蛋白质柱纯化过程中用的主要仪器有哪些
柱纯化是蛋白纯化最高效的方法.首先我们需要一个带有特定标签的柱子,也可能是阴离子柱,阳离子柱或者层析柱.然后要一台纯化仪,我们实验室的是bio-red,其实最好的纯化仪是AKTA的,很耐折腾,bio-red的太敏感,大量纯化是容易出问题.其他的仪器就是纯化后工作,比如纯化好的蛋白保存,可能会用到冷冻干燥.对了,还有一个,就是SDS-PAGE蛋白电泳仪,用来检测蛋白是否表达,是否完全破碎,纯化后是否有杂蛋白等等.其他的就没有了.......阅读全文
蛋白质纯化都需要哪些设备
做好一项实验,好的实验设备是少不了的,尤其是现如今大部分实验室经费都还充足的情况下,以下是蛋白质纯化常用到的实验设备,仅供参考。(1)、超声波细胞破碎机适用于5-100g湿菌体超声破碎,实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。(2)、高压匀浆机大规模生产用
蛋白质纯化都需要哪些设备
做好一项实验,好的实验设备是少不了的,尤其是现如今大部分实验室经费都还充足的情况下,以下是蛋白质纯化常用到的实验设备,仅供参考。(1)、超声波细胞破碎机适用于5-100g湿菌体超声破碎,实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。(2)、高压匀浆机大规模生产用
蛋白质纯化都需要哪些设备?
做好一项实验,好的实验设备是少不了的,尤其是现如今大部分实验室经费都还充足的情况下,以下是蛋白质纯化常用到的实验设备,仅供参考。 (1)、超声波细胞破碎机 适用于5-100g湿菌体超声破碎,实验室规模用。一般可选择直径10、15、20mm的超声探头。推荐国产机器为宁波新芝。 (2)
在实验室,蒸馏用的主要仪器有哪些
蒸馏用仪器主要有:1,烧瓶:大烧瓶用来呈蒸馏物,小烧瓶用来接收馏分;2,蒸馏头;3,直型冷凝管;4,接收管,如果分馏用燕尾管;5,温度计,也可以用温度计套管加普通温度计;另外,如果减压蒸馏,蒸馏头和接收管与常压蒸馏用的不同,还需要毛细管。
煤质化验仪器量热仪主要机型有哪些
煤质化验仪器量热仪主要机型有哪些 煤质化验仪器种类繁多,不是专业从事这份工作的对里面的产品都不太了解,下面宏科煤质化验仪器为大家讲一下煤质化验仪器量热仪主要机型有哪些以及各机型量热仪的功能特点和技术参数。煤质化验仪器量热仪主要机型有全自动量热仪,智能量热仪,微机量热仪,制冷型量热仪,全自动
煤质化验仪器量热仪主要机型有哪些?
煤质化验仪器种类繁多,不是专业从事这份工作的对里面的产品都不太了解,下面宏科煤质化验仪器为大家讲一下煤质化验仪器量热仪主要机型有哪些以及各机型量热仪的功能特点和技术参数。煤质化验仪器量热仪主要机型有全自动量热仪,智能量热仪,微机量热仪,制冷型量热仪,全自动双控量热仪。 一、全自动量热仪:采用单片机系
蛋白质纯化的主要方法及注意事项
蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术。 一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质,一些含量十分丰富,一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质,必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。一、主要方法1. 蛋白质的选择吸附分离(利用颗粒不同程度的颗粒吸附
色谱柱柱效降低的原因有哪些?
1.色谱柱断裂熔融石英色谱柱的聚酰亚胺涂层如有少许破裂它就会断裂。聚酰亚胺涂层可保护易碎的熔融石英管线。柱温箱持续的加热或冷却、柱温箱风扇的震动以及把色谱柱绕在圆形柱架上均会对管线造成压力。最后在薄弱处发生断裂。通过轻划或磨损聚酰亚胺涂层会造成出现薄弱处。通常锋利的尖或边划管线时会造成划痕。色谱柱挂
纯化柱的寿命
这是个非常常见的问题,很多老师习惯有个明确的使用时间,以便于实验室水系统的管理与维护。但是纯水纯化柱的寿命在普通的使用状态下是很难计算的,主要因为:①每个实验室的日常用水量差别大,这会导致纯化柱寿命有比较大的区别;②进水水质的优劣,直接影响了纯化柱的寿命。在确定填料性能和容量的条件下,水中污染的含量
离子交换层析法分离纯化蛋白质有哪些局限性
1,离子交换树脂固定床的床层压力会随着分离过程的进程而不断加大,需要重新填充。同时,也造成固定床填充过程操作麻烦,而且密封性要求高。2,蛋白质分离纯度问题,如果在出峰之后再行切换接收馏分,而在峰行下降后提前切换,虽可以保证纯度,但蛋白分离收率则会下降。3,由于交换层析介质决定,不同蛋白质相互分离效果
柱色谱有哪些类型
1、吸附柱色谱吸附色谱的原理:在一定条件下,硅胶与被分离物质之间产生作用,这种作用主要是物理和化学作用两种.物理作用来自于硅胶表表面与溶质分子之间的范德华力.化学作用主要是硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键作用。色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入吸附剂。吸
柱色谱有哪些类型
1、吸附柱色谱吸附色谱的原理:在一定条件下,硅胶与被分离物质之间产生作用,这种作用主要是物理和化学作用两种.物理作用来自于硅胶表表面与溶质分子之间的范德华力.化学作用主要是硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键作用。色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入吸附剂。吸
分馏柱优点有哪些?
应用这样反复多次的简单蒸馏,虽然可以得到接近纯组分的两种液体,但是这样做既浪费时间,且在重复多次蒸馏操作中的损失又很大,设备复杂,所以,通常是利用分馏柱进行多次气化和冷凝,这就是分馏。 在分馏柱内,当上升的蒸气与下降的冷凝液互凝相接触时,上升的蒸气部分冷凝放出热量使下降的冷凝液部分气化,两者之
柱色谱有哪些类型
1、吸附柱色谱吸附色谱的原理:在一定条件下,硅胶与被分离物质之间产生作用,这种作用主要是物理和化学作用两种.物理作用来自于硅胶表表面与溶质分子之间的范德华力.化学作用主要是硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键作用。色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入吸附剂。吸
离子色谱柱有哪些?
作者:孤独链接:https://www.zhihu.com/question/53193692/answer/133847053来源:知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权,非商业转载请注明出处。Polar MC 离子交换预装柱 Agarosix FF 离子交换预装柱强阴离子色谱柱HP-S
引物纯化方式有哪些,如何选择?
◆ 脱盐 寡核苷酸合成后,为了纯化寡核苷酸成为天然的DNA结构,首先必须去除保护基团。通过浓氨水处理,合成的寡核苷酸从固相载体上分离,2-氰乙氧基――磷酸二脂键的保护基团,以及碱基的保护基团基(苯甲酰基和异丁基)被去除,从而形成了天然的DNA结构。然而,必要的去保护步骤完成后,寡核苷酸混合
培养育苗主要仪器设备和物品有哪些?
(一)仪器设备光学显微镜bai(附有相du差、荧光和显微摄影装zhi置)、天平(感量1/10克的粗天平、感量1/100克的扭dao力天平、感量1/1000克的分析天平)、高压蒸气灭菌锅、恒温箱、恒温干燥箱、超净工作台(或无菌接种箱)、冰箱、离心机(4000转/分)、生物切片机、手持放大镜、恒温水浴锅
培养育苗主要仪器设备和物品有哪些?
(一)仪器设备光学显微镜(附有相差、荧光和显微摄影装置)、天平(感量1/10克的粗天平、感量1/100克的扭力天平、感量1/1000克的分析天平)、高压蒸气灭菌锅、恒温箱、恒温干燥箱、超净工作台(或无菌接种箱)、冰箱、离心机(4000转/分)、生物切片机、手持放大镜、恒温水浴锅、双目解剖镜、pH测定
安捷伦科技推出AssayMAP-Bravo平台和蛋白质纯化柱
安捷伦科技用于蛋白质纯化的 AssayMAP Bravo 平台及色谱柱为高通量样品制备提供自动化解决方案 2011 年 1 月 31 日,北京——安捷伦科技公司(纽约证交所:A)今日推出 ,这是专为高通量的蛋白质样品制备和纯化设计的全自动解决方案。 蛋白质纯化
色谱柱柱效降低的原因有哪些?(三)
3.氧损坏氧是许多毛细管GC 柱的大敌。在室温或近于室温的温度下,不会损坏色谱柱,但随柱温的升高色谱柱将被严重损坏。通常,对于极性固定相,在较低的温度和氧浓度条件下,就可发生严重损坏。长时间暴露在氧气中会出现氧损坏的问题。短时间暴露在氧中(如注射空气或快速取下隔垫螺母)不会有什么问题。
色谱柱柱效降低的原因有哪些?(五)
5.色谱柱被污染在毛细管GC 中色谱柱被污染是很普遍的问题。不幸的是它和各种常见的问题相似,因此常常被错误地判断为其他故障。通常,受污染的色谱柱虽然没有损坏,但却不能再使用。有两种基本的污染物:不挥发性污染物和半挥发性污染物。不挥发性污染物或残留物不会洗脱出来,而会积聚在色谱柱内。这样色谱柱即成为涂
色谱柱柱效降低的原因有哪些?(二)
2.热损坏超出色谱柱的温度上限会造成固定相和管表面的加速损坏。这样会造成色谱柱的过分流失,活性组分形成拖尾,以及/或降低柱效(分离度)。幸好热损坏是一个很慢的过程,因此,在色谱柱严重损坏之前还有一段很长的时间可在高于温度极限的条件下使用。当有氧存在时会大大加速热损坏。对有泄漏或载气中氧含量较高的色谱
色谱柱柱效降低的原因有哪些?(四)
4.化学损坏有相当少的化合物能损坏固定相。不挥发性化合物(高分子量或高沸点)进入色谱柱通常会降低色谱柱的性能,但不会损坏固定相。使用溶剂冲洗色谱柱通常可消除残留并恢复色谱柱的性能。要避免进入色谱柱的主要化合物是无机酸和碱。大多数这些酸和碱不易挥发,会积聚在色谱柱前端。如果不清除它们,将会损坏固定相。
提高柱效能的途径有哪些
提高液相色谱中柱效的有效途径有哪些?问题1.能否根据理论塔板数来判断分离的可能性?为什么?2.色谱定量分析中为什么要用校正因子?在什么情况下可以不用?3.什么叫梯度洗脱?它与气相色谱中程序升温有何异同?4.提高液相色谱中柱效的有效途径有哪些?5.应用原子吸收光谱法进行定量分析的依据是什么?进行定量分
柱色谱的操作步骤有哪些
柱色谱柱色谱法,又称层析法。是一种以分配平衡为机理的分配方法。色谱体系包含两个相,一个是固定相,一个是流动相。当两相相对运动时,反复多次地利用混合物中所含各组分分配平衡性质的差异,最后达到彼此分离的目的。色谱法从发明到现在已有八十多年的历史。它是纯化和分离有机或无机物的一种常用方法。其中固定相极性大
色谱柱的维护措施有哪些?
色谱柱基本上是每个实验室必备的一种实验室耗材,色谱柱的品牌规格很多,每一种色谱柱都应对于相对于的样品分析中。色谱柱的维护:1.尽量能够使用预柱或保护柱保护色谱柱;2.大多数色谱柱的PH范围是2—8,尽量不要超过范围使用;3.避免流动相的组成或比例急剧变化;4.流动相使用前必须进行过滤和脱气处理;5.
影响柱效的原因有哪些
柱效的影响因素对气相和液相稍微有点区别,这里以气相色谱为例:柱效可以用塔板高度来衡量,塔板高度越小,柱效则越高。见下图:图中横坐标为塔板高度,纵坐标为流速,所以有1. 影响柱效的最重要因素是流动相流速,对于GC来说,有一个最佳流速,当流速大于或小于最佳流速时,塔板高度都会增加。2. B/u项,称为分
蛋白质纯化技术的方法有哪几种
一、电泳:在克隆基因表达产物的检测分析过程中,电泳是常用的方法,但在纯化蛋白时,通常都不采用电泳的方法。由于某些特殊的目的,需要用聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化蛋白质,常用下述方法进行:①从电泳后的凝胶上切下所需的相应条带,将凝胶压碎,用缓冲液浸泡,使其中的蛋白质扩散出来,从而获得纯化的蛋白质。此法简单但回
色谱柱直径对柱效影响有哪些
色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。 柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到最佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。 色谱柱直径对柱效影响有哪些呢? 色谱柱尺寸填料床的长度和内径,增加色谱柱长度,可以在一定程度
Northern的杂交有哪些过程
Northern杂交的总体过程与Southern杂交相似,只不过在印迹(Blotting)过程中转移的是RNA而不是DNA,这种将RNA样品从凝胶转移滤膜的方法,其设计者为之起了一个与Southern:blotting对应的名称Northern:blotting。其分子杂交过程与Southern分子