关于核酸疫苗的质粒载体和启动子的选择
真核表达质粒是核酸疫苗的主体,表达载体表达抗原蛋白的能力越强,诱发宿主产生的免疫应答能力越强。不同类型的启动子/增强子、内含子序列、翻译起始序列、转录终止序列、mRNA的稳定性等调控元件可直接影响基因表达效率,其中启动子是影响核酸疫苗表达的最重要因素。RSV启动子/增强子的表达水平比SV高1000倍,CMV启动子/增强子的表达水平又比RSV高2倍。一般认为CMV是最理想的启动子。强启动子可以产生较好的免疫应答,但弱启动子可能诱导长期的持续性免疫应答。总之,要求用作核酸疫苗的载体必须具备以下特点:在哺乳动物细胞内能高水平的表达目的基因;本身不复制;不会整合到宿主染色体中。......阅读全文
关于核酸疫苗的质粒载体和启动子的选择
真核表达质粒是核酸疫苗的主体,表达载体表达抗原蛋白的能力越强,诱发宿主产生的免疫应答能力越强。不同类型的启动子/增强子、内含子序列、翻译起始序列、转录终止序列、mRNA的稳定性等调控元件可直接影响基因表达效率,其中启动子是影响核酸疫苗表达的最重要因素。RSV启动子/增强子的表达水平比SV高100
质粒载体和启动子的选择对核酸疫苗的影响
真核表达质粒是核酸疫苗的主体,表达载体表达抗原蛋白的能力越强,诱发宿主产生的免疫应答能力越强。不同类型的启动子/增强子、内含子序列、翻译起始序列、转录终止序列、mRNA的稳定性等调控元件可直接影响基因表达效率,其中启动子是影响核酸疫苗表达的最重要因素。RSV启动子/增强子的表达水平比SV高1000倍
关于质粒载体的简介
质粒是小型环状DNA分子,大小为1~200kb(1kb=1000碱基对)。质粒不同于病毒,是裸露的DNA分子,没有外壳蛋白,在基因组中,也没有溶菌酶基因。质粒在宿主细胞内才能完成自身复制,同时将编码的一些非染色体控制的遗传性状进行表达,赋予宿主细胞一些额外的特性,包括抗性特性、代谢特性等,其中对
关于质粒载体的分类介绍
按复制形式 分为严紧型和松弛型复制。 根据质粒DNA复制与宿主之间的关系或在宿主细胞的拷贝数的多少,可以将质粒分为两种不同的复制类型:严紧型和松弛型。严紧型质粒复制受宿主染色体DNA复制的严格控制,拷贝数较小一般只有1~3个拷贝。疏松型质粒的复制宿主的控制比较松,在宿主中的拷贝数比较多,一般
关于质粒载体的特点简介
质粒(plasmid)是细菌或细胞染色质以外的,能自主复制的,与细菌或细胞共生的遗传成分。其特点如下: 是染色质外的双链共价闭合环形DNA (covalently closed circular DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋结构,不同质粒大小在2-300kb之间,15kb的大质粒
关于质粒载体的基本介绍
质粒是小型环状DNA分子,在基因工程中作为最常用,最简单的载体,必须包括三部分:遗传标记基因,复制区,目的基因。 质粒在所有的细菌类群中都可发现,它们是独立于细菌染色体外自我复制的DNA分子。自然界中,质粒是在营养充足时出现的,它在结构、大小、复制方式,每个细菌的拷贝数,在不同的细菌体内的繁殖力
酵母质粒载体的概念和分类
酵母质粒载体是基因表达载体的一种,既可以在大肠杆菌中、又可以在酵母系统中进行复制与扩增,所以也称为穿梭载体。它分为整合载体和自我复制载体两类。①整合载体:它带有一个酵母URA3标志基因和大肠杆菌的复制和报告基因。②自我复制载体:该类载体在酵母中可以自我复制。
关于酵母质粒载体的基本介绍
酵母质粒载体是基因表达载体的一种,既可以在大肠杆菌中、又可以在酵母系统中进行复制与扩增,所以也称为穿梭载体。它分为整合载体和自我复制载体两类。 ①整合载体:它带有一个酵母URA3标志基因和大肠杆菌的复制和报告基因。 ②自我复制载体:该类载体在酵母中可以自我复制。
关于黏性质粒载体的简介
由于真核基因的结构与功能研究的需要,人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体(cosmid vectors,cosmid是COS site—carrying plasmid的缩写),也称为黏陛质粒或黏粒。这是一类人工构建的含有抗性基因、单一克隆位点以及λDNACOS位
质粒载体的载体大小的介绍
大的质粒(大于15kb)不会很好转化而且DNA产量通常很低。在设计实验时要考虑到加入插入片段的最终载体大小,尽量用更小的载体。 兼容性 当多于一个质粒载体必须同时存在于同一个细菌细胞中,这两个质粒的复制子必须是兼容的。当他们不能稳定地共存时,则认为这两个质粒是不兼容的。 选择/检测插入片段
LITMUS39载体载体载体的基本信息和质粒图谱
LITMUS39载体载体基本信息载体名称LITMUS39载体抗性Ampicillin载体长度2817 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷贝数High copy number5'引物M13
质粒载体的分类
按复制形式分为严紧型和松弛型复制。根据质粒DNA复制与宿主之间的关系或在宿主细胞的拷贝数的多少,可以将质粒分为两种不同的复制类型:严紧型和松弛型。严紧型质粒复制受宿主染色体DNA复制的严格控制,拷贝数较小一般只有1~3个拷贝。疏松型质粒的复制宿主的控制比较松,在宿主中的拷贝数比较多,一般有10~20
关于黏性质粒载体的基本介绍
由于真核基因的结构与功能研究的需要,人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体(cosmid vectors,cosmid是COS site—carrying plasmid的缩写),也称为黏陛质粒或黏粒。是基因工程中一个重要的基因表达载体。
载体疫苗的功效和优点
载体疫苗将抗原基因通过无害的微生物这种载体进入体内诱导免疫应答。它的特点是组合了减毒活疫苗强有力的免疫原性和亚单位疫苗的准确度两个优势。这种活载体疫苗的一个显著好处是可以有效在体内诱导细胞免疫,这在目前诱导细胞免疫方法还不够好、细胞免疫在一些疾病又特别重要的背景下显得很有前景。在试验中使用的重要载体
质粒克隆载体的设计和构建的原则
①选择合适的出发质粒出发质粒也叫亲本质粒,它应含有质粒克隆载体必备的元件,如复制起始位点、选择标记基因、克隆位点、启动子和终止子等。②正确获得构建质粒克隆载体的元件一般采用限制性核酸内切酶切割出质粒DNA分子,获得含有某种元件的DNA片段,还可以采用PCR技术从靶DNA中扩增出含某种元件的特异性DN
质粒与载体
一、质粒绝大多数的生物都是以DNA 的形式来储藏其遗传信息。遗传物质要能生生不息地传给后代的首要条件就是它至少要具有一个复制原(ori, origin of replication,或译为复制起点),使整个基因体得以复制。含有复制原的遗传物质称为replicon,我们姑且把它译为为复制体吧!原核性复
简述慢病毒载体的载体质粒
载体质粒上HIV-1的顺式序列通常包括两端的LTR、剪切位点及包装信号Ψ等。此外,研究表明,gag基因5′端的序列可提高载体RNA的包装效率;Rev蛋白需要与Rev反应元件(RRE)相作用,将未剪切的载体转录产物从细胞核转运到胞浆。因此,Naldini等在载体上保留了gag基因5′端350bp的
关于原核表达载体的原件启动子的介绍
启动子是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并起始RNA合成的序列,它是基因表达不可缺少的重要调控序列。没有启动子,基因就不能转录。由于细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子,因此原核表达载体所用的启动子必须是原核启动子。 原核启动子是由两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列组成,对mRNA的合成
质粒载体的改造意义
⑴去掉不必要的DNA区段。⑵减少限制酶的识别位点,一种酶只保留一个。(单一的限制性酶切位点)。⑶加入易于捡出的选择性标记基因。⑷对质粒进行安全性改造,要求质粒不能随便 转移。⑸改造或增加基因表达的调控序列。
酵母质粒载体的特点
酵母质粒载体既可以在大肠杆菌复制与扩增、又可以在酵母系统中复制与扩增,故此类载体又称为穿梭载体(shuttlevector)。在基因工程中,应用上述病毒表达载体在哺乳动物细胞中进行中、小规模的表达是十分实际的。还要有对组织培养技术十分熟悉的前提。但病毒载体的运用仍然存在技术较难、耗时间和不经济的问题
酵母质粒载体的特点
酵母质粒载体既可以在大肠杆菌复制与扩增、又可以在酵母系统中复制与扩增,故此类载体又称为穿梭载体(shuttlevector)。 在基因工程中,应用上述病毒表达载体在哺乳动物细胞中进行中、小规模的表达是十分实际的。还要有对组织培养技术十分熟悉的前提。但病毒载体的运用仍然存在技术较难、耗时间和不经
pDD载体的基本信息和质粒图谱
pDD载体载体基本信息载体名称pDD载体抗性Ampicillin载体长度3040 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Clontech拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpDD载体质粒图谱
pUAST载体的基本信息和质粒图谱
pUAST载体载体基本信息载体名称pUAST载体抗性Ampicillin载体长度8897 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Brand AH, Perrimon N.拷贝数High copy numberpUAST载体质粒图谱
pMiniT载体的基本信息和质粒图谱
pMiniT载体载体基本信息载体名称pMiniT载体抗性Ampicillin载体长度2525 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源New England Biolabs拷贝数High copy numberpMiniT载体质粒图谱
BlueScribe载体的基本信息和质粒图谱
载体基本信息载体名称BlueScribe载体抗性Ampicillin载体长度2746 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Short JM, Fernandez JM, Sorge JA, Huse WD.拷贝数High copy number启动子T3克隆方法Enzyme
pRSET-A载体的基本信息和质粒图谱
pRSET A载体载体基本信息载体名称pRSET A载体抗性Ampicillin载体长度2897 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpRSET A载体质粒图谱
pBS()载体的基本信息和质粒图谱
pBS(-)载体载体基本信息载体名称pBS(-)载体抗性Ampicillin载体长度3204 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS(-)载体质粒图谱
pInvRecA载体的基本信息和质粒图谱
pInvRecA载体载体基本信息载体名称pInvRecA载体抗性Ampicillin载体长度7354 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Sektas M, Gregorowicz M, Szybalski W.拷贝数Low copy numberpInvRecA载体质粒图
pTrcHis-A载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis A载体载体基本信息载体名称pTrcHis A载体抗性Ampicillin载体长度4414 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis A载体质粒图谱
pBS(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBS(+)载体载体基本信息载体名称pBS(+)载体抗性Ampicillin载体长度3204 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS(+)载体质粒图谱