新方法可批量生产高质量DNA分子

据物理学家组织网6月3日(北京时间)报道,瑞典卡罗林斯卡研究所和美国哈佛大学合作开发出一种用于制造短的单链DNA分子的新方法,可以解决许多目前生产中的问题。新方法对DNA纳米技术以及开发由DNA片段组成的药物都很有价值。相关论文发表在最近的科学期刊《自然·方法学》上。 短的单链DNA分子也叫寡核苷酸,这种DNA片段是研究人员的基本工具,在许多科学领域发挥着重要作用。当前的基因和分子生物研究开发领域取得的诸多进步,如生物基因组快速扫描技术,必须依靠寡核苷酸。 新方法也是一种用途广泛的新型制造技术,能解决目前DNA片段生产过程中的限制问题。生产过程是生物生产,通过所用的细菌来复制DNA序列,让人们能以低成本大量地制造DNA副本。“我们已经通过酶催化的生产方法造出了一种系统,不仅能提高寡核苷酸制造的质量,而且利用细菌廉价地生产大量 DNA复制品,也使扩大生产规模成为可能。”合作开发人员、卡罗林斯卡研究所神......阅读全文

DNA复制链的延伸

  DNA新生链的合成由DNA聚合酶Ⅲ所催化,然而,DNA必须由螺旋酶在复制叉处边移动边解开双链。这样就产生了一种拓扑学上的问题:由于DNA的解链,在DNA双链区势必产生正超螺旋,在环状DNA中更为明显,当达到一定程度后就会造成复制叉难再继续前进,从而终止DNA复制。但是,在细胞内DNA复制不会因出

研究揭示Agos蛋白指导导向DNA链切割靶标DNA链的机制

  2018年12月27日,《美国国家科学院院刊》(PNAS)杂志在线发表题为Two symmetric arginine residues play distinct roles in Thermus thermophilus Argonaute DNA guide strand-mediated

抗单链DNA(ssDNA)抗体检测的参考值及临床意义

  参考值  正常人:阴性,酶标法  临床意义  抗ssDNA的测定结果缺乏疾病特异性,除SLE患者有较高检出率(50%~60%)外,其他风湿病如混合性结缔组织病(mixel connective tissue disease,MCTD)、药物诱导的狼疮、硬皮病、皮肌炎、干燥综合征,类风湿性关节炎等

我国学者揭示Agos蛋白指导导向DNA链切割靶标DNA链机制

  近日,《Proceedings of the National Academy of the Sciences of the United States of America,PNAS》杂志在线发表题为“Two symmetric arginine residues play distinct

单链RNA的基本信息

中文名称单链RNA英文名称single-stranded RNA;ssRNA定  义只含有一条链的RNA分子。生物体中绝大部分RNA是单链RNA,形成二级结构时,是既有单链、又有双链结构域的RNA分子;只有某些RNA病毒是由两条链互补而成的双链RNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与

半制备规模单链RNA纯化

引言寡核苷酸合成是非常高效和高产率的过程。在固相载体上进行寡核苷酸反应的典型产率为每耦合阶98~99.5%。在典型的多阶寡核苷酸合成中,杂质聚集在一起,即使是一般大小的21基体寡核苷酸的总产率也达到67~90%,较长链的寡核苷酸的产率相应较低。研究人员通常需要使用纯度高于初步合成混合物的材料。因此,

单链丝状噬菌体展示系统

一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒,pIII是病毒的次要外完蛋白(minor coatprotein)、位于病毒颗粒的一端,每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白,pIII有两个位点可供外源序列插入,即N端和近N端可伸屈胃内。当抗体片段或蛋

单链构象多态性简介

  单链构象多态性,在一定条件下, 单链DNA可形成特有的二级结构。不同 DNA链上单个碱基的改变可引起其二级结 构的改变,从而改变DNA链在非变性胶中 的电泳迁移率形成的多态性称作单链构象多 态性。单链DNA片段呈复杂的空间折叠构 象。这种立体结构主要是由其内部碱基配对 等分子内相互作用力来维持的

半制备规模单链RNA纯化

  寡核苷酸合成是非常高效和高产率的过程。在固相载体上进行寡核苷酸反应的典型产率为每耦合阶98~99.5%。在典型的多阶寡核苷酸合成中,杂质聚集在一起,即使是一般大小的21基体寡核苷酸的总产率也达到67~90%,较长链的寡核苷酸的产率相应较低。研究人员通常需要使用纯度高于初步合成混合物的材料。因此,

单链突出端的定义

中文名称单链突出端英文名称overhang定  义双链核酸末端带有一个或多个未配对核苷酸的单链部分。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

双链互补DNA的定义

中文名称双链互补DNA英文名称double-strand cDNA;dscDNA定  义以双链互补DNA为模板合成的双链DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

双链DNA的结构特点

中文名称双链DNA英文名称double-stranded DNA;dsDNA定  义由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

双链DNA的结构特点

中文名称双链DNA英文名称double-stranded DNA;dsDNA定  义由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

DNA双链末端的概念

中文名称平端英文名称blunt end定  义DNA双链末端平齐而无突出单链。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

双链DNA探针标记法

  分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。  双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。  1.切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连

细胞化学词汇双链DNA

中文名称:双链DNA英文名称:double-stranded DNA;dsDNA定  义:由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

DNA母链的复制方式

①时期:有丝分裂间期和减数第一次分裂的间期。②场所:主要在细胞核中。③条件:a、模板:亲代DNA的两条母链;b、原料:四种脱氧核苷酸为;c、能量:(ATP);d、一系列的酶。缺少其中任何一种,DNA复制都无法进行。④过程:a、解旋:首先DNA分子利用细胞提供的能量,在解旋酶的作用下,把两条扭成螺旋的

从M13噬菌体模板合成固定长度的单链DNA探针

实验材料 大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段限制性内切核酸酶模板 DNA寡核苷酸引物试剂、试剂盒 乙酸铵DTTEDTA乙醇NaCl酚氯仿TBE 电泳缓冲液Tris-ClKlenow 基础缓冲液dNTP 溶液仪器、耗材 变性聚丙烯酰胺凝胶或碱性琼脂糖凝胶黏性贴片或磷光黏性贴片Sephad

从M13噬菌体模板合成固定长度的单链DNA探针

实验材料大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段限制性内切核酸酶模板 DNA寡核苷酸引物试剂、试剂盒乙酸铵DTTEDTA乙醇NaCl酚氯仿TBE 电泳缓冲液Tris-ClKlenow 基础缓冲液dNTP 溶液仪器、耗材变性聚丙烯酰胺凝胶或碱性琼脂糖凝胶黏性贴片或磷光黏性贴片Sephadex

从M13噬菌体模板合成固定长度的单链DNA探针

            实验材料 大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段 限制性内切核酸酶 模板 DNA 寡核苷酸引物 试剂、试

抗双链DNA抗体(aniDNA)的简介

  抗DNA抗体包括抗双链DNA抗体、抗单链DNA抗体和抗zDNA抗体。 检验中一般是指与双链DNA和单链DNA都反应的抗双链DNA抗体。 抗双链DNA抗体阳性是系统性红斑狼疮的标志,阳性率达90%以上,有较高的特异性,因而抗双链DNA抗体对系统性红斑狼疮的诊断和治疗监控极重要。抗双链DNA抗体在其

S1核酸酶的基本信息

S1核酸酶是从米曲霉(aspergill suoryzae) 中提取的。S1核酸酶是一种特异性单链核苷酸内切酶。能降解单链DNA 和单链RNA,产生5'- 单链核苷酸或寡核苷酸。双链DNA、双链RNA 和DNA-RNA 杂交分子对S1核酸酶具有较大的抵抗力,只有高浓度的酶才可使其消化。它水解

S1核酸酶的功能和来源

S1核酸酶是从米曲霉(aspergill suoryzae) 中提取的。S1核酸酶是一种特异性单链核苷酸内切酶。能降解单链DNA 和单链RNA,产生5'- 单链核苷酸或寡核苷酸。双链DNA、双链RNA 和DNA-RNA 杂交分子对S1核酸酶具有较大的抵抗力,只有高浓度的酶才可使其消化。它水解

关于S1核酸酶的简介

  S1核酸酶是从米曲霉(aspergill suoryzae) 中提取的。S1核酸酶是一种特异性单链核苷酸内切酶。能降解单链DNA 和单链RNA,产生5' -单链核苷酸或寡核苷酸。双链DNA、双链RNA 和DNA-RNA 杂交分子对S1核酸酶具有较大的抵抗力,只有高浓度的酶才可使其消化。它

新方法可批量生产高质量DNA分子

  据物理学家组织网6月3日(北京时间)报道,瑞典卡罗林斯卡研究所和美国哈佛大学合作开发出一种用于制造短的单链DNA分子的新方法,可以解决许多目前生产中的问题。新方法对DNA纳米技术以及开发由DNA片段组成的药物都很有价值。相关论文发表在最近的科学期刊《自然·方法学》上。   短的单链D

单链构象多态性的应用

单链构象多态性可用于预筛选克隆文库。可对其中的某一个条带进行测序,并与数据库中已知序列比对。

单链构象多态性的原理

单链构象多态性(Single-strand conformation polymorphism,SSCP)分析可以检测DNA序列之间的不同。SSCP首先由Lee 等[9]用于研究自然微生物群体的多样性。在低温条件下,单链DNA呈现一种由内部分子相互作用形成的三维构象,它影响了DNA在非变性凝胶中的迁

单链构象多态性的原理

单链构象多态性(Single-strand conformation polymorphism,SSCP)分析可以检测DNA序列之间的不同。SSCP首先由Lee 等[9]用于研究自然微生物群体的多样性。在低温条件下,单链DNA呈现一种由内部分子相互作用形成的三维构象,它影响了DNA在非变性凝胶中的迁

半制备规模单链RNA纯化(二)

图2中所示被选中的馏份收集窗表示不同的质量负荷。峰值采集后,样品可以根据需要对等分和干燥,以便长期储存。TEAA的挥发性使离子对缓冲组分的去除非常容易。溶剂蒸发后被纯化的寡核苷酸实际上是不含盐的。 UPLC条件纯化RNA寡核苷酸的纯度通过ACQUITY UPLC系统来验证。如图3所示,我们的纯化方法

单链RNA的基本信息介绍

  一般来说生物学家是根据RNA能否直接起mRNA作用而分成正链ssRNA病毒与负链ssRNA病毒两种。 (1)正链RNA病毒(如脊髓灰质炎病毒)的ssRNA可直接起mRNA作用,转译早期蛋白质,包括RNA多聚酶和抑制宿主细胞合成代谢的调控蛋白。然后在RNA多聚酶的作用下,以ssRNA(正链)为模板