毛细管电泳法比高效液相色谱法柱效高的原因
范德姆特方程最常用的形式如下式所示,该式直观地反映了流动相流速对于分离的影响。式中A,B,C为常数,u表示流动相的流速。 H=A+B/u+C*u A项反映的是被分析物在填充柱中可能采取不同的路径,因而经过的路程也不一样长,引起色谱峰的展宽,这就是“多路径效应”。在毛细管开管柱中不存在多路径效应,这一项为零。,使用空心毛细管柱,无涡流扩散项,毛细管内壁也不涂渍固定液,消除了组分在固定相与流动相间平衡所需的时间,传质阻抗项趋零,而高效液相色谱中存在两种影响因素,因而CE的柱效高于HPLC。 范德姆特方程(英语:VanDeemterequation)在色谱学中是综合考虑了分离过程中引起峰展宽的物理因素、动力学因素和热力学因素后得到的单位柱长的总峰展宽与流动相流速的关系式。一般来说,影响峰展宽的因素包括多路径效应,扩散(径向的和轴向的)与固定相和流动相间的传质阻力。液相色谱中的流动相流速常取出口的流速,即体积流量与柱横截面积之......阅读全文
毛细管电泳仪的保养
卡槽的清洁 松开固定卡槽前方Holder的螺丝,用羊毛刷及ddH2O清洁卡槽,然后用干净的刷子将其擦干,如果可以的话,可以用异丙醇,甲醇或者乙醇代替水进行清洁,这样保存的时间较长。 压力电极的清洁 吸入端电极的清理非常重要,利用甲醇,异丙醇,或者乙醇清洁内部及其顶端。在电极内部
综述毛细管电泳的相关应用
CE具有多种分离模式(多种分离介质和原理),故具有多种功能,因此其应用十分广泛,通常能配成溶液或悬浮溶液的样品(除挥发性和不溶物外)均能用CE进行分离和分析,小到无机离子,大到生物大分子和超分子,甚至整个细胞都可进行分离检测。它广泛应用于生命科学、医药科学、临床医学、分子生物学、法庭与侦破鉴定、
毛细管电泳(HPCE)的工作原理
高效毛细管电泳(high performance capillaryelectrophoresis,HPCE)是近年来发展起来的一种分离、分析技术,它是凝胶电泳技术的发展,是高效液相色谱分析的补充。该技术可分析的成分小至有机离子、大至生物大分子如蛋白质、核酸等。可用于分析多种体液样本如血清或血浆
毛细管电泳的优缺点对比
毛细管电泳优点:(1)高效塔板数目在105-106 片/m 间,当采用CGE 时,塔板数目可达107 片/m 以上;(2)快速一般在十几分钟内完成分离;(3)微量进样所需的样品体积为nL 级;(4)多模式可根据需要选用不同的分离模式且仅需一台仪器;(5)经济实验消耗不过几毫升缓冲溶液,维持费用很低;
毛细管电泳的微全分析
1990年瑞士Ciba-Geigy公司的Manz和Widmer首次提出微全分析系统(Miniaturized total chemical analysis system,μ-TAS)的概念和设计,把微全分析系统的主要构型定位为一般厚度不超过5 mm,面积为数平方厘米至十几平方厘米的平板芯片(包括微
毛细管电泳仪的应用
CE具有多种分离模式(多种分离介质和原理),故具有多种功能,因此其应用十分广泛,通常能配成溶液或悬浮溶液的样品(除挥发性和不溶物外)均能用CE进行分离和分析,小到无机离子,大到生物大分子和超分子,甚至整个细胞都可进行分离检测。它广泛应用于生命科学、医药科学、临床医学、分子生物学、法庭与侦破鉴定、化学
毛细管电泳仪的介绍
毛细管电泳仪以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分的淌度(单位电场强度下的迁移速度)和分配行为的差异而实现各组分分离。
高通量毛细管电泳的概念
中文名称高通量毛细管电泳英文名称high throughput capillary electrophoresis定 义可同时进行多个通道(如96通道)的毛细管电泳,并配以自动上样、激光检测和数据处理等系统。可用于DNA自动测序等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
毛细管电泳是如何工作的?
通常,带电物质开始在电场中移动。电荷,粘度和分子半径是决定分子在电场中的电泳迁移率的三个因素。 电荷 - 阳离子(带正电的分子)向阴极(负电极)移动,而阴离子(带负电的分子)朝向阳极(正电极)移动。 粘度 - 介质的粘度与分子的运动相反,对于特定的分离介质它是恒定的。 离子
毛细管电泳的基础理论
双电层双电层是指两相之间的分离表面由相对固定和游离的两部分离子组成的。双电层是与表面异号的离子层,凡是浸没在液体中的界面都会产生双电层。在毛细管电泳中,无论是带电粒子的表面还是毛细管管壁的表面都有双电层。Zeta 电势电介质溶液中,任何带电粒子都可被看成是一个双电层系统的一部分,离子自身的电荷被异号
全自动毛细管电泳仪
全自动毛细管电泳仪是一种用于生物学领域的分析仪器,于2016年4月7日启用。 技术指标 检出限:单组分5pg/ul;可检测DNA范围:35-45000bp;分辨率:2bp;片段大小精度:
毛细管电泳的分离因素介绍
温度 温度影响分离重现性和分离效率,控制温度可以调控电渗流的大小。温度升高,缓冲液粘度降低,管壁硅轻基解离能力增强,电渗速度变大,分析时间减短,分析效率提高。但温度过高,会引起毛细管柱内径向温差增大,焦耳热效应增强,柱效降低,分离效率也会降低。 添加剂 在电解质溶液中加入添加剂,例如中性盐
毛细管电泳要loading-buffer么
loading buffer的作用不仅仅是有染色,loading buffer的成分往往还有甘油或者蔗糖这是最关键的一点是要将你的样的密度加大,只有加大密度才能在你点样的时候,使得你的样品比TAE的密度大,从而沉的点样孔里边.所以你的问题就可以解释了,如果是6X的,那么应该是5ul的样+1ul的lo
毛细管电泳的基本理论
电泳在电解质溶液中,带电粒子在电场作用下,以不同的速度或速率向其所带电荷相反电场方向迁移的现象叫作电泳。阴离子向正极方向迁移,阳离子向负极方向迁移,中性化合物不带电荷,不发生电泳运动。电渗流在电泳过程中还存在另一种电动现象,即电渗。当高电压通过含有缓冲溶液的毛细管柱时,体相溶液整体朝向一个方向运动,
毛细管电泳的主要应用介绍
CE具有多种分离模式(多种分离介质和原理),故具有多种功能,因此其应用十分广泛,通常能配成溶液或悬浮溶液的样品(除挥发性和不溶物外)均能用CE进行分离和分析,小到无机离子,大到生物大分子和超分子,甚至整个细胞都可进行分离检测。它广泛应用于生命科学、医药科学、临床医学、分子生物学、法庭与侦破鉴定、化学
毛细管电泳仪的分类
1、按分离目的可分:实验室毛细管电泳仪和工业毛细管电泳仪。 2、按分离对象的离子属性可分:无机离子毛细管电泳仪和有机离子毛细管电泳仪。 3、按作用可分:毛细管定量分析电泳仪和毛细管定性分析电泳仪。 4、按分离原理可分:毛细管色谱电泳仪、毛细管区带电泳仪和毛细管凝胶电泳仪等。 5、按分离特
毛细管电泳仪电渗相关
电渗是推动样品迁移的另一种重要动力。所谓电渗是指毛细管中的溶剂因轴向直流电场作用而发生的定向流动。电渗是由定域电荷引起。定域电荷是指牢固结合在管壁上、在电场作用下不能迁移的离子或带电基团。在定域电荷对溶液中的 反号离子吸引下形成了所谓的双电层,致使溶剂在电场作用(以及碰撞作用)下整体定向移动而形
毛细管电泳仪分析优点
毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。一、柱效高:理论塔
毛细管电泳的质谱联用
Olivares,Smith和Henion等分别在1987-1988年提出毛细管电泳-质谱联用(CE-MS)技术,在CE中,紫外检测器由于通过样品的光程较短导致灵敏度较低,特别对一些紫外吸收较弱的化合物的检测。近年由于大气压电离(API)、电喷雾电离(ESI)及新型质谱仪的快速扫描等新技术的出现,足
简述毛细管电泳的优缺点
体内药物分析又称生物药物分析,主要指利用现代分析仪器及方法对人或动物血样、尿样及组织等样品中的药物进行定性、定量分析。广义的体内药物分析包括通过了解药物在体内的变化情况,从而获得各种药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄等信息,有助于药物的实验研究、生产控制以及临床合理应用。体内药物分析方法的完善与提高
毛细管电泳分离因素分离电压
分离电压在CE中,分离电压也是控制电渗的一个重要参数。高电压是实现CE快速、高效的前提,电压升高,样品的迁移加大,分析时间缩短,但毛细管中焦耳热增大,基线稳定性降低,灵敏度降低;分离电压越低,分离效果越好,分析时间延长,峰形变宽,导致分离效率降低。因此,相对较高的分离电压会提高分离度和缩短分析时间,
毛细管电泳的分离分析方法
CE 是在传统的电泳技术基础上于本世纪60 年代末由Hjerten 发明的,其利用小的毛细管代替传统的大电泳槽,使电泳效率提高了几十倍。此技术从80 年代以来发展迅速,是生物化学分析工作者与生化学家分离、定性多肽与蛋白类物质的有利工具。CE 根据应用原理不同可分为以下几种;毛细管区带电泳Capi
毛细管电泳法的检测方法
毛细管电泳通常用到的检测方法有吸收光谱,荧光光谱,热镜,拉曼光谱,质谱和电化学方法。
毛细管电泳分离因素pH值
pH值缓冲体系pH的选择依样品的性质和分离效率而定,是决定分离成败的一大关键。不同样品需要不同的pH分离条件,控制缓冲体系的pH值,一般只能改变电渗流的大小。pH能影响样品的解离能力,样品在极性强的介质中离解度增大,电泳速度也随之增大,从而影响分离选择性和分离灵敏度。pH还会影响毛细管内壁硅醇基的质
毛细管电泳的定义和应用
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,
高效毛细管电泳仪分类
高效毛细管电泳仪分类有多种。1、按分离目的可分:高效毛细管实验室电泳仪和高效毛细管工业电泳仪。2、按分离原理可分:高效毛细管色谱电泳仪、高效毛细管区带电泳仪、高效毛细管凝胶电泳仪和高效毛细管等电聚焦电泳仪等。3、按分离特征可分:高选择性高效毛细管电泳仪、高灵敏度高效毛细管电泳仪和高分离度高效毛细管
毛细管电泳的特点有哪些?
毛细管电泳通常使用内径为25-100 μm 的弹性(聚酰亚胺)涂层熔融石英管。标准毛细管的外径为375 μm,有些管的外径为160 μm。毛细管的特点是:容积小(一根100 cm×75 μm 管子的容积仅4.4 μL);侧面/截面积比大,因而散热快、可承受高电场(100-1000 V/cm);可
毛细管电泳色谱法简介
毛细管电泳色谱法(capillary electrochromatography; CEC)是毛细管电泳与液相色谱相结合形成的一种高效、快速微分离分析技术。毛细管电泳色谱法可以分离离子和中性分子。它是利用缓冲溶液的电渗流作为泵,使被分析的分子通过对其具有不同保留程度的第二相,达到分离的目的。
毛细管电泳系统的基本结构
毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统。毛细管电泳1-温度控制系统;2-高压电源;3-高压电极槽;4-毛细管;5-检测器;6-低压电极槽;7-铂丝电极;8-记录/数据处理由于毛细管内径的限制,检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是C
毛细管电泳的分离模式介绍
毛细管区带电泳(Capillary Zone Electrophoresis, CZE)最常见的模式,用以分析带电溶质。样品中各个组分因为迁移率不同而分成不同的区带。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁做化学修饰。毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis,CGE