动物细胞培养——无菌技术II：准备培养基
实验方法原理目的操作已灭菌溶液时保持无菌状态。训练目标无菌操作：练习灵巧和无菌的操作。监督：连续监督。背景信息无菌技术的目标（见 6.1 节）；无菌环境的要素（见 6.2 节）；无菌操作（见 6.3 节）．在层流超净台中工作（见 6.4 节）；可见的微生物污染物（见 19.3.1 节）.示范材料和操作：示范如何擦拭工作面和将物品拿人超净台。解释层流超净台和空气微粒过滤器的工作原理。给实习生示范如何打开和盖上培养瓶和试剂瓶的盖子，以及如何在工作面上摆放盖子。示范如何握持吸管，将其插人移液器，如何使它不碰到任何未灭菌的东西以免被污染，如何在无菌条件下转移液体，如何在移液时倾斜试剂瓶和培养瓶。强调清理和擦拭超净台并检夜卜作面下部．练习概要向 I X 培养基储液中加人必需的添加剂和补充成分。标准方案用 I X 储存液制备培养基（见方案11.7）。标准方案的实脸补充1）向2个已灭菌试剂瓶中分别加人soml培养基．2）将·个试剂瓶放置在4℃......阅读全文
动物细胞培养——无菌技术II：准备培养基
实验方法原理目的操作已灭菌溶液时保持无菌状态。训练目标无菌操作：练习灵巧和无菌的操作。监督：连续监督。背景信息无菌技术的目标（见 6.1 节）；无菌环境的要素（见 6.2 节）；无菌操作（见 6.3 节）．在层流超净台中工作（见 6.4 节）；可见的微生物污染物（见 19.3.1 节）.示范材料和操
动物细胞培养——无菌技术I：吸取与移液
实验方法原理目的快速准确地将液体从一个容器转移到另一个容器。训练目标熟练掌握吸管的使用，掌握必要的速度、准确性和精度。监督：开始时连续监督，然后让实习生重复练习并记录准确度。时间：30 min~ l h。背景信息已灭菌液体的操作（见 5.2.7 节）；试剂瓶和培养瓶的操作（见 6.3.4 节）；移液
动物细胞培养——无菌技术I：吸取与移液
实验方法原理目的快速准确地将液体从一个容器转移到另一个容器。训练目标熟练掌握吸管的使用，掌握必要的速度、准确性和精度。监督：开始时连续监督，然后让实习生重复练习并记录准确度。时间：30 min~ l h。背景信息已灭菌液体的操作（见 5.2.7 节）；试剂瓶和培养瓶的操作（见 6.3.4 节）；移液
动物细胞培养
动物细胞培养 基本练习 2.2 无菌技术I：吸取与移液 练习2 细胞培养介绍 2.2 无菌技术I：吸取与移液 练习3无菌技术II：准备培养基 练习4：单层细胞的换液 练习5：玻璃器皿的清洗和灭菌 练习
哺乳类无菌动物技术
实验概要本实验介绍了哺乳类无菌动物的制备流程。无菌动物在自然界并不存，必须用人为的方法养育而成。一般将临产前的健康动物用麻醉药品或拉断颈椎处死后，立即浸泡在37℃灭菌液中，送进无菌室（或无菌隔离器），按无菌手术进行剖腹，切除带胎子宫（子宫内首先应无菌），将其浸入消毒液里并立即输送到另一只隔离器中，切
细胞培养基本技术
实验概要无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失
细胞培养实验的无菌化技术
The use of aseptic technique is essential for avoiding the production of infection whilst undertaking tissue culture activities.Many activities take p
细胞培养无菌操作技术规范
打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待30min以上，以排尽臭氧。3.穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。 4.风淋2分钟。 5.0.1%过氧乙酸水泡手，擦干。 6. 点燃酒精灯；超净台内应避免放入过多的物品；使用的吸管，滴管，试管，培
动物细胞培养——水的准备与灭菌
实验方法原理目的纯水，火菌水的常规供应．训练目标在无菌区外正确地进行准备操作。了解水的纯化和制备过程的必要知识。监份：间断的。时间：30min.背景信息超纯水（UPW）的制备和灭菌（见 11.4节．图 5.17，图11.10）。示范材料和操作：准备1几作的监督人要讲解水纯化设备的原理和操作，并示范操
实验技术：细胞培养基本技术
一、操作规程：1.实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70％酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染.实验结束后,将实验物品带出工作台。如需要继续进行下一个实验,则用70％酒精擦拭无菌操作台面,再
实验技术：细胞培养基本技术
细胞培养 一、操作规程： 1.实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射30-60分钟灭菌,用70％酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10分钟后,才可开始实验操作.每次操作只处理一株细胞,以免造成细胞交叉污染.实验结束后,将实验物品带出工作台。如需要继续进行下一个实验,则用
动物细胞培养基的成分有哪些
动物细胞培养基有平衡盐溶液、天然培养基、合成培养基、无血清培养液等四种。 平衡盐溶液： 目前常用的平衡盐溶液有乳酸钠和复方氯化钠溶液（1.86%乳酸钠溶液和复方氯化钠溶液之比为1:2）与碳酸氢钠和等渗盐水溶液（1.25%碳酸氢钠溶液和等渗盐水之比为1:2）两种。 天然培养基： 天然培养基
细胞培养基本技术概述（五）
实验用品 1. 种类︰ 1.1. 细胞培养实验用品均为无菌，除了玻璃容器与pasteur pipet 外，其它均为塑料无菌 制品。 1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附，培养容器种类有Tflask, plates, dishes, roller bottle 等，依
细胞培养基本技术概述（四）
细胞传代培养 1. 细胞生长至高密度时，即须分殖至新的培养瓶中，一般稀释比例为1:3 至1:6，依细胞种类而异。 2. 材料： 2.1. 无菌磷酸生理缓冲液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free, D-PBS,GibcoBRL
细胞培养基本技术概述（一）
无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或
细胞培养基本技术概述（七）
冷冻细胞活化 1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒温水槽 3.2 新鲜培养基 3.3 无菌吸管/
细胞培养基本技术概述（三）
血清 1. 血清必须贮存于–20 ～ -70 oC，若存放于4 oC，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将40～45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中，由于血清结冻时体积会增加约10 %，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。 2. 一般厂商提供之血清为无菌，不需再
细胞培养基本技术概述（六）
抗生素 1. 细胞库之细胞培养基不加抗生素 1.1. 培养自ATCC 引进之细胞株，培养基中不加抗生素。 1.2. 培养自其它实验室引进之细胞株，制作token freeze 前培养基须添加抗生素，待token freeze 通过污染测试后，大量培养时则不加抗生素。 2. 寄送活细胞时，须将培养液充
细胞培养基本技术概述（二）
培养基 1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱，避免光照，实验进行前放在37 oC 水槽中温热。 2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月，期间glutamine 可能会分解，若细胞生长不佳，可以再添加适量glutamine。 3. 粉末培养基配制(以1 升为例)： 3.1. 细胞培
动物细胞培养基常见问题20问
培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分，但是最基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。别小看细胞培养，这里可蕴含着大学问。 1.怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件？ATCC（American Type Culture Collection）收集了绝大多数细胞的详细资料。打开ATCC网页的Ce
动物细胞培养基常见问题20问
培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分，但是最基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。别小看细胞培养，这里可蕴含着大学问。 1.怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件？ ATCC（American Type Culture Collection）收集了绝大多数细胞的详细资料。
细胞培养的无菌环境
在冻存过程中保护剂的选择使用，细胞的密度，降低温度速度以及复苏时的温度，融化速度等等都对细胞活力有影响。 常用的仪器设备，则就是有无菌室，超净工作台，三重纯水蒸馏器，抽气泵，压力蒸气消毒器，电热恒温培养箱，培养器具，细胞计数板和电子细胞技术仪等等。 而对于无菌室结构一般由更衣间，缓冲间，操作间三个部
动物细胞培养的基础培养基的介绍
细胞培养基成分复杂，包括盐类、糖类、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素。对这些物质的需求因细胞而有差异，这也导致大量的不同培养基配方出现。主要碳源物质通常是葡萄糖，有时也会使用半乳糖代替，这是因为半乳糖的代谢速度较慢。氨基酸（尤其是L-谷氨酰胺）和丙酮酸盐也可作为碳源。 除了营
动物细胞培养基常见问题20问（二）
11.为什么有客户要求培养基中不含酚红？研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用（特别是雌激素）。为避免固醇类反应，细胞培养，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加酚红的培养基。12.酚红的作用是什么？酚红在培养基中被用来作为PH值指示剂：中
动物细胞培养基常见问题20问（一）
培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分，但是最基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。别小看细胞培养，这里可蕴含着大学问。1.怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件？ATCC（American Type Culture Collection）收集了绝大多数细胞的详细资料。打开ATCC网页的Cel
动物细胞培养的技术应用
1、生物制品的生产(如制备单克隆抗体） 2、转基因动物的培养 3、检测有毒物质并判断其强弱 4、医学研究（生理 病理 药理） 5、器官移植培养 6、筛选抗癌药物
转化细胞培养技术中的准备工作
一、转化细胞准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试等。 1、清洁、消毒、液体 直接接触细胞的用品要超净处理——无
简述动物细胞培养技术的应用
(1)生产病毒疫苗、单克隆抗体、干扰素等。 (2)利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接触抑制的特点，可用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞，以供植皮所需。 (3)培养的动物细胞用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。
细胞培养的前期准备
一.常用设备 准备室的设备： 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。培养室的设备：液氮罐、储品柜（存放杂物）、
如何确认所配制的动物细胞培养基没有被污染
将未接种的培养基在适宜的温度下，放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生即可。动物细胞培养需要提供无菌、无毒环境，因此，除了要对培养液和培养用具进行灭菌外，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。