尿中排病毒量大,易于收集,排病毒时间长达数月至数年。尿中排病毒为间歇性,多次尿培养分离可提高阳性率。病毒分离应收集新鲜清洁尿,6小时内接种,是提高阳性率的重要环节。 2、C
巨细胞包涵体病的病理学检查
1、组织病理学检查活检或尸解组织病理切片,用苏术精-伊红或姬姆萨染色后镜检,在光镜下检查受染细胞,可发现细胞及细胞核的巨大化且有包涵体,核内包涵体周围与核膜间有一清晰的透明圈隔开,似猫头鹰眼睛,有诊断价值。但阴性结果不能除外。有报道采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白,过氧化酶连结法(s-P法)检测组
包涵体(inclusion-body)的纯化
包涵体是外源基因在原核细胞中表达时,尤其在大肠杆菌中高效表达时,形成的由膜包裹的高密度、不溶性蛋白质颗粒,在显微镜下观察时为高折射区,与胞质中其他成分有明显区别。包涵体形成是比较复杂的,与胞质内蛋白质生成速率有关,新生成的多肽浓度较高,无充足的时间进行折叠,从而形成非结晶、无定形的蛋白质的聚集体;此
包涵体的实验方法
1、机械破碎2、超声破碎3、化学方法破碎 可以破坏蛋白的次级键从而增溶蛋白。如有人在pH>9.0溶解牛生长激素和牛凝乳蛋白酶包涵体。有些蛋白可以溶解在60mMHCl中。这些方法只适合于少部分蛋白的增溶。变性剂的使用浓度和作用时间:一般在偏碱性性的环境中如pH8.0-9.0,尿素在碱性环境中不稳定,一
包涵体(inclusion-body)的纯化
包涵体是外源基因在原核细胞中表达时,尤其在大肠杆菌中高效表达时,形成的由膜包裹的高密度、不溶性蛋白质颗粒,在显微镜下观察时为高折射区,与胞质中其他成分有明显区别。包涵体形成是比较复杂的,与胞质内蛋白质生成速率有关,新生成的多肽浓度较高,无充足的时间进行折叠,从而形成非结晶、无定形的蛋白质的聚集体;此