Science:实时监测活细胞DNA动态

来自美国的研究人员开发了一种新方法,研究了活细胞中的DNA损伤及由此造成的染色体易位。这一研究成果发表在8月9日的《科学》(Science)杂志上。 由于正常的细胞过程及辐射等环境因素的影响,活细胞中常常会发生DNA损伤。细胞会不断地修复这些DNA损伤,但是如果修复失败,DNA双链就有可能发生断裂,分离为两部分。这一称之为DNA双链断裂(double-strand break ,DSB)的细胞损伤过程对宿主细胞是有危险的,因为当断裂链试图再度配对连接时,它们没有模板可循,可能会与不同的染色体配对,导致染色体易位,基因意外重排。染色体易位是癌细胞的一个标志。 美国国立癌症研究所研究员Vassilis Roukos以及同事们,利用超高吞吐量的时差显微成像技术实时监控了染色体易位。研究小组的目的是调查易位过程中及之后的事件,以增进我们对于这些过程的理解,研究人员在DNA双链断裂和其他易位事件发生之时成功捕获......阅读全文

双着丝粒染色体的定义

  在经染色体断裂剂处理或染色体断裂综合征病人的细胞中,双着丝粒染色体(DC)相当常见。它们起源于两条非同源染色体片段或两条同源染色体片段,后一种情况常常导致等臂双着丝粒染色体(IDC)。能恒定遗传的DC,其着丝粒之一功能失活,这种失活作用可能发生在DV形成后,其机理尚不清楚。

双着丝粒染色体的定义

在经染色体断裂剂处理或染色体断裂综合征病人的细胞中,双着丝粒染色体(DC)相当常见。它们起源于两条非同源染色体片段或两条同源染色体片段,后一种情况常常导致等臂双着丝粒染色体(IDC)。能恒定遗传的DC,其着丝粒之一功能失活,这种失活作用可能发生在DV形成后,其机理尚不清楚 。

分子遗传学词汇同源双链体

中文名称:同源双链体英文名称:homoduplex定  义:物种中原有的双链DNA,或经变性复性后完全互补的双链DNA。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

小鼠双链DNA(dsDNA)ELISA试剂盒

小鼠双链DNA(dsDNA)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 dsDNA 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 dsDNA与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠dsDNA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶

标记双链DNA的3突出端

实验材料限制性内切核酸酶小牛胸腺末端转移酶模板 DNA试剂、试剂盒乙酸铵乙醇酚氯仿末端转移酶缓冲液仪器、耗材Sephadex G-50 离心柱实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液乙酸铵(10 mol/L )乙醇酚:氯仿(1:1,V/V)2. 酶和缓冲液适当的限制性内切核酸酶小牛胸腺末端转移酶5X 末端

关于抗双链DNA抗体的基本介绍

  抗双链DNA抗体是抗DNA抗体中的一种,是系统性红斑狼疮(SLE)的血清学标志物,而且是临床上最常进行的一项实验室检测指标。SLE是一种常见的慢性自身免疫性疾病,其发病原因和机制尚未明确,通常认为,是由于细胞和体液免疫紊乱,机体正常的免疫耐受性受损,导致对自身组织产生免疫反应而出现组织损害。抗d

抗双链DNA抗体的临床意义

  抗dsDNA自身抗体是SLE的最重要的自身抗体,检出率40%~70%.高滴度抗dsDNA的存在是SLE诊断的重要依据,也是疾病活动性特别是肾脏损伤的标志。除用于SLE的诊断外,也可用于临床病程和治疗效果的监测,对判断预后也有一定价值。但也有人报道在肝脏疾病、青少年型类风湿性关节炎,乃至正常人中发

双链DNA结合域的结构和作用

双链DNA结合域,DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。 双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains):一个DNA结合域,它可以结合一段特异的DNA序列,和一个转录激活域,这个转录激活域与基础转录机制相作用。

RNAi——双链RNA引起的基因敲除(1)

1995年,康奈尔大学的Su Guo博士用反义RNA阻断线虫基因表达的试验中发现,反义和正义RNA都阻断了基因的表达,他们对这个结果百思不得其解。直到1998年, Andrew Fire的研究证明,在正义RNA也阻断了基因表达的试验中,真正起作用的是双链RNA[1]。这些双链RNA是体外

RNAi——双链RNA引起的基因敲除(2)

在构建双链RNA的表达载体时,使用RNA多聚酶Ⅲ来指导RNA的合成。这是因为RNA多聚酶Ⅲ有明确的启始和终止序列,而且合成出的RNA不会带有polyA尾。当RNA多聚酶Ⅲ遇到连续5个胸腺嘧啶时,它指导的转录就会终止,并且转录产物在第二个尿嘧啶处被切下来。U6启动子能被RNA多聚酶Ⅲ识别, 合

简述抗双链DNA抗体的检测方法

  1、间接免疫荧光法(IIF):以绿蝇短膜虫虫体为包被基质,其上只含有一个单纯的、完整的dsDNA分子,不含有任何其他物质,特异性好;由于只结合血清中的高亲和力抗体,故灵敏度有一定限制。  2、免疫印迹法(LIA):综合了十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳高分辨率和酶免疫吸附技术的高特异度,广泛用于

切口平移法双链DNA探针标记法

 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'

免疫学实验双链酶试验介绍

  双链酶试验介绍:  用从溶血性链球菌培养液中提取的链激酶(SK)及链道酶(SD)制成的抗原。  双链酶试验正常值:  局部不出现红肿反应者阴性,硬结直径>5mm者为阳性。  双链酶试验临床意义:  意义SK-SD试验阴性者,很可能是细胞免疫功能低下,亦可能是被检者未受相应链球菌的感染。此外,尿毒

双脱氧ATP末端标记双链DNA的3突出端

            实验材料 限制性内切核酸酶 小牛胸腺末端转移酶 模板 DNA 试剂、试剂盒 乙酸铵

什么是蛋白质易位?

由于核糖体将mRNA翻译成蛋白质是在胞质溶胶中进行的,因此必须转移用于分泌或特定细胞器的蛋白质。这个过程可以在翻译过程中发生,称为共翻译易位,也可以在翻译完成后发生,称为翻译后易位。

关于罗伯逊易位的基本介绍

  罗伯逊易位(Robertsonian translocation),又称着丝粒融合(centric fusion)。这是发生于近端着丝粒染色体的一种易位形式。当两个近端着丝粒染色体在着丝粒部位或着丝粒附近部位发生断裂后,二者的长臂在着丝粒处接合在一起,形成一条由长臂构成的衍生染色体;两个短臂则构

关于罗伯逊易位的基本介绍

  罗伯逊易位(Robertsonian translocation),又称着丝粒融合(centric fusion)。这是发生于近端着丝粒染色体的一种易位形式。当两个近端着丝粒染色体在着丝粒部位或着丝粒附近部位发生断裂后,二者的长臂在着丝粒处接合在一起,形成一条由长臂构成的衍生染色体;两个短臂则构

染色体双二价体的概念

中文名称双二价体英文名称amphibivalent定  义异源四倍体(双二倍体)的体细胞含有双亲的二倍体染色体组,在减数分裂时,形成的含有8条染色单体的二价体。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)

单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备

            实验方法原理 这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA,因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体,以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA,如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时

单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备

实验方法原理 这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA,因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体,以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA,如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时。实验材料 大肠杆菌 F' 菌株M13 噬菌体原液

单链和双链M13噬菌体DNA的大规模制备

这个方案主要用于制备大量 M13 噬菌体的双链 DNA,因在实验室中 M13 噬菌体经常被用作克隆载体,以及在某些特殊用途时需要制备大量的单链噬菌体 DNA,如当一个特定的重组体被多次用于制备反射性标记探针或构建大量定点突变体时。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这个方案主

人体染色体畸变分析(三)

  (B)、正常配受子精结果(C)及某些具有代表性的核型(D)  6.双着丝粒染色体 两条染色体断裂后,具有着丝粒两个片段相连接,即形成一个双着丝粒染色体(图2-3)。两个无着丝粒片段也可以连接成一个无着丝粒片段,但后者通常在细胞分裂时丢失。双着丝粒染色体常见于电离辐射后,因此在辐射遗传学中常用以估

关于Y染色体的数目异常的介绍

  包括前已述及的XYY以及超Y综合征(XXYY等)。Y染色体的结构异常包括Y的长臂或短臂缺失、等臂染色体i(Yq)和i(Yp)、环状染色体和双着丝粒染色体(为两条Y的短臂   相连或两条Y的长臂相融合)、倒位和各种涉及Y的易位(即Y与常染色体,Y与X染色体的易位等)。此外性反转综合征46,XX男性

儿童急性淋巴细胞性白血病的发病机制

  有关白血病发病机制的研究甚多,包括对分子遗传改变、预后因素分子流行病学及药物遗传学等方面的研究推测有两种可能即获得性遗传损伤可激活细胞的初始致癌基因或灭活肿瘤抑制基因(抗癌基因),二者均可导致肿瘤监控能力丢失使白血病细胞失控性增殖。这些遗传学上的改变可以为点突变、基因扩增、基因缺失或染色体易位。

双链酶试验的注意事项有哪些

  一、抽血前的注意事项  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。  3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。  二、抽血后应注意  1、抽血后,需

假链状双歧杆菌与婴儿湿疹相关

英国曼彻斯特Wythenshawe医院Gore等报告,假链状双歧杆菌与婴儿特应性湿疹相关,且非母乳喂养婴儿的粪便假链状双歧杆菌检出率较高。[J Allergy Clin Immunol 2008,121(1):135]     该研究是一项病例对照研究,纳入3~6月龄患湿疹与未患湿疹婴儿,按性别

随机引物合成法双链DNA探针标记法

随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是:(1)Klenow片段没有5'→3'外切酶活

临床化学检查方法介绍双链酶试验介绍

双链酶试验介绍:  用从溶血性链球菌培养液中提取的链激酶(SK)及链道酶(SD)制成的抗原。双链酶试验正常值:  局部不出现红肿反应者阴性,硬结直径>5mm者为阳性。双链酶试验临床意义:  意义SK-SD试验阴性者,很可能是细胞免疫功能低下,亦可能是被检者未受相应链球菌的感染。此外,尿毒症者对SK-

RNAi实验中双链短RNA(dsRNA)制备过程

RNAi 实验中双链短RNA(dsRNA)制备过程,本实验方法来自于加州大学Jim教授实验,很权威!Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1. Design polymerase chain reaction (PCR ) prim

双链核糖核酸的结构和功能特点

双链核糖核酸(双链RNA,dsRNA),是由两条互补链复性形成的RNA分子,可以被Dicer酶切割形成siRNA。 双链核糖核酸,在体内具有抑制癌细胞快速分裂的作用。