高效液相色谱仪原理及操作步骤

1. 高效液相色谱仪原理高效液相色谱仪原理 高效液相色谱仪的使用和原理分析高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,因此特别适合高沸点、难气化挥发、热稳定性差的有机化合物和生命物质。HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部位。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、与柱或保护住、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。目前常见的HPLC仪生产厂家国外有Waters 公司、Agilent 公司(原HP公司)、岛津公司等,国内有上海伍丰科学仪器有限公司,上海禾工科学仪器有限公司,大连依利特公司、北京......阅读全文

热解吸仪原理及操作步骤

       热解吸仪广泛应用于大气污染、建筑工程室内空气污染、高纯气体、石油化工、食品等分析测试领域,是利用隋性气体流提取固体和液体介质中的挥发物,并通过加热的方法转移到分析系统,如气相色谱仪或色/质连用仪,将介质中的挥发物组分分析出来的装置,其主要操作步骤为:吸附-脱附-气相色谱分析。     

双向电泳原理及操作步骤

实验概要本文介绍了双向电泳原理及操作步骤(第一向等电聚焦和第二向SDS-PAGE电泳)。实验原理二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。通

固相萃取原理及操作步骤

  固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的1)疏水作用力:如C18、C8、Silica、苯基柱等2)离子交换作用:SAX,SCX,COOH、NH2等3)物理吸附:Florsil、Alumina等  pH值对固相萃取的影响  pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于

高效液相色谱仪的使用步骤

高效液相色谱仪也叫高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱等,它是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。1

高效液相色谱仪操作流程

高效液相色谱仪操作流程为开机、超声、排气、走基线。1、开机前先将流动相过滤和超声:水流动相用混合滤膜(0.2μm)过滤,有机流动相用有机滤膜过滤,之后超声脱气15-20分钟。(过滤的目的是除去流动相里的杂质,以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱;超声的目的是排除流动相里面的气体,以防气体进入色谱柱损害色谱柱

高效液相色谱仪操作流程

高效液相色谱仪操作流程为开机、超声、排气、走基线。1、开机前先将流动相过滤和超声:水流动相用混合滤膜(0.2μm)过滤,有机流动相用有机滤膜过滤,之后超声脱气15-20分钟。(过滤的目的是除去流动相里的杂质,以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱;超声的目的是排除流动相里面的气体,以防气体进入色谱柱损害色谱柱

高效液相色谱仪操作流程

高效液相色谱仪操作流程如下:工具/原料:电脑、安装调试完的液相色谱系统。1、首先把连接液相系统的电脑打开,接着长按泵系统上面的开关5秒左右。2、接着长按柱温箱系统上的开关5秒左右。3、然后长按检测器系统上的开关5秒左右。4、在自动进样器中放入待测样品,系统可以完成自动进样。5、自动完成分析过程,最后

液相色谱仪常用操作步骤

1)首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直至色谱柱中有

液相色谱仪的操作步骤

应该先对其对流动相进行过滤,依据情况来选择不同的滤膜,一般是有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um;对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟;在正常的情况下,仪器应该先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相,要是流动相是缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直至色谱柱

热解吸仪的原理及操作步骤

     热解吸仪广泛应用于大气污染、建筑工程室内空气污染、高纯气体、石油化工、食品等分析测试领域,是利用隋性气体流提取固体和液体介质中的挥发物,并通过加热的方法转移到分析系统,如气相色谱仪或色/质连用仪,将介质中的挥发物组分分析出来的装置,其主要操作步骤为:吸附-脱附-气相色谱分析。    利用物

固相萃取仪原理及操作步骤

固相萃取是一种样品预处理仪器,运用液-固相色谱理论,采用选择性吸附、洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化处理,使样品更加纯净,从而降低样品中杂质对检测的干扰,大大提高检测的准确性。固相萃取工作原理是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用的方法是使液体样品溶液通过吸附剂,保留其中被测物

糖度计的设计原理及操作步骤

  设计原理  光线从一种介质进入另一种介质时会产生折射现象,且入射角正弦之比恒为定值,此比值称为折光率。果蔬汁液中可溶性固形物含量与折光率在一定条件下(同一温度、压力)成正比例,故测定果蔬汁液的折光率,可求出果蔬汁液的浓度(含糖量的多少)。常用仪器是手持式折光仪,也称糖镜、手持式糖度计,通过测定果

冷冻干燥的原理及操作步骤

冷冻干燥是指通过升华从冻结的生物产品中去除水分或其他溶剂的过程。升华指的是溶剂,比如水,象干冰一样,不经过液态,从固态直接变为气态的过程。冷冻干燥得到的产物称作冻干物(lyophilizer),该过程称作冻干(lyophilization)。 为什么要选择冷冻干燥?  传统的干燥会引起材料皱缩,破坏

western-blotting的原理、操作步骤及意义

一。免疫印迹法    免疫印迹法(immunoblotting test,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因与Southen早先建立的检测核酸的印迹方法Southen blot相类似,亦被称为Wester

western-blotting的原理、操作步骤及意义

一。免疫印迹法    免疫印迹法(immunoblotting test,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因与Southen早先建立的检测核酸的印迹方法Southen blot相类似,亦被称为Wester

拟南芥细胞培养原理及操作步骤

实验概要了解植物细胞悬浮培养的基本原理,通过实验掌握植物细胞悬浮培养的方法和技术。并通过实验练习和巩固无菌操作技术。实验原理植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养,在培养过程中能够保持良好的分散状态。植物离体培养可产生愈伤组织。将疏松型的愈伤组织县浮在液体培养基中并

质粒抽提的原理及操作步骤

质粒抽提方法即去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒。今天我们主要来了解一下质粒抽提原理和操作步骤。 ⒈质粒抽提原理 其中用到三种溶液以及硅酸纤维膜(超滤柱)。 溶液Ⅰ:50 mM葡萄糖 / 25 mMTris-HCl/ 10 mMEDTA,pH 8

噪音计操作步骤及操作步骤

  噪音计-操作步骤  1、打开噪音计携带箱,取出噪音计,套上传感器。  2、将噪音计置于A状态,检测电池,然后校准噪音计。  3、对照常见的环境声级大小表,调节仪器的测量量程。  4、测量:可以用快(测量声压级变化较大的环境的瞬时值)、慢(测量声压级变化不大的环境中的平均值)、脉冲(测量脉冲声源)

高效液相色谱仪恒压泵工作原理及特点

  高效液相色谱仪恒压泵是输出恒定压力的输液泵,又称气动放大泵。在高效液相色谱仪发展初期,恒压泵使用较多,随着恒流泵的广泛使用,恒压泵现已基本不使用。但在填充柱高效液相色谱仪使用匀浆装柱时,都配备恒压泵,以快速建立所需的高压输出。一、工作原理:        恒压泵是利用气体压力驱动流动相和调节流动

高效液相色谱仪恒压泵工作原理及特点

高效液相色谱仪恒压泵是输出恒定压力的输液泵,又称气动放大泵。在高效液相色谱仪发展初期,恒压泵使用较多,随着恒流泵的广泛使用,恒压泵现已基本不使用。但在填充柱高效液相色谱仪使用匀浆装柱时,都配备恒压泵,以快速建立所需的高压输出。 一、工作原理:        恒压泵是利用气体压力驱动流动相和调节流动相

高效液相色谱仪恒压泵工作原理及特点

高效液相色谱仪恒压泵是输出恒定压力的输液泵,又称气动放大泵。在高效液相色谱仪发展初期,恒压泵使用较多,随着恒流泵的广泛使用,恒压泵现已基本不使用。但在填充柱高效液相色谱仪使用匀浆装柱时,都配备恒压泵,以快速建立所需的高压输出。一、工作原理:恒压泵是利用气体压力驱动流动相和调节流动相的压力,通常采用压

高效液相色谱仪操作三要点

高效液相色谱仪(HPLC)现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样,在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样,你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据,首先你要保养好它,使它处于一个良好的待机状态,这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获

高效液相色谱仪操作三要点

  高效液相色谱仪(HPLC)现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样,在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样,你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据,首先你要保养好它,使它处于一个良好的待机状态,这样你操作它进行分析时就可以比较顺利

高效液相色谱仪-操作规程

高效液相色谱仪14.1 开机前1) 510泵开关置0FF,流速置0.0,压力表指针位零处。2) U6K AB阀置 INJECT C阀置左侧。3) 486,745机开关置0FF。14.2 开机接通室内稳压器电源,待电压指针到220V后,接通本机电源总开关。1) 510泵① 抽液约80ml② 开关置0N

高效液相色谱仪的基本操作

一、实验准备阶段需要配置好实用所需的流动相,要注意所使用的流动相不能对实验或设备造成影响或损害(比如堵塞或腐蚀)。准备好流动相之后,需要对仪器及色谱柱进行冲洗和平衡,确保仪器压力正常,基线稳定。样品填写需要经过必要的净化处理,过0.45um以下微孔滤膜确保样品是澄清溶液,并装入合适的液相色谱样品瓶待

高效液相色谱仪操作规程

操作过程:启动前,应按待用样品的方法要求配制流动相,标准样品和所用样品流动相0.22μm膜过滤后超声脱气30min在A、B两阶段,A管路与蓝色盖瓶的水相连接,B管路与蓝色盖瓶的有机相连接。确保每天使用超声波和超滤水及有机相。使用后,所有样品均为过膜(0.22或0.45μm膜)。开机步骤:依次打开电脑

高效液相色谱仪的原理

  高效液相色谱仪的原理:   分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中,K有不同的概念:吸附色谱法为吸附系数,离子交换色谱法为选择性系数(或称交换系数),凝胶色谱法为渗透参数。但一般情况可用分配系数来表示。   在条件(流动相、固定相、温度和压

高效液相色谱仪的原理

储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被

高效液相色谱仪的原理

  高效液相色谱仪的原理:   分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中,K有不同的概念:吸附色谱法为吸附系数,离子交换色谱法为选择性系数(或称交换系数),凝胶色谱法为渗透参数。但一般情况可用分配系数来表示。   在条件(流动相、固定相、温度和压

高效液相色谱仪工作原理

高效液相色谱仪原理:   在条件(流动相、固定相、温度和压力等)一定,样品浓度很低时(Cs、Cm很小)时,K只取决于组分的性质,而与浓度无关。这只是理想状态下的色谱条件,在这种条件下,得到的色谱峰为正常峰;在许多情况下,随着浓度的增大,K减小,这时色谱峰为拖尾峰;而有时随着溶质浓度增大,K也增大,这