magej分析wb条带如何水平

1、首先,打开ImageJ,并且导入要分析的条带。随后在Image-Type中选择8-bit。在Process-subtractbackground中设置rollingballradius=50pixel,记得勾选lightbackground哦。2、其次,进行分析参数的设置。这里选择Analyze-SetMeasurements,然后按照图示勾选参数哦。继续将Analyze-SetScale中Unitoflength设置为pixel。3、然后,点击Edit-Invert,选择合适的形状工具,来选中目标条带。点击Analyze-Measure或者用快捷键Ctrl+M,就可以获得该条带的IntDen值了。4、最后,重复用工具框选择第二个/第三个条带并且Ctrl+M,就可以获得这三个条带的灰度值了,将结果导出到Excel或GraphPad来进行统计分析及作图。......阅读全文

wb条带怎么分析粗细深浅

根据蛋白质表达量分析。wb就是艾滋病抗体确证试验,主要是监测env的条带,只要出现两个env条带,就可以判定是阳性,所以主要是检测env条带。wb条带粗细深浅表示蛋白质表达量,所以粗细深浅根据蛋白质表达量分析。蛋白质表达量是包含蛋白质的聚集体形态、单体形态和含有fc的片段的加和值。

wb条带放三天显影

显影。wb条带放三天看到明显的荧光条带,先压三十秒。显影时,把胶片完全浸入显影液,用透明的或者白色的盒子,看到显影,看到胶片上有黑色条带。wb就是艾滋病抗体确证试验,监测env的条带,出现两个env条带,判定是阳性检测env条带。

WB条带是白色怎么补救

WB条带是白色无法补救。WB做出来是白色的条带,一抗、二抗均已稀释也不管用。二抗浓度或者目的条带丰富过高,很快消耗了底物,所以形成了白色条带。WB在做的时候需要稀释二抗浓度就可以了。

WB条带是白色怎么补救

WB条带是白色无法补救。WB做出来是白色的条带,一抗、二抗均已稀释也不管用。二抗浓度或者目的条带丰富过高,很快消耗了底物,所以形成了白色条带。WB在做的时候需要稀释二抗浓度就可以了。

magej分析wb条带如何水平

1、首先,打开ImageJ,并且导入要分析的条带。随后在Image-Type中选择8-bit。在Process-subtractbackground中设置rollingballradius=50pixel,记得勾选lightbackground哦。2、其次,进行分析参数的设置。这里选择Analyze

wb条带周边发黑中间白

wb条带周边发黑中间白的原因是过高的蛋白上样量或一抗和二抗浓度过高都会促使底物过快的消耗,导致我们在做化学发光检测时,发光底物已经消耗殆尽而形成空斑。要解决条带中出现整条白色空斑,需要减少蛋白上样量、稀释一抗和二抗的浓度。如果条带中出现白圈的话,是转膜时候,膜与胶之间有气泡,需要在制作“三明治”时,

wb跑出双条带可以用吗

wb跑出双条带可以用。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。

wb条带反白可以洗了重新孵吗

可以洗了重新孵。孵育抗体要低速,洗膜可以相对快一点。将抗体洗掉,再用内参抗体重新杂交,结果显示信号一致,就可以认为上样量一致。条带中间出现白色反白原因是中心部位高浓度HRP将底物消耗过快,中间部位底物消耗完后无法发光。

wb条带反白可以洗了重新孵吗

可以洗了重新孵。孵育抗体要低速,洗膜可以相对快一点。将抗体洗掉,再用内参抗体重新杂交,结果显示信号一致,就可以认为上样量一致。条带中间出现白色反白原因是中心部位高浓度HRP将底物消耗过快,中间部位底物消耗完后无法发光。

wb两个条带显影怎么弄

打开Imagelab,打开一张Imagelab电泳图片。点击泳道和条带,找到泳道下手动功能,输入泳道号,我们一共有8个条带。

单克隆抗体做wb会有多个条带么

单抗指的是只识别一个抗原决定簇。以前做组织蛋白的时候单抗也会出现杂带,一般就一条很弱的杂带。

wb做出来目的条带有两条

估计跟常温放置有关系,要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话,那么可能就是目的蛋白降解了,你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且,你也可以查查目的蛋白的相关资料,看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式,也有可能是这种情况导致的。

单克隆抗体做wb会有多个条带么

单抗指的是只识别一个抗原决定簇。以前做组织蛋白的时候单抗也会出现杂带,一般就一条很弱的杂带。

wb做出来目的条带有两条

估计跟常温放置有关系,要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话,那么可能就是目的蛋白降解了,你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且,你也可以查查目的蛋白的相关资料,看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式,也有可能是这种情况导致的。

WB-结果上样泳道之间出现条带的原因

曝光时间从30秒开始 就有了,只是浅些罢了。它比目的条带出现的快,这张图曝光时间是5分钟,目的条带有,同时泳道之间的条带也出现了!没法比较目的条带了

单克隆抗体做wb会有多个条带么

单抗指的是只识别一个抗原决定簇。以前做组织蛋白的时候单抗也会出现杂带,一般就一条很弱的杂带。

(WB)实验最后显色过程中总是没有条带

没有条带的原因很多:可能没封闭好,一抗是不是回收次数太多了,二抗不好用,TBST长毛了,等等。这个还有做外包的呀,我们这边实验室western是最普遍的实验了。

WB跑胶后没有条带是什么原因

提取细胞蛋白加1ml裂解液实在是有点多,你可以减少到200-300ul试试,提取蛋白后做个BCA蛋白定量,在做后续的考蓝染色,确定蛋白没有问题再电泳转膜

WB条带大小和蛋白预测八字不合?

实验室玄学千千万,预测和结果不符占一半。WB实验是各位小伙伴们,时常光顾的一个实验。但就是这样一个初级又常用的实验,却会出现各种稀奇古怪的问题。怎么我的条带每次都不一样! 比如在WB实验鉴定蛋白时,我们得到的蛋白质条带大小常常会和预测值有所偏差。这是身患“强迫症”的小伙伴们不能忍的。猛男落泪,谁来看

为什么有些目的蛋白-WB-很难检测到目标条带?

很多时候检测不到目的条带的问题竟都是出在样本制备这一步。质粒有没有转染到细胞中去,转进去后有无表达,表达量是否足以用 WB 检测,目的蛋白是否容易降解?想要得到最佳实验结果,了解清楚这些问题比一遍一遍优化和改进 WB 操作本身更为重要。相信若非首次接触 WB 实验的科研同行,每人都应有一套成熟的实验

WB目标蛋白旁又出现条带是什么原因

可能原因很多:1 同源蛋白;2 表位相似的杂带;3 自身蛋白的修饰,糖基化,磷酸化等;4 降解

为什么wb做出来目的条带有两条

估计跟常温放置有关系,要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话,那么可能就是目的蛋白降解了,你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且,你也可以查查目的蛋白的相关资料,看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式,也有可能是这种情况导致的。

wb压出的片子条带都是黑的是怎么回事

出现黑点和黑斑,原因:膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合,解决办法:封闭牛奶一定要纯,封闭结束之后要洗,我们常常是等到要封闭的时候发现没有牛奶,然后匆匆忙忙用PBST/TBST配置,配的匆忙的时候往往不管是否已经完全溶解。如果没有完全溶解的情况下加牛奶倒膜上,会导致很多不溶性颗粒附着在膜上,这就

wb压出的片子条带都是黑的是怎么回事

出现黑点和黑斑,原因:膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合,解决办法:封闭牛奶一定要纯,封闭结束之后要洗,我们常常是等到要封闭的时候发现没有牛奶,然后匆匆忙忙用PBST/TBST配置,配的匆忙的时候往往不管是否已经完全溶解。如果没有完全溶解的情况下加牛奶倒膜上,会导致很多不溶性颗粒附着在膜上,这就

wb内参可以跑出来,目的基因条带却没有

很正常。内参有证明蛋白样品没问题。没有目的带原因很多。1.目的蛋白是否表达量很低,因为内参表达是很高的。2.抗体的选择是否有问题,有没有阳性对照?? 是一点都没有?还是能看到一点点?

Western-Blot(WB)实验最后显色过程中总是没有条带

没有条带的原因很多:可能没封闭好,一抗是不是回收次数太多了,二抗不好用,TBST长毛了,等等。这个还有做外包的呀,我们这边实验室western是最普遍的实验了。

Western-Blot(WB)实验最后显色过程中总是没有条带

没有条带的原因很多:可能没封闭好,一抗是不是回收次数太多了,二抗不好用,TBST长毛了,等等。这个还有做外包的呀,我们这边实验室western是最普遍的实验了。

为何实际检测到的WB条带与预期的有所区别?

WB是根据蛋白质的大小来分离蛋白的,通常小分子量蛋白在凝胶中的迁移速度要快。但是迁移率也是受到其他因素影响的,这就造成了实际检测到的条带与预期条带的不一致。主要有以下几种常见因素:翻译后修饰-比如磷酸化、糖基化等,这些修饰会增加蛋白质的分子量翻译后剪切- 比如很多蛋白是以前体蛋白的形式合成的,在执行

Western-Blot(WB)实验最后显色过程中总是没有条带

没有条带的原因很多:可能没封闭好,一抗是不是回收次数太多了,二抗不好用,TBST长毛了,等等。这个还有做外包的呀,我们这边实验室western是最普遍的实验了。

Western-Blot(WB)实验最后显色过程中总是没有条带

没有条带的原因很多:可能没封闭好,一抗是不是回收次数太多了,二抗不好用,TBST长毛了,等等。这个还有做外包的呀,我们这边实验室western是最普遍的实验了。