关于腺相关病毒载体的基本介绍

腺病毒相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5 kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染,否则只能建立溶源性潜伏感染。 腺相关病毒载体:现在最常用的腺相关病毒载体是 AAV Helper-Free System,即不需要腺病毒辅助载体的包装系统。......阅读全文

什么是腺相关病毒?

  腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV),也称腺伴随病毒,属于微小病毒科依赖病毒属,是目前发现的一类结构最简单的单链DNA缺陷型病毒,需要辅助病毒(通常为腺病毒)参与复制。它编码两个末端的反向重复序列(ITR)中的cap和rep基因。ITRs对于病毒的复制和包装具有决定

关于基因载体的分类相关介绍

  基因载体,即gene delivery或gene vector,是作为基因导入细胞的工具。犹如火箭能把卫星射向九天一样,基因载体可以把目的基因送入靶细胞内,然后将目的基因释放出来,有的目的基因还可以整合到细胞核中,从而发挥目的基因的特定功能。  1. 基因载体是把基因导入细胞的工具,它的作用是①

关于反转录病毒载体的应用介绍

  反转录病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒的DNA基因组的两端各有一个长末端重复序列(5'—LTR和3'—LTR),有一个包装病毒颗粒时必需的非编码序列ψ+,同时有三个编码蛋白质的基因gag、pol和env。  反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的

关于反转录病毒载体的应用介绍

  反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞。转入宿主的细胞后,反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内,这种整合的位点是随机的。反转录病毒载体在构建时,删去了poi、env基因和gag基因的3’端,但保留了病毒颗粒所需的ψ+序列。其目的

关于杆状病毒表达载体的介绍

  BEV,即“杆状病毒表达载体”。是“Baculovirus Expression Vector”的缩写,译为“杆状病毒表达载体”,有真核表达载体、原核表达载体、酵母表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体等多重区分。目前应用较多的是昆虫杆状病毒表达系统,利用病毒携带目的基因在昆虫细胞中表达。这类系统

关于基因表达载体的基本介绍

  基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。  基因工程(genetic engineering)  构成:启动子、终止子、标记基因、目的基因  又

关于酵母质粒载体的基本介绍

  酵母质粒载体是基因表达载体的一种,既可以在大肠杆菌中、又可以在酵母系统中进行复制与扩增,所以也称为穿梭载体。它分为整合载体和自我复制载体两类。  ①整合载体:它带有一个酵母URA3标志基因和大肠杆菌的复制和报告基因。  ②自我复制载体:该类载体在酵母中可以自我复制。

关于涎腺结石的基本介绍

  涎石是因邪气阻滞,涎液排出不畅,久之裹结成石。以X线检查见舌下、颌下或腮部有结石阴影,自觉胀痛为主要表现的结石类疾病。又名涎腺结石症。  1.询问进食时是否有涎腺胀大及酸胀感。观察导管口有无红肿及脓性分泌物。  2.触诊、X线检查或用细钝头探针检查,以确定有无结石,并注意其大小、部位与数目。

腺相关病毒的组织嗜性

AAV感染不同组织效果图不同AAV血清型的组织亲和性AAV1载体:明显的骨骼肌嗜性(包括心肌),神经组织也可以感染;AAV2载体:泛嗜性;最早应用的AAV载体。有效转导肌肉,肝脏,脑组织,对于视网膜的转导效率和表达水平良好AAV5载体:视网膜、神经系统、关节滑膜嗜性、肺;AAV8载体:明显肝嗜性,视

关于慢病毒载体的包装成分介绍

  包装成分的构建应在不重组病毒的装配和感染力的前提下,尽可能地减少无关的HIV-1蛋白的表达,为野生型病毒的恢复设置障碍。Naldini等在构建包装质粒时,阻止env基因的表达。在此基础上,Zufferey等将包装包装质粒上表达调节蛋白Nef、Vif、Vpr和Vpu的4个基因分别删除或联合删除。这

关于慢病毒载体存在的问题分析介绍

  尽管慢载体的研究有了很大进展,但距离临床应用还有很长的路要走。首先,重组病毒的滴度还不够高,除Naldini等报道的结果外,其余均在101TU/ml~103TU/ml之间,难以达到体内应用的需要;其次,由于HIV复杂的生物学性质,要像常用的小鼠逆转录病毒载体那样建立稳定的HIV载体包装细胞十分困

AAV(腺相关病毒)的结构及生产过程介绍

  在日常生活中,我们经常听到或者亲身参与到各种“圈”中,例如,时尚圈,娱乐圈,艺术圈,还有上海的各大商圈和可食用的甜甜圈,当然,对大多数人来说最熟悉的莫过于微信朋友圈了。话说,在基因治疗领域也有一个圈,小编暂且给它取名叫“病毒载体圈“,此圈中有这样一位傲娇的明星大咖,它不仅理化性质独特(可耐受冻融

关于表达载体的基本信息介绍

  生物学中,基因工程的基本操作,表达载体(Expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点

关于催化剂载体的基本介绍

  催化剂载体又称担体(support),是负载型催化剂的组成之一,是催化剂活性组分的骨架,支撑活性组分,使活性组分得到分散,同时还可以增加催化剂的强度。但载体本身一般并不具有催化活性。  多数载体是催化剂工业中的产品,常用的有氧化铝载体、硅胶载体、活性炭载体及某些天然产物如浮石、 硅藻土等。常用“

关于载体疫苗的基本信息介绍

  载体疫苗将抗原基因通过无害的微生物这种载体进入体内诱导免疫应答。它的特点是组合了减毒活疫苗强有力的免疫原性和亚单位疫苗的准确度两个优势。这种活载体疫苗的一个显著好处是可以有效在体内诱导细胞免疫,这在目前诱导细胞免疫方法还不够好、细胞免疫在一些疾病又特别重要的背景下显得很有前景。在试验中使用的重要

关于载体蛋白的基本信息介绍

  载体蛋白又称做载体(carrier)、通透酶(permease)或转运器(transporter)。能够与特异性溶质结合,通过自身构象的变化,将与它结合的溶质转移到膜的另一侧  载体蛋白,是多回旋折叠的跨膜蛋白质,它与被传递的分子特异结合使其越过质膜。其机制是载体蛋白分子的构象可逆地变化,与被转

关于酰基载体蛋白的基本介绍

  酰基载体蛋白(acyl carrier protein,一般缩写为ACP)是一类具有保守丝氨酸残基的小分子量(9 KDa)酸性蛋白,在脂肪酸合成过程中,ACP携带酰基链完成缩合、还原和脱氢等酶促反应。它是不同酰基链长度脂肪酸的acyl-ACP去饱和反应和质体类酰基转移酶作用的辅助因子。

关于黏性质粒载体的基本介绍

  由于真核基因的结构与功能研究的需要,人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体(cosmid vectors,cosmid是COS site—carrying plasmid的缩写),也称为黏陛质粒或黏粒。是基因工程中一个重要的基因表达载体。

病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装(二)

2.3 蛋白质分析 为了分析AAV Rep和Cap蛋白质表达,按照2.2部分所述进行质粒转染。转染后48小时,将培养物刮到冷PBS/Mg(PBS含有5mM MgCl2),细胞低速离心沉淀收获。细胞沉淀在冰上用200ml STM-NP缓冲液(25mM蔗糖,10mM Tris-HCl,pH8

病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装(一)

摘要:腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒, 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH3和pH5),排除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AA

关于前列腺肿瘤的基本介绍

  前列腺肿瘤包括前列腺上皮来源或间叶来源的肿瘤,大部分为恶性肿瘤,包括前列腺癌、前列腺肉瘤等。前列腺癌患者主要是老年男性。可以有血尿、排尿困难等症状,但随着20世纪90年代中期大量开展血清前列腺特异抗原(PSA)的检测以来,越来越早的前列腺癌被发现,此时往往不伴有任何症状。前列腺肉瘤好发于年轻人,

关于腺样体肥大的基本介绍

  腺样体也叫咽扁桃体或增殖体,位于鼻咽部顶部与咽后壁处,属于淋巴组织,表面呈桔瓣样。腺样体和扁桃体一样,出生后随着年龄的增长而逐渐长大,2-6岁时为增殖旺盛的时期,10岁以后逐渐萎缩。腺样体肥大系腺样体因炎症的反复刺激而发生病理性增生, 从而引起鼻堵、张口呼吸的症状,尤以夜间加重,出现睡眠打鼾、睡

关于唾液腺炎的基本介绍

  一般分化脓性、特异性(结核、放线菌病)及病毒性(流行性腮腺炎)。病毒性在流行性疾病中论述。结核多从淋巴道感染,因腮腺内有真正淋巴结,故腮腺致病者较多,放线菌致唾液腺疾病的极少。急性化脓性腮腺炎现已极少见。过去认为患严重的全身疾病时,血行散播是慢性化脓性腮腺炎的主要感染途径,但是,目前认为是细菌沿

关于腺嘌呤核苷受体的基本介绍

  腺嘌呤核苷受体,是哺乳动物体内的一种分子,是可以突破血脑屏障的分子。腺嘌呤核苷受体能对大分子进入大脑进行控制,当腺嘌呤核苷受体在组成血脑屏障的细胞上被激活时,就会建立起一个进入血脑屏障的通道。  血脑屏障是介于血液和脑组织之间的屏障结构,它由构成大脑血管的特定细胞组成,其对血液中的物质进入大脑具

关于黏液腺囊肿的基本症状介绍

  1、黏液腺囊肿发生于口腔黏膜下,小(常为黄豆大小),边缘清晰,呈透明小泡状,无痛。多有损伤史(局况咬伤最常见)。破溃后流出粘稠白色液体,肿物暂时消失,但破溃处很快愈合,肿物重新出现。  2、大涎腺囊肿(舌下腺、颌下腺及腮腺)为发病部位的肿胀,可有阻塞症状(即进食时肿胀感加剧,进食后逐渐缓解),涎

关于唾液腺肿瘤的基本介绍

  唾液腺肿瘤(Salivary gland)是唾液腺组织中最常见的疾病,其中绝大多数系上皮性肿瘤,间叶组织来源的肿瘤较少见。唾液腺上皮性肿瘤的病理类型十分复杂,不同类型的肿瘤在临床表现、影像学表现、治疗和预后等方面均不相同。

关于子宫腺肌症的基本介绍

  子宫腺肌病是子宫内膜腺体和间质侵入子宫肌层形成弥漫或局限性的病变,与子宫内膜异位症一样,属于妇科常见病和疑难病。子宫腺肌病多发生于30~50岁左右的经产妇,但也可见于年轻未生育的女性,这可能与各种宫腔操作手术增多有一定关系。约15%的患者合并子宫内膜异位症,约50%合并子宫肌瘤。本病的治疗可用药

关于腺热的基本信息介绍

  腺热是传染性单核细胞增多症(infectiousmononucleosis)的简称。腺热是由EB病毒(Epstein—Barr virus,EBV)感染所致的急性传染病。临床上以发热、咽峡炎、淋巴结及肝脾大、外周血中淋巴细胞增加并出现异型淋巴细胞等为其特征。

关于皮脂腺囊肿的基本介绍

  皮脂腺囊肿(sebaceous cyst)俗称“粉瘤”,主要由于皮脂腺排泄管阻塞,皮脂腺囊状上皮被逐渐增多的内容物膨胀所形成的潴留性囊肿。其特点为缓慢增长的良性病变。可发生于任何年龄,但以青壮年多见,好发于头面、颈项和胸背部。皮脂腺囊肿突出于皮肤表面,一般无自觉症状,如继发感染时可有疼痛、化脓。

关于唾液腺疾病的基本介绍

  唾液腺又称涎腺,有大小两种。大的有3对 :腮腺、颌下腺和舌下腺,各有导管开口于口腔;小的分布于唇、舌 、颊、腭、磨牙后等部位的粘膜固有层和粘膜下层内。  常见的唾液腺疾病有以下几种:  ①涎腺结石病。最常见颌下腺导管结石。主要症状:进食时疼痛及颌下腺肿胀。可扪到导管结石。X线照片可显阳性结石。治