关于基本培养基的基本内容介绍
基本培养基:仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基,称为基本培养基(minimal medium,MM),有时用符号“[ - ]”来表示。不同微生物的基本培养基是不同的,基本培养基又称无机盐培养基。 一、基本培养基的配方: 蒸馏水1L 葡萄糖 0.5% 硝酸铵 1.0 g/L 磷酸二氢钾 0.5g/L 磷酸氢二钠 1.5g/L 氯化钠 1.0g/L 七水硫酸镁 0.2g/L (最后放) 调PH 7.2 二、基本培养基的注意事项:在基本培养基中加入抗生素,野生型菌株被杀死,营养缺陷型不能在基本培养基中生长而被保留下来。......阅读全文
非洲粟酒裂殖酵母的培养基实验
基本培养基的制备 丰富培养基YE和YEA的制备 试剂、试剂盒 维生素 矿物质 盐类储存液
细胞生长培养基的作用介绍
细胞生长培养基(液)是用以维持细胞生长增殖之用,含血清比例较大。生长培养液是培养细胞工作中最主要的培养用液。其组成为:基础培养基80%~90%,血清(多用小牛血清) 10%~20%,抗生素(多用青霉素100U/mL和链霉素100μg/mL)。 这是适用于一般细胞的培养液组成。为培养特定细胞,还
什么是维持培养基?
这是为维持细胞缓慢生长或不死的培养液,血清含量甚少。一般细胞因缺少生长因子不能增殖,生长缓慢;但发生转化或癌细胞因自身有产生促生长增殖因子的能力,虽在血清缺少情况下仍能生长;因此维持液可用于选择发生恶性转化的细胞。其组成为:基本培养基95%,血清2%~5%,抗生素(多用青霉素100U/mL和链霉
简述选择性培养基的性质
用于选择分离微生物重组型、突变型或择优分离自然界某类微生物的培养基。如在基本培养基上接种两个不同的营养缺陷型株,可以选择出原养型重组体。又如在含有某一抗生素的培养基上只有对此抗生素产生抗性的突变株能形成菌落。还可以通过选择某些培养基成分使某种最能适应该种培养基的微生物能成功地竞争并超过接种物中存
微生物培养基的分类
分类按培养基组成物质的化学成分区分根据对培养组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。(1)天然培养基。天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。例如培养细菌常用的肉汤蛋白胨培养基:牛肉膏3g,蛋白胨5g,水1000mL。用做
菊苣组织培养及无性系建立
一、材料和方法1. 材料及灭菌将田间生长旺盛、具有有利变异性状的菊苣采回来后,切去叶片。将叶柄放到磨口瓶中,用自来水冲洗4次后,用0.05%安利洗涤液洗涤30min,洗至无泡沫时置于超净工作台上。用75%乙醇灭菌20s后迅速用无菌水洗涤3次,接着用0.1%HgCl2溶液振荡灭菌1min,再用0.05
酵母人工染色体的标记方法
YAC 载体的选择标记主要采用营养缺陷型基因,如色氨酸、亮氨酸和组氨酸合成缺陷型基因 trp 1、 leu 2和 his 3、尿嘧啶合成缺陷型基因 ura3 等,以及赭石突变抑制基因 sup4 。与 YAC 载体配套工作的宿主酵母菌(如AB1380)的胸腺嘧啶合成基因带有一个赭石突变ade 2-1。
植物组织培养基中有哪些成分?
植物组培培养基大致由6种成分组成:(1)糖类,(2)多种无机盐类,(3)微量元素,(4)氨基酸、酰胺、嘌呤:(5)维生素、生长素。此外,有些培养基还可添加天然的汁液,如椰子汁、酵母提取液、水解酪蛋白、麦芽浸出液等,培养基中如加入0.5~1%的琼脂即为静止培养的固体培养基,否则为悬浮培养的液体培养
橡皮树组培及成品苗养护
一、材料处理1. 外植体选择在生长健壮、无病虫害的盆栽橡皮树植株上切取当年生嫩枝作为外植体。2. 材料的处理与灭菌将外植体去掉叶片及叶柄,剪成带顶芽和腋芽的茎段,长约3 -5cm 左右。先用中性洗洁精溶液浸泡10 -20min ,自来水冲洗20 -30min 。在超净台上将预处理后的外植体用75
橡皮树组培
一、材料处理1. 外植体选择在生长健壮、无病虫害的盆栽橡皮树植株上切取当年生嫩枝作为外植体。2. 材料的处理与灭菌将外植体去掉叶片及叶柄,剪成带顶芽和腋芽的茎段,长约3 -5cm 左右。先用中性洗洁精溶液浸泡10 -20min ,自来水冲洗20 -30min 。在超净台上将预处理后的外植体用75
关于人脑微血管内皮细胞的细胞培养说明
注意:冷冻保存的细胞非常脆弱。将小瓶置于37°C水浴融化细胞,然后尽快移入培养物(液)中,尽量减少操作。 人脑微血管内皮细胞的细胞培养准备 1.准备纤维连接蛋白包被的培养瓶(2 μg /cm2,推荐用T-75的培养瓶)。向培养瓶中加入10 ml无菌Dulbecco's磷酸盐缓冲液(D
rhpPC基因协同调节III型分泌系统基因表达的分子机制
III型分泌系统是大多数革兰氏阴性病原细菌(包括植物病原菌和动物病原菌)感染宿主的重要“武器”,是由蛋白复合体构成的跨膜分子装置。病原菌通过III型分泌系统将一系列效应蛋白注入宿主细胞内,从而逃避宿主细胞的免疫防御并建立感染。III型分泌系统基因的表达受各种环境因素和宿主因素的影响,在丰富培养基
研究揭示细菌III型分泌系统调控机制
III型分泌系统是大多数革兰氏阴性病原细菌(包括植物病原菌和动物病原菌)感染宿主的重要“武器”,是由蛋白复合体构成的跨膜分子装置。病原菌通过III型分泌系统将一系列效应蛋白注入宿主细胞内,从而逃避宿主细胞的免疫防御并建立感染。III型分泌系统基因的表达受各种环境因素和宿主因素的影响,在丰富培养基中其
梨离体叶片再生实验
实验概要试验研究了基本培养基、激素配比、细胞分裂素、生长素、培养基添加物、蔗糖浓度、pH值及叶龄与接种方式对梨离体叶片不定芽再生的影响,优化了再生条件,建立起了高效、稳定的离体叶片再生体系。实验材料金花和丰产两种梨树的离体叶片。实验步骤1. 培养基的配制 试验所用的培养基为MS (Murashige
细胞异核体的分类
异核体有两种类型:(1)核数不定的异核体:细胞中存在的细胞核数目不定,可继续无性增殖。核数目为三个时,称为三核异核体(trikaryon),多核时,则称为多核异核体(multikaryon);(2)二核异核体:所含的二种核比例量1∶1,这是遗传上平衡的异核体。对霉状菌可利用异核体来进行互补测定。能互
脑脊液微生物学检查的细胞培养
细胞培养:主要适用于脑膜炎奈瑟菌、链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌等和分离培养。血平板和巧克力平板是分离用的最基本培养基。 巧克力平板需放入二氧化碳环境中,有利于检出脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌等。为了分离鉴别革兰氏阴性杆菌还应增种中国蓝平板。如果培养及时一般需氧培养的阳性
异核体的类型介绍
(1)核数不定的异核体:细胞中存在的细胞核数目不定,可继续无性增殖。核数目为三个时,称为三核异核体(trikaryon),多核时,则称为多核异核体(multikaryon);(2)二核异核体:所含的二种核比例量1∶1,这是遗传上平衡的异核体。对霉状菌可利用异核体来进行互补测定。能互补的不同营养缺陷突
关于异核体的分类介绍
(1)核数不定的异核体:细胞中存在的细胞核数目不定,可继续无性增殖。核数目为三个时,称为三核异核体(trikaryon),多核时,则称为多核异核体(multikaryon); (2)二核异核体:所含的二种核比例量1∶1,这是遗传上平衡的异核体。对霉状菌可利用异核体来进行互补测定。能互补的不同营
花药培养技术的基本操作方法
取新鲜未开的花蕾用自来水冲洗10分钟,用75%的酒精消毒10-15分钟,无菌水冲洗2次,再用10%漂白粉上清液浸泡20分钟,无菌水冲洗3-4次。然后将花药放到加有基本培养基的小烧杯中,用注射器的内管在烧杯的壁上挤压花药,使花粉从花药中释放出来。用尼龙筛过滤掉药壁组滤液再经低速离心(100-160r/
脑脊液微生物学检查的细胞培养
脑脊液微生物学检查 细胞培养:主要适用于脑膜炎奈瑟菌、链球菌、葡萄球菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌等和分离培养。血平板和巧克力平板是分离用的最基本培养基。巧克力平板需放入二氧化碳环境中,有利于检出脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌等。为了分离鉴别革兰氏阴性杆菌还应增种中国蓝平板。如果培养及时一般需
大肠杆菌杂交及基因定位实验
一、原理大肠杆菌染色体呈环状。高频重组菌株(Hfr)的染色体上整合有F因子,当Hfr细菌与F-细菌细胞发生接合(即杂交)时Hfr细胞(供体菌)的染色体从Hfr细胞向F-细胞内转移。由于染色体的转移具有一定的方向性,并且可以随时中断,因此根据结合后F-细菌(以重组子形式选出)中Hfr细菌染色体基因出现
植物组织培养培养基包括哪些主要成分
植物组织培养培养基包括:1.糖类2.多种无机盐类3.微量元素4.氨基酸、酰胺、嘌呤5.维生素6.生长素。此外,有些培养基还可添加天然的汁液,如椰子汁、酵母提取液、水解酪蛋白、麦芽浸出液等,培养基中如加入0.5~1%的琼脂即为静止培养的固体培养基,否则为悬浮培养的液体培养基。不同植物材料常需要改变配方
大肠杆菌杂交及基因定位
一、原理 大肠杆菌染色体呈环状。高频重组菌株(Hfr)的染色体上整合有F因子,当Hfr细菌与F-细菌细胞发生接合(即杂交)时Hfr细胞(供体菌)的染色体从Hfr细胞向F-细胞内转移。由于染色体的转移具有一定的方向性,并且可以随时中断,因此根据结合后F-细菌(以重组子形式选出)中
南非叶的繁殖方式
外植体采集:选取生长健壮、无病虫害的优良植株,剪取木质化程度较轻的当年生嫩枝为外植体; 外植体消毒:将采回的茎段截成长1.2-1.5厘米的带节小段,剪去叶片,只保留叶柄基部(长约0.5厘米),流水冲洗20分钟备用;在超净工作台上,用75%酒精浸泡10秒,0.1%升汞振荡消毒8分钟,再用无菌水冲
简述解淀粉芽孢杆菌的生理特性
解淀粉芽孢杆菌可产生多种α-淀粉酶及蛋白酶,与枯草芽孢杆菌在形态、培养特征及生理生化特性方面非常相似;属兼性厌氧菌,菌落在LB培养基上和牛肉膏蛋白胨培养基上呈淡黄色不透明菌落,表面粗糙,有隆起,边缘不规则,在多种培养基上均不产色素;液体培养静止时有菌膜形成;革兰氏染色呈阳性,杆状,可形成内生芽孢
解淀粉芽孢杆菌的生理特性介绍
解淀粉芽孢杆菌可产生多种α-淀粉酶及蛋白酶,与枯草芽孢杆菌在形态、培养特征及生理生化特性方面非常相似;属兼性厌氧菌,菌落在LB培养基上和牛肉膏蛋白胨培养基上呈淡黄色不透明菌落,表面粗糙,有隆起,边缘不规则,在多种培养基上均不产色素;液体培养静止时有菌膜形成;革兰氏染色呈阳性,杆状,可形成内生芽孢
完全培养基的基本介绍
基础培养基添加血清、抗生素等物质后,叫完全培养基,也叫(血清)细胞培养基。基础培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需添加天然培养基,常用的是牛血清,因为牛血清中含有促细胞增殖的各种生长因子和其他多种有利于细胞生存的物质。此外为防止污染,培养液中尚需加一定量的抗生素。 完全培养基根据添
尿液标本接种实验
1、涂片检查:一般细菌涂片:以无菌操作取尿 5-10 ml 放入无菌管中,经 3000 r/min 离心 30 min 后,倾去上清液,取沉渣,涂片,革兰氏染色,镜检。如发现有革兰氏阴性或阳性细菌,即可做出报告。2、尿细菌培养:临床多采用中段尿做细菌培养,应做菌落计数,培养结果才有诊断价值。(1)平
M13噬菌体液体培养
实验方法原理 M13 噬菌体原种通常采用液体培养,感染细胞并不裂解而是缓慢生长形成稀悬液。接种几乎总是用一个新挑取的噬菌斑或单个噬菌斑获得的噬菌体颗粒悬液。感染细胞含 200 拷贝以上双链 RF DNA,每代分泌数百个噬菌体颗粒。实验材料 M13 噬菌斑大肠杆菌 F' 菌株仪器、耗材 LB
M13噬菌体液体培养
实验方法原理 M13 噬菌体原种通常采用液体培养,感染细胞并不裂解而是缓慢生长形成稀悬液。接种几乎总是用一个新挑取的噬菌斑或单个噬菌斑获得的噬菌体颗粒悬液。感染细胞含 200 拷贝以上双链 RF DNA,每代分泌数百个噬菌体颗粒。