关于双向扩散法—试管法的基本信息介绍

双向扩散法又称琼脂扩散法,是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应,通过扩散作用使分处两处的抗原和相应抗体相遇,形成抗原—抗体复合物,比例合适时将出现沉淀现象。 先在试管中加入含有抗体的琼脂,凝固后在中间加一层普通琼脂,冷却后再将抗原溶液加到上层,放置后,下层的抗体和上层的抗原向中间琼脂层内自由扩散,在抗原抗体浓度比例恰当处形成沉淀线。此方法做起来麻烦,并且只能测定一个标本,所以临床检验中很少用。......阅读全文

双向凝胶电泳法在蛋白鉴定的应用

一旦通过差异分析或其它方法找到感兴趣的蛋白后.就可以从凝胶中或膜上切取这些目标蛋白质作鉴定。现在绝大多数蛋白质的鉴定是通过质谱分析来完成的。

简述纸片扩散法药敏试验的试验原理

  纸片扩散法药敏试验的试验原理:  纸片扩散药敏试验的原理:将含有定量的抗菌药物的纸片贴在接种有待测菌的固体培养基上,通过抗菌药物在培养基上的扩散,观察是否出现抑菌环,推断是否抑制细菌的生长。药物扩散的距离越远,药物浓度越低抑菌能力越强,因此可根据抑菌环的大小,判定药物对细菌的抑制作用强弱。

要正确评价和应用稀释法和扩散法细菌药敏试验

药敏试验结果,敏感(S)、中介度(I)、耐药(R)是临床医师治疗细菌性感染、合理选用药物、提高疗效和避免滥用抗菌药物的重要依据。美国临床标准化委员会(NCCLS)推荐两种药敏试验方法:稀释法(琼脂或肉汤稀释法)和纸片扩散法。扩散法S、I、R分界点值是根据稀释法测得的Log 2最小抑菌浓度(MIC

单向环状免疫扩散法出现误差的原因

出错原因:①抗原或标准液溢出加样孔;②加样量不足或过多,或混有气泡;③加样孔破损,使沉淀环呈不规则状;④扩散时湿盒不平,导致沉淀环不圆;⑤因抗体或抗原过量而致沉淀环过小或过大;⑥浇注琼脂时不在水平台面,使胶板厚薄不匀;⑦板浇注后保存时间长,引起板内水分蒸发或变形;⑧打孔后挑取琼脂时将胶板挑起,与玻璃

关于纸片扩散法药敏试验的试验步骤介绍

  1、纸片扩散法药敏试验— 待测菌株接种物制备  (1)通用情况:从过夜孵育的平板,优先选择哥伦比亚血琼脂平板上的菌落上挑取数个单个菌落,直接接种4.5%生理盐水制成菌悬液,使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到0.5麦氏单位,使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌(1-2)*1012CFU

两种简化定氮方法扩散法和通气法的介绍

  通过氮素定量分析,可以准确地指导作物施肥,鉴定土壤肥力,检查肥料质量。因此,氮素测定对于指导农业生产和实行科学种田,有着重要意义。  氮素定量的方法很多,但农业上常用的仍是凯氏蒸馏法。其原理是利用按盐在碱性条件下分解出游离氨的特性,通入蒸气将氨驱出,使氨被酸性液体吸收,然后通过中和滴定计算其氮素

琼脂扩散实验——单向琼脂扩散

实验材料待检血清试剂、试剂盒生理盐水琼脂粉仪器、耗材微量进样器打孔器玻璃板湿盒实验步骤1.  将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。2.  在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5厘米)打孔,见图1。图1  单向琼脂扩散试验抗原孔位置示

蛋白质的双向电泳实验_等电聚焦法

蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦( Isoelect rofocusing, IEF) , 根据蛋白质的等电点不同进行分离; 第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE ) , 按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后, 可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。本实验目的是

利用双向层析法对氨基酸进行分离与鉴定

实验概要本实验介绍了氨基酸分离与鉴定——双向层析法(two-dimensional chromatography)的原理及操作步骤等。实验原理纸层析是以滤纸作支持物,用一定的溶剂系统展开,使混合样品达到分离分析的层析方法。其一般操作是将样品溶解在适当溶剂中,点样在滤纸的一端;再选用适当的溶剂系统,从

为什么对流免疫电泳试验的敏感性要比双向扩散高810倍

对流免疫电泳是将双向是扩散试验与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术。抗原在阴极,抗体在阳极,通电后,受到电场的作用,抗原抗体会做一定的定向运动,两者相遇之后形成沉淀线,可在短时间内限制抗原抗体分子的自由扩散,因而提高了试验的敏感度。

双向电泳

实验概要本实验介绍了双向电泳技术,先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到二维分布的蛋白质图。实验原理双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上

双向电泳

蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.coli蛋白,并表明蛋白质谱不是稳定的,而是随环境而变化. 双向电泳原理简明,第一向进行等电聚焦,蛋白质沿pH梯度分离,至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行分子量

双向凝胶电泳法在凝胶中蛋白的检测的应用

凝胶染色的目的是使其中的蛋白质能够被观察到。目前还没有通用的染色方法,只能在考虑多种因素如需要的灵敏度、线性范围、方便程度、费用、以及成像设备类型等基础上,结合实际进行选择。有时也可以将蛋白转膜后通过免疫印迹的方法来进行检测。

双向凝胶电泳法在图像采集和分析中的应用

成像设备可以摄人图像,对凝胶图像以数字形式保存,对每块凝胶图像进行平等的比较,在各研究组之间传递信息,并对大量的数据进行归类分析。目前应用较为广泛的图像分析软件有PDQuest、ImageMaster 2D Elite、Melanie、BioImage Investigator等,分辨率较高,功能齐

双向电泳操作步骤——双向电泳操作步骤

实验方法原理双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。实验材料细胞样品试剂、试剂盒ddH2O溴酚蓝指示剂

氨基酸分离与鉴定——双向层析法(twodimensional-chromatograp...

实验原理纸层析是以滤纸作支持物,用一定的溶剂系统展开,使混合样品达到分离分析的层析方法。其一般操作是将样品溶解在适当溶剂中,点样在滤纸的一端;再选用适当的溶剂系统,从点样的一端通过毛细现象向另一端展开,展开完毕,取出滤纸晾干或烘干,再以适当的显色剂或紫外灯、荧光灯下观察其图谱。样品经展开后某一物质在

氧化扩散设备之氧化扩散炉的应用

  扩散炉用于大规模集成电路、分立器件、电力电子、光电器件和光导纤维等行业的扩散、氧化、退火、合金及烧结等工艺。  扩散工艺的主要用途是在高温条件下对半导体晶圆进行掺杂,即将元素磷、硼扩散入硅片,从而改变和控制半导体内杂质的类型、浓度和分布,以便建立起不同的电特性区域。  最新的低压磷扩散利用低压氛

促进扩散同简单扩散相比有哪些特点?

  在人类细胞中已发现的此类蛋白至少有11种,被命名为水通道蛋白(Aquaporin,AQP),均具有选择性的让水分子通过的特性。在实验植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中已发现35个这类水通道。  水通道的活性调节可能具有以下途径:通过磷酸化使AQP的活性增强;通过膜跑运输改变

自由扩散、协助扩散和主动运输的比较

自由扩散、协助扩散和主动运输的比较对比如下:比较项目运输方向是否需要载体是否消耗能量代表例子自由扩散高浓度—低浓度;顺浓度差不需要不消耗氧气,二氧化碳,水分子协助扩散高浓度—低浓度;顺浓度差需要不消耗葡萄糖进入红细胞主动运输低浓度—高浓度;逆浓度差需要消耗氨基酸、各种离子进入细胞,葡萄糖进入小肠上皮

自由扩散、协助扩散和主动运输的比较

对比如下:比较项目运输方向是否需要载体是否消耗能量代表例子自由扩散高浓度—低浓度;顺浓度差不需要不消耗氧气,二氧化碳,水分子协助扩散高浓度—低浓度;顺浓度差需要不消耗葡萄糖进入红细胞主动运输低浓度—高浓度;逆浓度差需要消耗氨基酸、各种离子进入细胞,葡萄糖进入小肠上皮细胞

双向电泳实验

试剂、试剂盒 尿素去污剂仪器、耗材 聚丙烯酰胺凝胶实验步骤 一、第一向1. 等电聚焦凝胶的准备双向电泳通常用聚丙烯酰胺凝胶作介质,但需含有 8 mol/L 尿素、0.5%~2% 非离子或两性离子去污剂。为了增加样品的可溶性,可加 0.5% CHAPS。在第一向电泳中,最重要的是用载体两性电解

双向电泳实验

ISO-DALT 方法 IPG-DALT 方法             实验方法原理 双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电

双向凝胶电泳

双向凝胶电泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年发明的,原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,具有相同等电点的蛋白质无论其分子大小,在电场的作用下都会用聚焦在某一特定位置即等电点处;第2向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白

琼脂扩散实验

实验材料 待检血清试剂、试剂盒 生理盐水琼脂粉仪器、耗材 微量进样器打孔器玻璃板湿盒实验步骤 1.  将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。2.  在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5厘米)打孔,见图1。1~5孔加参考血清,6~7孔

单向扩散试验

单向扩散试验:琼脂内混入抗体,待测抗原从局部向琼脂内自由扩散,如抗原和相应抗体结合,则形成沉淀环。1、试管法:将一定量的抗体混入0.7%琼脂糖溶液中,注入小试管内,上层加抗原溶液使待测抗原在凝胶中自由扩散,在抗原抗体比例恰当位置形成沉淀环。2、平板法:是将抗体或抗血清混入0.9%琼脂糖内,未凝固前倾

BAL31-核酸酶消化法产生双向缺失突变体实验

            试剂、试剂盒 BAL31 缓冲液 EGTA 乙醇酚 氯仿 醋酸钠 蔗糖凝胶上样缓冲液 TE 噬菌体 T4D

BAL31-核酸酶消化法产生双向缺失突变体实验

本方案使用核酸酶 BAL31(从海洋细菌 Alteromonas espejiana BAL31 中纯化)在克隆的 DNA 片段中产生单向或双向缺失。BAL31 是一个复合酶,它以非同步的方式消化双链靶 DNA。因此与诸如外切核酸酶Ⅲ这类的加工酶相比,BAL31 产生的缺失更具有不均一性(请见方案

BAL31-核酸酶消化法产生双向缺失突变体实验

试剂、试剂盒 BAL31 缓冲液EGTA乙醇酚氯仿醋酸钠蔗糖凝胶上样缓冲液TE噬菌体 T4DNA 聚合酶BAL31 核酸酶大肠杆菌 DNA 聚合酶 IKlenow 片段限制性内切酶琼脂糖凝胶用于凝胶电泳的 DNA 分子量标准仪器、耗材 计时钟水浴实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的成分请

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的纸片扩散法(KB法)检测

  平皿中MH琼脂厚度为4 mm,菌液调至0.5麦氏浊度,涂沫于上述平板,甲氧西林含量5 μg/片,35°C孵育24 h,抑菌圈≤11 mm为耐药,≥17 mm为敏感,由于MRSA通常对其它耐酶半合成青霉素也耐药,因此美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐用苯唑西林来代替检测MRSA。苯唑西林

最大泡压法计算纯正烷基βD葡萄糖苷扩散速率

应用领域:石油/化工发布时间:2016-07-12检测样品:化学试剂/助剂检测项目:表面活性剂扩散速率参考标准:表面活性剂,动态表面张力,扩散速率,月桂基葡糖苷,吸附作用浏览次数:51次下载次数:1 次方案优势表面活性剂一定时间到达界面的能力可以描述为分子的扩散和吸附系数。最大泡压法可以简单有效的测