清华大学王宏伟教授发表最新Nature子刊文章
2013年12月15日，清华大学生命科学学院王宏伟教授课题组在《Nature》子刊《Nature Structural and Molecular Biology》在线发表题为“Visualization of Distinct Substrate Recruitment Pathways in the Yeast Exosome by EM”的研究论文，报道了不同RNA底物在蛋白复合物Exosome中的不同降解通路及结构调节机制。 在中心法则中，RNA由DNA转录而成，并经过复杂的转录后加工，成为成熟的多种RNA。细胞中的RNA质量控制，在细胞基因表达及调控的多个过程中发挥着不可缺少的作用，对细胞的发生、生长、分裂、分化、死亡等过程都具有重要意义。目前对细胞中的RNA质量控制，尤其是对RNA分子被降解的决定因素知之甚少。真核生物细胞中有多种识别及调控RNA降解的蛋白质大分子及其复合物，其中， Exosom......阅读全文
酶免疫技术酶与底物
酶结合物是酶与抗原或者抗体、半抗原在交联剂作用下联结的产物,是 ELISA 成败的关键试剂。它不仅具有抗原抗体的特异性反应,还具有酶促反应的特性,最终产生生物放大的特性。酶免疫反应中,最常用的酶是辣根过氧化物酶,HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染
HRP底物分类及其操作步骤
底物范围较广，包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。二氨基联苯胺／金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物，在水和醇中不溶解。多数情况下，推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑
HRP底物归类以及操作流程
二氨基联苯胺／金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最比较敏感、常见的底物。它造成明显的深棕色物质，在水和醇中不融解。大部分状况下，强烈推荐在DAB中添加不一样的金属正离子。当添加金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶能够更为比较敏感。该类反映物质呈暗灰蓝色至灰黑色，且在水及醇中平稳。DAB／金
泛素依赖降解途径
大多数蛋白酶（包括溶酶体酶体系）降解底物时不需要三磷酸腺苷（ATP）提供能量，如胃蛋白酶、胰蛋白酶等。20世纪50年代初，Simpson在肝脏组织培养的切片中检测到了氨基酸的产生，揭示出细胞内大部分蛋白质的降解需要能量。真核生物如何识别和选择性降解蛋白质是细胞生命过程中的重要环节，对于维持蛋白质在细
降解的概念
降解，一般指有机化合物分子中的碳原子数目减少，分子量降低。对于降解，不同的学者持有有不同的观点，有一种观点认为降解物最终要被分解成二氧化碳和水才能称为降解。
降解的概念
降解，一般指有机化合物分子中的碳原子数目减少，分子量降低。对于降解，不同的学者持有有不同的观点，有一种观点认为降解物最终要被分解成二氧化碳和水才能称为降解。
Simth降解反应
Smith降解反应是冷的条件下脱去糖（分解掉）的反应，适用于难水解的苷获得苷元，不适用于苷元自身存在反式邻二醇结构的化合物。并且可以通过测定分解糖产生的小分子化合物来推断糖的种类。其步骤：准备物品：容量瓶（25ml * 2，50ml * 2；茶色为好）、锡纸、碱式滴定管、定量滤纸
Nat－Mat：生物降解电池可在体内降解
生物降解电池可通过药物传输到体内，在使用结束后，还可在体内降解，这在医学移植和手术医疗方面的确是一个重要发现。 生物降解电池不仅能够促进植入设备在体内正常的运转，同时也可将设备送达体内至目标治疗区域，它的一个好处就是在使用完后，可在体内降解，并被人体吸收。 美国麻省一
“可生物降解”茶包在环境中不降解
一项近日发表于《总体环境科学》的研究表明，一些用塑料替代品制作的茶包在土壤中不会降解，有可能危害陆地物种。“为了应对塑料垃圾危机，聚乳酸等可生物降解塑料正在越来越多的产品中应用。这项研究强调，在更广泛地应用这种材料之前，需要更多证据证明其降解情况和可能的影响，并防止在处理不当的情况下产生负面问题。”
“可生物降解”茶包在环境中不降解
一项近日发表于《总体环境科学》的研究表明，一些用塑料替代品制作的茶包在土壤中不会降解，有可能危害陆地物种。 “为了应对塑料垃圾危机，聚乳酸等可生物降解塑料正在越来越多的产品中应用。这项研究强调，在更广泛地应用这种材料之前，需要更多证据证明其降解情况和可能的影响，并防止在处理不当的情况下产生负面
关于微生物降解的降解解释说明
1、微生物降解—有机化合物分子中的碳原子数目减少，分子量降低。 2、微生物降解—高分子化合物的大分子分解成较小的分子。 3、微生物降解—塑料降解：塑料降解一词指高分子聚合物达到生命周期的终结。塑料降解是使聚合物分子量下降、聚合物材料（塑料）物性下降。典型表现是：塑料发脆、破裂、变软、增硬、丧
Cell：去泛素化与膜蛋白调控机制
内质网相关的降解过程能清除错误折叠蛋白的分泌途径，同时介导一些内质网残留蛋白的调控降解过程。研究发现一种蛋白与一种泛素连接酶之间相互作用的细微增加，都能引发信号底物的降解，一项最新的研究解析了其中的作用机制，指出去泛素化可以作为一种信号放大器，放大信号，从而进行下游调控。这一研究成果公布在Cel
底物化学发光的用途
非放射性发光系统,用于检测固定在膜上的蛋白,其敏感性达1-5pg。用x光片可快速地获得永久的硬拷贝结果。所含独特的底物足以维持12小时以上的发光,便于反复曝光操作,免疫印迹膜经抗体脱卸处理后可供再次抗体探查使用。适用于痕量蛋白或核酸检测。
使用荧光底物的直接－ELISA－实验
实验概要使用荧光偶联一抗的直接 ELISA 测定的程序。实验步骤第 1 天：1. 在滤过的 PBS 中稀释包被抗体后，在每孔中加入 100 μl 进行包被。用封板膜覆盖酶标板，将酶标板在 4℃下孵育过夜。 第 2 天：2. 将 4 g Block ACE 粉末稀释于 100 ml 去离子水中，使用其
什么是底物化学发光？
根过氧化酶使试剂中的发光物(luminol)氧化并发光,而试剂中含有增强剂这使得发光增强了1000倍。在免疫印迹中,将复杂的蛋白混合物经sds-page分离,并转移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用于免疫学检测,经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接(标记一抗)或间接(标记二抗)反应。
底物化学发光操作注意
1. 试剂每个批号均独立优化,请不要混用或稀释试剂以免降低敏感性;2. 加入一抗后膜不能再干燥;3. 适当地封闭和洗涤膜片至关重要;4. 使用前配置化学发光试剂,配置足够覆盖膜片即可,弃去使用过的混合试剂;5. 使用干净取样头取用每种试剂;6. 第一张片子建议曝光1分钟,观察结果后判断最佳曝光时间可
试剂盒酶的底物分类
酶的底物 1.3.3.1 HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应，最具代表性的过氧化物为H2O2，其反应式如下：DH2+ H2O2 D+ H2O上式中，DH2为供氧体，H2O2为受氢体。2.在ELISA试剂盒中，DH2一般为无色化合物，经酶作用后成为有色的产品，以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯
底物量对反应结果的影响
化学反应是化学学习的一个重要内容。物质间发生的化学反应往往错综复杂、变化万千。不少化学反应是需要在一定条件下发生的，缺少了反应条件，有的反应是不能发生的，或进行得很慢。反应物的量的不同对反应结果有影响。1、CO2气体通入NaOH溶液中。当n CO2/n NaOH≤1/2时，反应方程式为CO2+ 2N
底物量对反应结果的影响
化学反应是化学学习的一个重要内容。物质间发生的化学反应往往错综复杂、变化万千。不少化学反应是需要在一定条件下发生的，缺少了反应条件，有的反应是不能发生的，或进行得很慢。反应物的量的不同对反应结果有影响。1、CO2气体通入NaOH溶液中。当n CO2/n NaOH≤1/2时，反应方程式为CO2+ 2N
胰岛素受体底物的定义
胰岛素受体底物(insulin receptor substrate，IRS)，参与胰岛素及其他细胞因子信号转导的磷酸化蛋白。IRS在被胰岛素受体磷酸化以后，如同一块“磁铁”与那些具有SH2结构域的蛋白结合，根据所结合蛋白的具体结构产生不同的效应，如激活SH2蛋白的酶活性、改变蛋白质构型并同另外的蛋
胰岛素受体底物的概念
胰岛素受体底物(insulin receptor substrate，IRSs)是一种能够被激活的胰岛受体酪氨酸激酶的底物, 其上具有十几个酪氨酸残基可被磷酸化，磷酸化的IRSs能够结合并激活下游效应物。
什么是酶联免疫吸附法？
酶联免疫吸附法（enzyme：linked：immunosorbent：assay，ELISA）是把抗原—抗体的免疫反应与酶的催化反应相互结合而发展起来的一种综合性技术，它的灵敏度高，特异性强，特别是当寄主体内病毒浓度很低或同时存在病毒钝化物或抑制剂时，它的优势尤为明显，因而是近年来病毒检测方法
什么是酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法（enzyme：linked：immunosorbent：assay，ELISA）是把抗原—抗体的免疫反应与酶的催化反应相互结合而发展起来的一种综合性技术，它的灵敏度高，特异性强，特别是当寄主体内病毒浓度很低或同时存在病毒钝化物或抑制剂时，它的优势尤为明显，因而是近年来病毒检测方法中发
什么是酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法（enzyme：linked：immunosorbent：assay，ELISA）是把抗原—抗体的免疫反应与酶的催化反应相互结合而发展起来的一种综合性技术，它的灵敏度高，特异性强，特别是当寄主体内病毒浓度很低或同时存在病毒钝化物或抑制剂时，它的优势尤为明显，因而是近年来病毒检测方法中发
什么是酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法（enzyme：linked：immunosorbent：assay，ELISA）是把抗原—抗体的免疫反应与酶的催化反应相互结合而发展起来的一种综合性技术，它的灵敏度高，特异性强，特别是当寄主体内病毒浓度很低或同时存在病毒钝化物或抑制剂时，它的优势尤为明显，因而是近年来病毒检测方法中发
什么是酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法（enzyme：linked：immunosorbent：assay，ELISA）是把抗原—抗体的免疫反应与酶的催化反应相互结合而发展起来的一种综合性技术，它的灵敏度高，特异性强，特别是当寄主体内病毒浓度很低或同时存在病毒钝化物或抑制剂时，它的优势尤为明显，因而是近年来病毒检测方法中发
解析泛素蛋白酶体系统：蛋白质降解的主要途径
泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system, UPS)是细胞内蛋白质降解的主要途径，参与细胞内80%以上蛋白质的降解。泛素对蛋白质来说无异于“死神来了”，一旦被盯上，终将被摧毁。 泛素-蛋白酶体系统降解蛋白的途径包括两个主要阶段。第一阶段
细胞周期蛋白的具体作用机制是什么？
细胞周期蛋白通过与细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）结合形成复合物来发挥作用，其具体作用机制包括以下几个方面：激活 CDK 活性：细胞周期蛋白与相应的 CDK 结合，导致 CDK 构象发生变化，暴露其活性位点，从而激活 CDK 的激酶活性。调节底物磷酸化：活化的细胞周期蛋白 - CDK 复合物能够磷酸
信使RNA的降解
同一细胞内的不同mRNA具有不同的寿命（稳定性）。在细菌细胞中，单个mRNA可以存活数秒至超过一小时，但平均寿命为1至3分钟，因此，细菌mRNA的稳定性远低于真核mRNA。哺乳动物细胞mRNA的寿命从几分钟到几天不等。mRNA的稳定性越高，从该mRNA产生的蛋白质越多。 mRNA的有限寿命使细胞能够
mRNA降解途径分析
涉及到许多细胞内因子和复合物, 如Dcp1p、Pat1p、Rap55和staufen等.同时, 也有报导认为, 细胞质处理小体是体内mRNA 降解的主要位点 .因此, 明确细胞质处理小体(P-body)在mRNA 降解过程的功能以及各种酶和复合物调节mRNA 降解所经历的途径是本领域研究的主要内容.