光源生物大分子晶体学线站用户最新成果在CELL上发表
近日,上海光源生物大分子晶体学线站用户——清华大学生命学院施一公、医学院颜宁研究组在CELL发表论文揭示CED-4细胞凋亡体的结构与功能机理。 施一公领导的实验室一直致力于对细胞凋亡调控机理的研究。颜宁的博士研究即因为揭示EGL-1、CED-9调控CED-4的机理而获得2005年的“青年科学家奖”(北美地区),这条通路上的下一个重要问题CED-4激活CED-3蛋白酶的分子机理一直不清楚。他们研究CED-4细胞凋亡体的结构与功能近10年,中间一度陷入瓶颈状态。直至2008年,在清华大学的实验室成功解析了CED-4的3.8埃的晶体结构。据知,这是施一公和颜宁回国之后解析的第一个重要结构,此后又历经十数次在美、日、中五个同步辐射的数据收集,终于利用在上海光源生物大分子晶体学线站收集的数据把结构修正到3.55埃,同时经过近两年的生化分析,初步揭示了CED-4调控CED-3的机理,研究结果于4月30日发表于......阅读全文
细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨
细胞凋亡检测实验——细胞凋亡的形态学检测
实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。仪器、耗材光学显微镜倒置显微镜荧光显微镜共聚焦激光扫描显微镜透射电子显微镜实验步骤一、光学显微镜和倒置显微镜1. 未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞
简述细胞凋亡检测
细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技
细胞凋亡包括什么
细胞凋亡一系列基因的激活、表达以及调控等的作用。人体内的细胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡则是病理性的,有关细胞死亡过程的研究,已成为生物学、医学研究的一个热点。人们已经知道细胞的死亡起码有两种方式,即细胞坏死与细胞凋亡(apoptosis)。细胞坏死是早已被认识到的一种细胞死亡方式,
细胞凋亡的观察
1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料
细胞凋亡的特征
细胞凋亡的特征是细胞由于降解酶,主要是水解酶(蛋白酶与核酸酶)的作用,在近乎正常的细胞质膜内趋向死亡。这与坏死时细胞质膜早期破损不同。在细胞凋亡过程中,质膜脂双层丧失二侧不对称性,磷脂酰丝氨酸暴露于细胞表面,从而导致被吞噬。
细胞凋亡的概念
细胞凋亡(英语:apoptosis,源自希腊语:απόπτωσις,有“堕落、死亡”之意),为一种细胞程序性死亡。相对于细胞坏死(necrosis),细胞凋亡是细胞主动实施的。细胞凋亡一般由生理或病理性因素引起。而细胞坏死则主要为缺氧造成,两者可以很容易通过观察区分开来。在细胞凋亡过程中,细胞缩小,
细胞凋亡的检测
早早期细胞凋亡检测(半胱氨酸蛋白酶3法) 早期细胞凋亡检测(磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法) 早期细胞凋亡检测(细胞线粒体膜蛋白法) 早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法) 晚期细胞凋亡检测(TUNEL法) 晚晚期
细胞凋亡的检测
早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法)实验步骤展开晚期细胞凋亡检测(TUNEL法)实验步骤晚晚期细胞凋亡检测(DNA含量分析法)实验步骤展开
细胞凋亡的意义
细胞凋亡是由体内外因素触发细胞内预存的死亡程序而导致的细胞死亡过程,是与坏死不同的另一种细胞死亡形式。细胞凋亡对确保机体正常发育生长以及维持体内环境稳定,起着非常重要的生理作用,凋亡失调是当今威胁人类健康的许多重大疾病的发病机制之一,如果凋亡不足可导致肿瘤、自身免疫性疾病的发生。而凋亡过度与老年性痴
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法
细胞凋亡综述2
在凋亡早期,活化的Caspase-3是主要的功能蛋白酶。凋亡细胞内,32kD的原酶裂解为17kD和12kD的亚单位,两个亚单位组成二聚体,即活化的Caspase-3,活化的Caspase-3进一步水解活化其它Caspase酶及胞浆内目标(如D4-GDI)和核内目标(如PARP)。Bcl-2家族Bcl
细胞凋亡的检测
早早期细胞凋亡检测(半胱氨酸蛋白酶3法) 早期细胞凋亡检测(磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法) 早期细胞凋亡检测(细胞线粒体膜蛋白法) 早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法) 晚期细胞凋亡检测(TUNEL法) 晚晚期
细胞凋亡检测方法
细胞发生凋亡时,不同区域内(如细胞膜、细胞浆、线粒体、细胞核等)会发生不同的生理生化改变。因此,针对不同区域的细胞凋亡检测要采用不同的方法。1)Annexin V 凋亡检测原理:Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca依赖性磷脂结合蛋白,正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphatidyl
免疫细胞凋亡(二)
(二)T细胞 1.胸腺细胞的发凋亡 淋巴干细胞通过血流进入胸腺,在胸腺中的发育成熟过程中要发生基因的重排和分化,同时,胸腺细胞要经历严格的选择过程,只有那些对自身MHC分子亲和力较高的细胞克隆才被允许发育为CD4+和CD8+双阳性细胞(阳性选择)。其中那些对自身抗原和力较高的胸腺细胞必须清除
细胞凋亡检测方法
细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。 1 光学显微镜和倒
细胞凋亡mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,它们
细胞凋亡综述1
细胞程序性死亡是正常生理现象,多发生于胚胎发育和维持组织自身平衡。Kerr et al.最早发现有两种细胞死亡:坏死(Necrosis)和凋亡(Apoptosis)。Apoptosis,希腊文意思是树叶从树上“凋落”,这里是指凋亡,是细胞主动参与自身死亡的过程。凋亡程序有一些特殊形态学特征,包括
细胞凋亡的定义
细胞凋亡(英语:apoptosis,源自希腊语:απόπτωσις,有“堕落、死亡”之意),为一种细胞程序性死亡。相对于细胞坏死(necrosis),细胞凋亡是细胞主动实施的。细胞凋亡一般由生理或病理性因素引起。而细胞坏死则主要为缺氧造成,两者可以很容易通过观察区分开来。在细胞凋亡过程中,细胞缩小,
综述:细胞凋亡(一)
人体内的细胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡则是病理性的,有关细胞死亡过程的研究,近年来已成为生物学、医学研究的一个热点,到目前为此,人们已经知道细胞的死亡起码有两种方式,即细胞坏死与细胞凋亡。细胞坏死是早已被认识到的一种细胞死亡方式,而细胞凋亡则是近年逐渐被认识的一种细胞死亡方式,
什么是细胞凋亡?
细胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,它并不是病理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。
细胞凋亡的过程
1、凋亡起始2、凋亡小体形成3、凋亡小体逐渐被邻近的细胞或体内吞噬细胞所吞噬,凋亡细胞的残余物质被消化后重新利用。
细胞凋亡的定义
细胞凋亡(apoptosis)是指为维持内环境稳定,在一定的条件下,细胞遵循的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用;它并不是病理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。从细胞功
细胞凋亡是什么?
细胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,它并不是病理条件下,自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。
细胞凋亡的特征
细胞凋亡的特征是细胞由于降解酶,主要是水解酶(蛋白酶与核酸酶)的作用,在近乎正常的细胞质膜内趋向死亡。这与坏死时细胞质膜早期破损不同。在细胞凋亡过程中,质膜脂双层丧失二侧不对称性,磷脂酰丝氨酸暴露于细胞表面,从而导致被吞噬。
综述:细胞凋亡(四)
5 线粒体在细胞凋亡作用中的进一步证据 (1)若将纯化的正常的线粒体与纯化的细胞核在一起保温,并不导致细胞核的变化。但若将诱导生成PT孔道的线粒体与纯化的细胞核一同保温,细胞核即开始凋亡变化。(2)细胞死亡调节蛋白不论是抑制死亡的bcl-2家族还是促进细胞死亡的Bax家族均以线粒体作为靶细胞器
细胞凋亡检测实验
实验方法原理 细胞凋亡或称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是细胞的生命现象之一,它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关,自身免疫性疾病和
细胞凋亡过程介绍
细胞凋亡过程可分为两阶段:开始阶段和效应阶段。在开始阶段又可分为两个途径:外始式和内始式。外始式途径:外始式途径是通过TNF受体家族(如CD95)的受体与配体结合开始的。这些配体有癌症坏死因子(TNF),和其他细胞因子,后者可以由如T淋巴细胞分泌。 在FADD(Fas偶联死亡区域蛋白Fas-asso
细胞凋亡的过程
细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段:接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→进入连续反应过程启动阶段细胞凋亡的启动是细胞在感受到相应的信号刺激后胞内一系列控制开关的开启或关闭,不同的外界因素启动凋亡的方式不同,所引起的信号转导也不相同,客观上说对细胞凋亡过程中信
怎样鉴定细胞凋亡
细胞凋亡的检测细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1 光学显微镜和