【原理】
植物体内的可溶性糖主要指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是:糖在浓硫酸作用下,脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10~100μg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,基本不受蛋白质存在的影响,并且产生的颜色稳定160min以上。
【仪器 与用具】
分光光度计;电炉;铝锅;20ml刻度试管;刻度吸管5ml 1支,1ml 2支;记号笔;吸水纸适量。
【试剂 】
1.90%苯酚溶液 称取90g苯酚(AR),加蒸馏水10ml溶解,在室温下可保存数月;
2.9%苯酚溶液 取3ml 90%苯酚溶液,加蒸馏水至30ml,现配现用;
3.浓硫酸(比重1.84);
4.1%蔗糖标准液 将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重,精确称取1.000g。加少量水溶解,移入100ml容量瓶中,加入0.5ml浓硫酸,用蒸馏水定容至刻度;
5.100μg/ml蔗糖标准液 精确吸取1%蔗糖标准液1ml加入100ml容量瓶中,加水定容。
【方法】
1.标准曲线的制作
取20ml刻度试管 11支,从0~10分别编号,按表24-1加入溶液和水。
表24-1 各试管 加溶液和水的量
管 号 | 0 | 1~2 | 3~4 | 5~6 | 7~8 | 9~10 |
100μg/ml蔗糖液(ml) | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
水(ml) | 2.0 | 1.8 | 1.6 | 1.4 | 1.2 | 1.0 |
蔗糖量(μg) | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
然后按顺序向试管内加入1ml 9%苯酚溶液,摇匀,再从管液正面快速加入5ml浓硫酸,摇匀。比色液总体积为8ml,在恒温下放置30min,显色。然后以空白为参比,在485nm波长下比色测定,以糖含量为横坐标,光密为纵坐标,绘制标准曲线,求出标准直线方程。
2.可溶性糖的提取
取新鲜植物叶片,擦净表面污物,剪碎混匀,称取0.10~0.30g,共3份,或干材料。分别放入3支刻度试管中,加入5~10ml蒸馏 水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入25ml容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度。
3.测定 吸取0.5ml样品液于试管中(重复2次),加蒸馏 水1.5ml,同制作标准曲线的步骤,按顺序分别加入苯酚,浓硫酸溶液,显色并测定光密度。由标准线性方程求出糖的量,按下式计算测试样品中糖含量。
可溶性糖含量(mg/g)= [C×(V/a)×n]/(W×103 )
式中 C-标准方程求得糖量(μg);
a-吸取样品液体积(ml);
V-提取液量(ml);
n -稀释倍数;
W-组织重量(g)。
【原理】植物体内的可溶性糖主要指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是:糖在浓硫酸作用下,脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10~100μg范围......
可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖,是植物品质的重要构成性状之一,尤其是以果实为目的产品的果树作物,可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。对于鲜食品种,一般来讲,高糖中酸,风味浓,品质优......
盐胁迫是盐碱地土壤上限制作物生长发育最重要的不利因素。可溶性糖(主要为蔗糖、葡萄糖和果糖)不仅是能源和渗透调节物质,而且是重要的信使分子,在光合作用等许多细胞代谢活动的信号转导过程中起调控作用。蔗糖、......
摘要:以软叶丹桂(Osmanthusfragrans‘RuanyeDangui’)、柳叶银桂(O.fragrans‘LiuyeYingui’)和四季桂(O.fra2grans‘Sijigui’)3个桂......
摘要:以软叶丹桂(Osmanthusfragrans‘RuanyeDangui’)、柳叶银桂(O.fragrans‘LiuyeYingui’)和四季桂(O.fra2grans‘Sijigui’)3个桂......
摘要测定了8种植物不同器官中可溶性糖(以棉子糖、蔗糖、葡萄糖和果糖为代表)和可溶性蛋白质的含量及比例。总体上,测定的18个样品中可溶性蛋白质的含量均高于可溶性糖,可溶性蛋白质和可溶性糖比例最大为162......
摘要:为研究湿地松优良半同胞家系蛋白质及糖类对水分逆境的生理响应,采用盆栽试验和吸光度测定结合的方法,以湿地松普通种子为对照(CK),测定了七个湿地松半同胞家系在正常水分状态(土壤相对含水量为70%)......
摘要:以紫茎泽兰离体叶片为材料,研究灰葡萄孢代谢产生的毒素对紫茎泽兰叶片细胞膜透性、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量的影响;测定毒素诱发电解质渗漏液的部分成分.结果表明:灰葡萄孢毒素能使紫茎泽兰叶组织细胞......
摘要:通过对6个不同品种间籽粒蛋白质含量在同一灌浆期的比较,各个品种籽粒蛋白质含量在灌浆的四个时期的动态变化分析,以及籽粒蛋白质含量的变化规律与灌浆速率的关系分析,结果发现:每个品种的蛋白质积累过程中......
摘要:对富贵竹不同抗性的品种茎秆中可溶性糖和可溶性蛋白含量进行了测定。结果表明:植株茎部的可溶性蛋白和可溶性糖的含量从下部向上逐渐递减,植株上部的可溶性蛋白含量和可溶性糖含量最低。抗病品种“小叶”茎的......