关于细胞培养无菌环境的介绍

无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内,解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵,但细胞在体外培养的过程中,缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖,必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。 常见的微生物污染有支原体、细菌、真菌。支原体无致死毒性,可与细胞长期共存,对细胞有潜在影响,但体积小,不易鉴别,可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。细菌增殖快,在短时间内即可大量扩增,并产生毒素杀死细胞。真菌的种类繁多,肉眼可见,漂浮于培养液面上,可呈丝状、管状或树枝状等。......阅读全文

关于细胞培养的取材的介绍

  在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器皿中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养,实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成

关于无菌检查法的制备及培养介绍

  无菌检查法系指检查药品、敷料、缝合线、无菌器具及适用于药典要求无菌检查的其他品种是否无菌的一种方法。 无菌检查在洁净度A级单向流空气区域或隔离系统内进行,其全过程应严格遵守无菌操作,防止微生物污染。单向流空气区与工作台面,必须进行洁净度验证。 生物制品的无菌检查,应按《中国生物制品规程》中有关无

关于无菌检查薄膜滤器的基本信息介绍

  无菌检查薄膜滤器本仪器按照中国药典2005年版之无菌检查法实验要求,参加国际通用标准设计而成,适用于除菌过滤,菌落检查及液体中微粒的测定。  1、无菌检查薄膜滤器的仪器特点:  ①省去抽滤瓶、重量轻、体积小,适宜于净化台内操作。  ②滤器呈半透明状,便于观察,定量控制。  ③滤器备有底座,可配套

关于无菌检查法的抑菌试验-介绍

  在用直接接种法无菌检查前,可用如下方法测定供试品是否具有抑细菌和抑真菌作用。用需气菌、厌气菌培养基4管及真菌培养基2管,分别接种金黄色葡萄球菌、生孢梭菌、白色念珠菌均10~100个菌各两管,其中1管加供试品规定量,所有培养基管置规定的温度,培养3~5天。如培养基各管24小时内微生物生长良好,则供

无菌隔离系统的介绍

  无菌隔离系统是根据 药品生产质量管理规范(GMP)的要求,经专门设计制造,用于医药保健产品 及需要更高级别的环境控制防护的屏障 系统,该系统可最大限度的防治产品受到污染,保护操作者的安全,避免受到毒性物质的伤害。为无菌试验、无菌生产及高致敏性、毒性药物生产防护提供完美的环境控制 技术解决方案。P

关于细胞培养的细胞传代介绍

  细胞密度达到80%~90%时.去培养基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放入细胞培养箱3min。加人1ml DMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。再加

关于细胞培养的取材过程介绍

  在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器皿中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养,实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成

关于细胞培养的培养过程介绍

  将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养

关于细胞培养的营养条件介绍

  1、培养基  细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质,包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。针对不同细胞的营养需求,有多种合成培养基可供选择,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。  2、其他添加成分  在各种合成培养基提供基础营养物质之外,还需根据不同细胞和不同的

关于无菌检查法的对照用菌液的介绍

  1、无菌检查法的对照用菌液— 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)菌液 取金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]的营养琼脂斜面新鲜培养物1白金耳,接种至营养肉汤培养基内,在30~35℃培养16~18小时后,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10~100个菌。 

关于无菌检查法的培养基的介绍

  一、真菌培养基:  (1) 胨 5g  (2) 磷酸氢二钾 1g  (3) 酵母浸出粉 2g 硫酸镁 0.5g  (4) 葡萄糖 20g 水 1000ml  (5) 除葡萄糖外,取上述成分加入水内,微温溶解后,调节pH值约为6.8,煮沸,加葡萄糖溶解后,摇匀,滤清,调节pH值使灭菌后为6.4±0

细胞培养箱里面灌的水必须是无菌的吗

培养箱应放置无菌室,水中应加适量的叠氮钠(防腐)或者硫酸铜,注意空气消毒.消毒培养箱的常用方法有两种:把细胞移出,记住拧紧瓶盖,通常放在超净台内,室温一两个小时,问题不大。如培养室有空调,也可将空调打开。然后先用75%酒精棉球擦拭培养箱内壁,注意不要漏掉任何一个角落。擦拭两遍后用一蒸水或二蒸水清洗内

巨噬细胞培养的环境要求

维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求也不同。人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能受到一

动物细胞培养——无菌技术I:吸取与移液

实验方法原理目的快速准确地将液体从一个容器转移到另一个容器。训练目标熟练掌握吸管的使用,掌握必要的速度、准确性和精度。监督:开始时连续监督,然后让实习生重复练习并记录准确度。时间:30 min~ l h。背景信息已灭菌液体的操作(见 5.2.7 节);试剂瓶和培养瓶的操作(见 6.3.4 节);移液

动物细胞培养——无菌技术I:吸取与移液

实验方法原理目的快速准确地将液体从一个容器转移到另一个容器。训练目标熟练掌握吸管的使用,掌握必要的速度、准确性和精度。监督:开始时连续监督,然后让实习生重复练习并记录准确度。时间:30 min~ l h。背景信息已灭菌液体的操作(见 5.2.7 节);试剂瓶和培养瓶的操作(见 6.3.4 节);移液

动物细胞培养——无菌技术II:准备培养基

实验方法原理目的操作已灭菌溶液时保持无菌状态。训练目标无菌操作:练习灵巧和无菌的操作。监督:连续监督。背景信息无菌技术的目标(见 6.1 节);无菌环境的要素(见 6.2 节);无菌操作(见 6.3 节).在层流超净台中工作(见 6.4 节);可见的微生物污染物(见 19.3.1 节).示范材料和操

关于细胞培养的细胞复苏的介绍

  将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2

关于无菌性脑膜炎的治疗和预后的介绍

  治疗  无菌性脑膜炎的治疗应视病因而定,如为单纯疱疹病毒感染,可采用阿昔洛韦等抗病毒药物治疗,剂量可按单纯疱疹性脑炎的治疗方法进行。  预后  本病病程长短不一,多数病例在数天或数周内恢复健康,一般无后遗症。部分患者恢复较慢或退热后仍有较长时间虚弱,易疲劳,甚至复发。由柯萨奇或埃柯病毒引起的脑膜

关于食品微生物无菌操作及无菌间使用的要求

1.无菌操作要求1. 接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。2. 进行接种食品 样品时,必须穿专用的工作服、帽及拖鞋,应放在无菌室缓冲间,工作前经紫外线消毒后使用。3. 接种食品样品时,应在进无菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球将手擦干净。4. 进行接种所用的吸管,平皿及培养基等必须经消毒灭菌,打开

关于肿瘤细胞培养技术要点的介绍

  取材  材料主要来源于外科手术或活检瘤组织,取材时避免用坏死组织,要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位,瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养,因故不能立即培养者,可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。  成纤维细胞排除  在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞,培养时能与瘤细胞同

关于细胞培养的基本信息介绍

  高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍

关于植物细胞培养的相关技术介绍

  1. 组织培养:诱发产生愈伤组织,如果条件适宜,可培养出再生植株。用于研究植物的生长发育、分化和遗传变异;进行无性繁殖;制取代谢产物。  2. 悬浮细胞培养:在愈伤组织培养技术基础上发展起来的一种培养技术。适合于进行产业化大规模细胞培养,制取植物代谢产物。  3. 原生质体培养:脱壁后的植物细胞

关于动物细胞培养的基本介绍

  在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。  ⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。  ⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用

关于细胞培养技术的研究应用介绍

  一、优点  1.直接观察活细胞的形态结构和生命活动。用于细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学等多种学科研究.  2.直接观察细胞的变化可便于摄影。  3.研究细胞种类如低等到高等到人类、胚胎到成体、正常组织到肿瘤。  4.便于使用各种技术:相差、荧光、电镜、组化、同位素标记等方法观察和研究细

关于细胞培养的注意事项介绍

  (1)第一次开始培养某种细胞时,一定要在WWW. ATCC. ORG上用该细胞的名称进行检索,可以得到关于该细胞的详细信息,包括需要使用的培养基、血清、添加剂、通常的消化时间、传代时间等。对于特定的细胞(如原代培养的细胞),需要查阅相关文献来获得更准确的培养方法。  (2)进入细胞间开始细胞培养

关于细胞培养的细胞冻存介绍

  细胞密度达到80%~90%时,去培养基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放入细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。加入1

细胞培养基本概念和细胞培养的环境

一、细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。 细胞培养 的培养物为单个细胞或细胞群。在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血淋

关于无菌性脑膜脑炎的简介

  无菌性脑膜炎(aseptic meningitis)又称浆液性脑膜炎、淋巴细胞性脑膜炎或病毒性脑膜炎,是多种病毒性神经系统感染的常见表现。无菌性脑膜炎的基本概念是指除细菌或真菌以外的致病因子所致的脑膜炎症,主要特征是脑膜刺激症状和胞脊液细胞增多。虽然多数病例系病毒所致,但也可由其他病原体感染或某

关于无菌袋的简介和用途

  无菌袋,一种以聚乙烯颗粒为原料,在洁净环境下经吹膜、切割、热封、真空包装、灭菌等工序生产出来的一种高科技新型包装材料。  用途  无菌袋以其无菌、无毒、优良的耐低温性能,及良好的化学稳定性和电绝缘等性能,被广泛应用于无菌固体原料药、无菌药用辅料、无菌制剂等产品的转运和暂存,以及无菌胶塞从清洗到灌

中青报:海归该进入“无菌环境”或“奉旨杀菌”

  美国辛辛那提大学华人终身教授李东最近一直在关注刚刚离职的大学教授管敏鑫。   这不仅因为管敏鑫是他的朋友,更因为管敏鑫曾和他一样,是一个观望中国海归环境的海外高层次人才。   如今,管敏鑫提前一步全职回国,却在今年11月被其雇主浙江大学“解聘”尚有一年多才到期的职务。这突如其来的“变故”也让