弱阳离子交换色谱中疏水作用对蛋白保留的影响
孙 萱, 杨 云, 耿信笃3 (西北大学现代分离科学研究所,现代分离科学省级重点实验室,教育部合成与 天然功能分子化学重点实验室,陕西西安710069) 摘 要:选取了四种常用的弱阳离子交换(WCX) 商品柱以研究标准蛋白在其上的色谱保留行为。发现在疏水色谱( HIC) 模式下,蛋白在这四种WCX 商品柱上也有不同程度的保留特征,且洗脱曲线呈现出保留值随盐浓度变化的“U”型。从分子力学角度定性解释了因疏水相互作用力的存在影响了蛋白在WCX 色谱柱上洗脱顺序的改变。运用计量置换理论(SDT) 中的两组线性方程进一步证实了WCX 和HIC 中蛋白与固定相间相互作用力的性质,在HIC 中为非选择性作用力,而在离子交换色谱( IEC) 中为选择性作用力。这四种色谱柱中的两种事实上可在WCX 和HIC 两种模式下,对标准蛋白进行分离且有较好的分离效果,有可能作为二维色谱柱来使用。 关键词:离子交换色谱;......阅读全文
高效液相色谱流动相和固定相
液相色谱有正反之说，所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相：a.反相流动相：有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了，磷酸盐缓冲液，醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相：乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相：碳十八柱（C18）、碳八柱（C8）、苯基柱b.正相：氨基柱、氰
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
液相色谱有正反之说，所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相：a.反相流动相：有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了，磷酸盐缓冲液，醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相：乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相：碳十八柱（C18）、碳八柱（C8）、苯基柱b.正相：氨基柱、氰
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相：C18、C82、正相固定相：硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相：甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒，表面涂渍固定液。传质速度慢，柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30～40μm
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相：C18、C82、正相固定相：硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相：甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒，表面涂渍固定液。传质速度慢，柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30～40μm
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
高效液相色谱仪流动相和固定相都有哪些?1、反相固定相：C18、C82、正相固定相：硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相：甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒，表面涂渍固定液传质速度慢，柱效低 现采用10μm以下的小颗粒。向左转|向
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相：C18、C82、正相固定相：硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相：甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒，表面涂渍固定液。传质速度慢，柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30～40μm
高效液相色谱流动相和固定相都有哪些
1、反相固定相：C18、C82、正相固定相：硅胶、氨基键合、氰基键合3、流动相：甲醇、乙腈、水一、固定相的形状1、全多孔型最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒，表面涂渍固定液。传质速度慢，柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。2、表面多孔型(薄壳型微珠) 30～40μm
在液固色谱中流动相选择
在液-固色谱中，选择流动相的基本原则是极性大的试样用极性较强的流动相，极性小的则用低极性流动相。为了获得合适的溶剂极性，常采用两种、三种或更多种不同极性的溶剂混合起来使用，如果样品组分的分配比k值范围很广则使用梯度洗脱
色谱分析技术（高压液相色谱、亲和色谱法和吸...（一）
色谱分析技术（高压液相色谱、亲和色谱法和吸附色谱法）高压液相色谱Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色谱的设想，然而直到六十年代后期，由于各种技术的发展，高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱（HighSpeed Liquid Chromatography）
高压液相色谱简述
Martin 和Synge在1941年就提出高效相色谱的设想，然而直到六十年代后期，由于各种技术的发展，高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱（HighSpeed Liquid Chromatography），高压液相色谱（High Parss-ure Lipuid C
高压液相色谱
Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色谱的设想，然而直到六十年代后期，由于各种技术的发展，高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱（HighSpeed Liquid Chromatography），高压液相色谱（High Parss-ure Lipuid Chroma
液相色谱柱流动相的流速的选择
因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1mL/min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8mL/min为佳。当选用最佳流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方
流动相极性对液相色谱分离的影响
这个是根据药典上面的注释来的，具体影响只能说是，对填料的吸附能力有所控制，有很多样品在正向的时候分离效果好，有的则是相反的，这个是不一定的，具体的影响很小，只是针对于有没有利于分离的效果
色谱分析技术:高压液相色谱
一、分类高效液相色谱法可分为四个基本类型：即液－固色谱法，键合相色谱法，离子交换色谱法及体积排阻色谱法。（一）液－固色谱法液－固色谱法通常称吸附色谱法，吸附剂有活性碳，氧化铝和硅胶，在液－固色谱法中用的载体都是硅胶。硅胶对溶质，分子的吸附能力不是平均分布在整个硅脱表面的，在硅胶表面有一些区域与溶质分
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开，还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出，碳酸钙装在玻璃管中固定不动，称为固定相。石油醚不断流过固定相（碳酸钙），所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开，还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出，碳酸钙装在玻璃管中固定不动，称为固定相。石油醚不断流过固定相（碳酸钙），所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对
色谱柱、气相色谱、液相色谱等各种色谱的分离原理
色谱最大的特点是能将一个复杂的混合物中的各组分彼此分离开，还能检测出来这些组分是什么。 我们从茨维特的试验可以看出，碳酸钙装在玻璃管中固定不动，称为固定相。石油醚不断流过固定相（碳酸钙），所以流动的石油醚为流动相。要完成色谱分离最起码的条件要有固定相和流动相参与。色谱的分离过程就是利用相对静止的固
气相色谱术语（固定相和流动相）
1、 固定相：stationary phase 色谱柱内不移动的、起分离作用的物质。2、 吸附剂：adsorbent 具有吸附活性并用于色谱分离的固体物质。3、 固定液：stationary liquid 固定相的组成部分，指涂渍于载体表面上起分离作用的物质，在操作温度下是不易挥发的液体。4、 载体
色谱柱的流动相
1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用
液相色谱柱分离机理
液相色谱柱分离机理
液相色谱固定相
1.1 正相色谱 八十年代初，人们使用的正相色谱固定相硅胶和吡啶硫氰酸镍盐的络合物晶体能与芳香族化合物形成包合物用于分离芳香族含氮异构体和胆甾醇晶体。已有人[1]将焦炭吸附剂作为填料和键合硅胶作过比较并研究其热力学机理。具有离子化或非离子化功能团的大孔聚合物也开始应用于液相色谱，这些聚合物在
高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分
应按各品种项下的规定，常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检
C18液相色谱柱色谱柱液相色谱柱
分析型到制备型一套完整的填料体系，目前可提供的填料键合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔径有60A、100A和300A三种，满足不同条件的分析。填料粒径可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六种。可谓品
液相色谱流动相脱气
流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化，对分
液相色谱流动相小议
一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流
高效液相色谱的液固分离简介
流动相为液体，固定相为吸附剂（如硅胶、氧化铝等）。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是：当试样进入色谱柱时，溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附（未进样时，所有的吸附剂活性中心吸附的是S)，可表示如下：Xm nSa ====== Xa nSm 式中
液固吸附色谱仪流动相简介
液固吸附色谱仪中使用的流动相为有机溶剂，主要是非极性的烃类（如己烷和庚烷等），某些有机溶剂（如二氟甲烷、甲醇和三乙胺等）作为缓和剂加入以调节流动相的溶剂强度、极性和PH值。一、正相色谱：液固吸附色谱是正相色谱。流动相溶剂极性越大，洗脱能力越强，溶质保留越小。流动相溶剂极性越小，洗脱能力越弱，溶质保留
液固吸附色谱仪流动相简介
液固吸附色谱仪中使用的流动相为有机溶剂，主要是非极性的烃类（如己烷和庚烷等），某些有机溶剂（如二氟甲烷、甲醇和三乙胺等）作为缓和剂加入以调节流动相的溶剂强度、极性和PH值。一、正相色谱：液固吸附色谱是正相色谱。流动相溶剂极性越大，洗脱能力越强，溶质保留越小。流动相溶剂极性越小，洗脱能力越弱，溶质保留
wook500液相色谱柱流动相的配制
wook500液相色谱柱一般的液相色谱柱由柱管、柱头螺母、死堵、筛板、还有里面的填料组成。在液相系统中起着分离的作用，是液相色谱系统的核心部件之一。柱管材质有玻璃、不锈钢、铝铜、peek以及内衬光滑的聚合材料的其他材质。一般细粒度的填料采用匀浆填充法装柱，先将填料调成匀浆，在高压泵作用下，快速将
wook500液相色谱柱流动相的配制
液相色谱柱一般的液相色谱柱由柱管、柱头螺母、死堵、筛板、还有里面的填料组成。在液相系统中起着分离的作用，是液相色谱系统的核心部件之一。柱管材质有玻璃、不锈钢、铝铜、peek以及内衬光滑的聚合材料的其他材质。一般细粒度的填料采用匀浆填充法装柱，先将填料调成匀浆，在高压泵作用下，快速将其压入装有洗脱液的