高效液相色谱仪原理及操作步骤

1. 高效液相色谱仪原理高效液相色谱仪原理 高效液相色谱仪的使用和原理分析高效液相色谱法(HPLC)是目前应用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。在已知的有机化合物中,约有80%能用高效液相色谱法分离、分析,而且由于此法条件温和,不破坏样品,因此特别适合高沸点、难气化挥发、热稳定性差的有机化合物和生命物质。HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部位。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、与柱或保护住、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置。目前常见的HPLC仪生产厂家国外有Waters 公司、Agilent 公司(原HP公司)、岛津公司等,国内有上海伍丰科学仪器有限公司,上海禾工科学仪器有限公司,大连依利特公司、北京......阅读全文

高效液相色谱仪的原理

  高效液相色谱仪的原理:   分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中,K有不同的概念:吸附色谱法为吸附系数,离子交换色谱法为选择性系数(或称交换系数),凝胶色谱法为渗透参数。但一般情况可用分配系数来表示。   在条件(流动相、固定相、温度和压

关于液相色谱仪的操作步骤

  操作步骤:   1). 先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。   2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。   3). 正常情况下,仪器先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要

彩色免疫金银染色的原理及操作步骤

实验概要本文介绍了彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS,CIGSS)的原理及操作步骤。实验原理彩色免疫金银染色方法(coloured   IGSS,CIGSS)基本原理是在IGSS法的基础上,根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的,即IGSS后,在抗原位点处生成的银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的

可调容量移液器规范操作步骤及工作原理

一、可调容量移液器的工作原理移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。 在活塞推动下,排出部分空气, 利用大气压吸入液体, 再由活塞推动空气排出液体。 使用移液器时,配合弹簧的伸缩性特点来操作,可以很好地控制移液的速度和力度。二、移液器的操作使用1.可调容量移液器规范操作步骤*步 设

叶绿素a,b含量测定的原理及操作步骤

实验概要本实验介绍了叶绿素a,b(Chlorophyll a,b)含量测定的原理及操作步骤。实验原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=

彩色免疫金银染色的原理及操作步骤

实验概要本文介绍了彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS,CIGSS)的原理及操作步骤。实验原理彩色免疫金银染色方法(coloured   IGSS,CIGSS)基本原理是在IGSS法的基础上,根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的,即IGSS后,在抗原位点处生成的银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的

细胞计数及活力测定原理和操作步骤

一、原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞 ,总细胞 中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞 一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损

流式细胞仪原理及操作步骤

  流式细胞仪原理及操作步骤:  流式细胞仪是集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯

流式细胞仪原理及操作步骤

流式细胞仪原理及操作步骤:流式细胞仪是集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群

牛酮病的检验原理及操作步骤

1.尿的物理性质检查盛被检尿于容器中,用手扇气嗅闻。牛患酮血病时,尿呈丙酸酮的臭味。2.尿的酸碱度(pH)检查(1) pH试纸法取pH试纸一小片,将一端浸入被检尿中,浸湿后取出,与标准色板进行比色,与此相同的颜色,就是该尿的pH。(2)石蕊试纸法 用清洁的镊子夹一小片红或蓝色石蕊试纸,浸入被检尿中,

紫外全波长扫描的操作步骤及原理

波长扫描的原理就是在一个波长范围内,对样品进行测量,反映的是样品在不同波长下的吸光度值。操作时需设定测量方式,即测定的是T还是A,然后是测量范围,样品的测定范围,然后是扫描波长,设定样品需要扫描的波长范围是从哪儿到哪儿。其次有扫描间隔,扫描间隔指的是仪器每隔多少纳米对样品进行测量,比如1nm为扫描间

流式细胞仪原理及操作步骤

流式细胞仪是集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细胞。活细胞免疫荧光

紫外全波长扫描的操作步骤及原理

波长扫描的原理就是在一个波长范围内,对样品进行测量,反映的是样品在不同波长下的吸光度值。操作时需设定测量方式,即测定的是T还是A,然后是测量范围,样品的测定范围,然后是扫描波长,设定样品需要扫描的波长范围是从哪儿到哪儿。其次有扫描间隔,扫描间隔指的是仪器每隔多少纳米对样品进行测量,比如1nm为扫描间

奶牛隐性乳房炎检测原理及操作步骤

    1.过氧化氢(H2O2)玻片法(过氧化氢酶试验法)    大多数活细胞包括白细胞都含有过氧化氢酶,能分解过氧化氢而产生氧。但正常乳中的白细胞少,过氧化氢酶很少;乳房炎时,白细胞增多,故过氧化氢酶也增多,放出的氧也多。    (1)试剂。取双氧水(30% H2O2),按1:(2.33~4)的比

高效液相色谱仪螺旋注射泵工作原理及特点

一、工作原理:           螺旋注射泵是利用步进电动机经齿轮螺杆传动,带动活塞以缓慢恒定的速度移动,使流动相在高压下以恒定流量输出。当活塞到达每个输出冲程末端时,暂时停止输 出流动相,然后以极快速度进入吸入冲程,再次将流动相由单向阀封闭的载液入口吸入螺旋注射泵中,再重新

高效液相色谱仪螺旋注射泵工作原理及特点

高效液相色谱仪螺旋注射泵属于恒流泵,目前在高效液相色谱仪中使用较少,在超临界流体色谱仪中使用较多。一、工作原理:螺旋注射泵是利用步进电动机经齿轮螺杆传动,带动活塞以缓慢恒定的速度移动,使流动相在高压下以恒定流量输出。当活塞到达每个输出冲程末端时,暂时停止输出流动相,然后以极快速度进入吸入冲程,再次将

高效液相色谱仪的操作注意要点

1). 首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直

高效液相色谱仪的操作注意要点

1). 首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直

高效液相色谱仪的工作原理

液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成

高效液相色谱仪的分离原理

储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被

高效液相色谱仪的原理简述

  储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓

高效液相色谱仪的工作原理

高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出

高效液相色谱仪的工作原理

高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出

高效液相色谱仪仪器工作原理

高效液相色谱仪仪器工作原理高效液相色谱仪是实现液相色谱分析的仪器设备,半个世纪以来,随着科学技术的发展,HPLC仪器也经历了几次重大改进,至今已成为性能齐全,提供数据可靠,在分离科学领域中占据重要地位的分析仪器。高效液相色谱仪的基本单元组成,高效液相色谱系统至少应包括高压输液系统、进样器、色谱柱、检

高效液相色谱仪的工作原理

高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出

高效液相色谱仪的工作原理

高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出

高效液相色谱仪的原理特点

  高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱,也可以拓展为制备系统,采用高压混合器连接两个高压恒流泵,利用RS232通讯,即可实现梯度分析;    便于用户自由选择与搭配,混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成,用途广泛;    可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等

高效液相色谱仪的分离原理

使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外

高效液相色谱仪的工作原理

液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成