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超分辨荧光显微成像技术的基本原理

这个问题的答案比较简单:因为组成视网膜的每一个感光细胞(视杆细胞和视锥细胞)、相机芯片上的每一个感光元件(CCD、CMOS等)都是有大小的。比如视网膜中央凹区域的视锥细胞直径平均约为 5 微米。而由于奈奎斯特-香农采样定理的限制,视网膜上能分清的两个相邻像点的距离是视锥细胞直径的两倍,即 10 微米。再结合眼球的构造,大致可以推断出,在距离眼睛 25 厘米的位置,我们能分辨物体上相距为 80 微米的两个点,换算成点阵密度就是大约 320 ppi,这也是苹果所谓“视网膜屏”分辨率的来历。如果要观察小于 80 微米的物体,比如细菌,就需要先将物体放大,再用眼睛或者相机观察。现代光学显微镜的构造其实非常简单,样品放置在物镜的焦点处,从样品上发射或散射的光经过物镜变成平行(准直)光,再经过一个结像透镜,然后会聚到相机的感光芯片上成像。按照前面的方法来推算,要区分物体上相距为 200 纳米的两个点,如果使用科研级相机,比如最近火起来的 s......阅读全文

一鸣惊人贝齐格: 超分辨荧光显微的诺奖旅程

  1994年的秋天,埃里克·贝齐格深深地思考了自己的科研追求。他有一个很美妙的想法,能够打破当时的局限,在微小尺度下捕捉图像。不过为了抚养新出生的孩子,他放弃了贝尔试验优越的研究职位,从而也失去了推进自己研究的有利资源。  “我决定公布出我的想法,把它丢进科研圈里。” 贝齐格表示,“我觉得自己很可

稳态荧光测量和时间分辨荧光的区别

时间分辨荧光技术有基于时域和基于频域两种测量方法。由于时间分辨结果数据包含有比稳态荧光数据更多的信息,近年来,时间分辨荧光技术已成为生物化学与生物物理领域的主要研究工具之一。荧光寿命成像技术可以同时获得分子状态以及空间分布的信息,在生物学和医学领域也得到了越来越广泛的应用。以下将从原理、仪器及应用等

时间分辨荧光免疫分析应用

  1.激素:甲状腺激素、甾体类激素。  2.病毒性肝炎标志物。  3.肿瘤相关抗原、胃蛋白酶原(PG)医学教|育网搜集整理。  4.药物。  5.多肽类。

时间分辨荧光免疫分析简述

  时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

超细内窥镜动态超分辨成像方面研究新进展

  浙江大学及之江实验室联合团队的杨青教授、刘旭教授在光场经复杂动态介质中的快速恢复及超分辨成像方面取得进展。研究结果以“单根多模光纤用于体内光场编码内窥镜成像(Single multimode fibre for in vivo light-field-encoded endoscopic ima

用普通共聚焦显微镜实现超分辨率单分子荧光成像

传统的细胞及其内部分子显微观察通常使用荧光染料,然后再用不同分辨率的显微术照亮单个分子和与其互动的其他物质。如下图所示,普通共聚焦显微镜和超分辨率显微镜的精准度差异一目了然。(普通共聚焦显微镜观察图,比例尺10μm。图片来自发表文章DOI: 10.1038/s41467-017-00688-0)(随

高速图像重建助力实时超分辨成像

    JSFR-SIM算法和传统Wiener-SIM算法的重建流程对比示意图。    JSFR-SIM可实时显示微管和线粒体动态。    高速实时超分辨结构光照明显微成像光路(a)和快速实时超分辨结构光照明显微成像系统样机(b)。图片来源:论文作者    超分辨荧光显微成像技术打破

高端超分辨光学显微镜研制

  12月26日,由中国科学院苏州生物医学工程技术研究所(简称“苏州医工所”)承担的国家重大科研装备研制项目“超分辨显微光学核心部件及系统研制”通过验收,标志着我国具备了高端超分辨光学显微镜的研制能力。   在当今生物学和基础医学研究中,高/超分辨光学显微镜发挥着至关重要的作用,10-100nm尺

时间分辨荧光计的主要组成

时间分辨荧光计由三大部分组成:光源:脉冲光源:氙灯(每秒闪烁1000次);小型N2激光器;输出脉冲波长:337nm荧光信号获取系统;数据处理系统医学教|育网搜集整理。

为何选用时间分辨荧光检测?

我们知道,以常用荧光素作为标记物的荧光免疫测定往往受本底荧光的干扰影响,例如包括样本载体、血清成分、仪器激发光源的杂射光的干扰,使得灵敏度受到很大限制。时间分辨荧光免疫测定(timeresolvedfluorescenceimmunoassay,TR-FIA)是针对这缺点加以改进的一种新型检测技术。

时间分辨荧光免疫分析信号原理

  普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性。镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射

时间分辨荧光免疫分析分析原理

  在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光,因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的,因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合,就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。  时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础

时间分辨荧光免疫测定原理

时间分辨荧光免疫(TR-FIA)测定基本原理是以镧系元素如铕(Eu)螯合物作为荧光标记物,利用这类荧光物质有荧光寿命长的特点,延长荧光测量时间,待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再行测定,所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光,从而可以有效地消除非特异性本底荧光的干扰,可以用于定量测定。

时间分辨荧光免疫分析原理(图)

荧光法是一种非常有用的工具,各种各样的分析领域都在利用它。由于它具有高灵敏度、好的选择性以及可提供多参数信息(如,荧光强度、荧光寿命、荧光各向异性)等特点,所以被广泛用于生物制药研究、临床诊断、宇宙空间环境监测、免疫分析中分子间作用原理研究、DNA序列分析、荧光原位杂交以及细胞成分分析等。镧系系复合

时间分辨荧光免疫分析增强原理

  解离增强镧系元素荧光免疫分析(DELFIA)是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂,使其一端与铕(Eu)连接,另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接,形成EU标记的抗体/抗原,经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱,因此加入一种增强剂,使Eu

时间分辨荧光分析法(TRFIA)

时间分辨荧光分析法(Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA)是近十年发展起来的一测微量分析方法,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19,较放射免疫分析(RIA)高出3个数量级。  时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发

时间分辨荧光分析法(TRFIA)

 时间分辨荧光分析法(Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA)是近十年发展起来的一测微量分析方法,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19,较放射免疫分析(RIA)高出3个数量级。  时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上

时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)

一、前言近百年来,“特效试剂”一直是分析化学家追求的目标。所谓“特效试剂”,就是指的是只与一种待测物质反应的试剂。事实上,目前使用的所谓的“铜试剂”、“铁试剂”、“硝酸试剂”等等,都是“盛名之下,其实难副”的。20世纪40-50年代追求合成特效试剂的狂热,早已降温。正在分析化学家心灰意冷之际,人们从

LSM​超分辨率和灵敏度。

超分辨率和灵敏度。       利用并行光谱采集和高速GPU去卷积的独特组合,提高图像质量。 Airyscan在横向120nm和轴向350nm的尺度上提供了高灵敏度的完美光学截面和超分辨率。这超越了去卷积方法,保留了在封闭针孔中通常被屏蔽了的宝贵的发射光信号,并实现了更高的分辨率

镜面增强技术(MEANS)提升超分辨显微效果

【2016中国光学重要成果推荐】北京大学席鹏课题组开发了一种镜面增强的超分辨显微技术,该技术能够将传统的共聚焦系统转变为轴向超分辨系统。同时,这一技术能够大幅提升STED超分辨的分辨率。利用这一技术,研究者首次揭示了细胞核孔和病毒丝的超分辨精细结构。镜子或许是人类最早发明的光学器件。迄今为止,它仍然

荧光光谱仪的偏振荧光分析和时间分辨荧光分析

  1、偏振荧光分析。荧光体的荧光偏振与荧光各向异性值的测定,能够提供与荧光体在激发态寿命期间动力学相关的信息,因此荧光偏振技术被广泛应用于研究分子间的作用,例如蛋白质与核酸、抗原与抗体、蛋白质与多肽的结合作用等。  2、时间分辨荧光分析。由于不同分子的荧光寿命不同,可在激发与检测之间延缓一段时间,

我国学者在超细内窥镜动态超分辨成像方面取得进展

  在国家自然科学基金项目(批准号:T2293751、T2293750)资助下,浙江大学及之江实验室联合团队的杨青教授、刘旭教授在光场经复杂动态介质中的快速恢复及超分辨成像方面取得进展。研究结果以“单根多模光纤用于体内光场编码内窥镜成像(Single multimode fibre for in v

时间分辨荧光免疫分析仪定义

  时间分辨荧光免疫分析仪是一种采用非放射性同位素免疫分析技术的体外微量分析仪器。根据荧光标记物的荧光光谱的特点,通过延缓测量时间,排除标本中非特异性荧光的干扰,达到准确定量分析的目的

时间分辨荧光免疫分析技术的原理

在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光,因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的,因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合,就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发展起

什么是时间分辨荧光免疫测定?

时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

什么是时间分辨免疫荧光技术

  什么是时间分辨免时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。疫荧光技术

时间分辨荧光免疫测定的意义

时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

时间分辨荧光免疫分析的增强原理

解离增强镧系元素荧光免疫分析(DELFIA)是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂,使其一端与铕(Eu)连接,另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接,形成EU标记的抗体/抗原,经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱,因此加入一种增强剂,使Eu从复

时间分辨荧光光谱仪简介

  时间分辨荧光光谱仪是一种用于材料科学、信息科学与系统科学、电子与通信技术、航空、航天科学技术领域的物理性能测试仪器,于2015年4月11日启用。  主要功能  固定发射光波长,改变激发光波长,记录荧光强度随激发波长变化。发射光谱:固定激发光波长,记录不同发射波长处荧光强度随发射波长变化。通过对有

荧光光谱实验技术——时间分辨技术

时间分辨发光光谱技术是基于不同发光体的发光衰减速率的不同,配置使用带时间延迟设备的脉冲光源(闪光灯或激光器)和带有门控时间电路的检测器件,通过选定延迟时间td和门控时间tg,对发射单色器进行扫描,得到时间分辨发射光谱,从而实现对光谱重叠但是发光寿命不同的组分进行分辨和分别测定。或者固定激发与发射波长