COVID19检测小贴士

　　为了支持新型冠状病毒（COVID-19）的检测及疫苗研发工作，美国疾病预防控制中心（CDC）和中国政府都已完成了新型冠状病毒基因组的测序并将结果提交至US NCBI GenBank®数据库 [1]。近日，IDT收到了来自世界各地研究人员关于新型冠状病毒检测试剂盒的询问，以下是部分简要说明。

　　美国疾病预防控制中心

　　美国疾病预防控制中心检测试剂盒* 靶向COVID-19核衣壳蛋白基因（N-基因）上的不同位点。该试剂盒中的3组引物/探针必须与靶向人RNase P基因的内部对照同时运行。每个患者样本共需进行4次qPCR检测。

　　1.该检测试剂盒采用一步法qPCR反应（即逆转录和后续qPCR反应在同一步骤中完成）；

　　2.所有3次N-基因检测只有在Cq<35时方可视为阳性结果；

　　3.RNase P内部对照反应是关键。Cq >35表示样本提取不佳，需要重复实验；

　　敬请查阅最新的美国疾病预防控制中心 COVID-19 RT-PCR检测方法实验室指南，获取相关文档及实验方案。

　　与其他检测试剂盒的比较

　　世界卫生组织（WHO）

　　世界卫生组织实验方案不同于美国疾病预防控制中心实验方案。世界卫生组织建议需进行3次qPCR反应来确认是否感染COVID-19。尽管这是一套完整的实验方案，但没有美国疾病预防控制中心检测方法来得快，因为它需要连续进行3次检测，且必须观察到阳性结果才能进行下一次检测。该实验方案按如下顺序进行检测：

　　1.冠状病毒E-基因

　　2.RdRP基因：针对SARS 冠状病毒和其他蝙蝠相关冠状病毒

　　3.RdRP基因：针对COVID-19

　　中国疾病预防控制中心

　　中国疾病预防控制中心检测试剂盒建议采用2组引物/探针。第1组靶向ORF 1ab，第2组用于确认COVID-19的N-基因。

　　对照组

　　初步的电子模拟分析表明，搭配使用 IDT N-基因阳性对照组模板**与美国疾病预防控制中心检测试剂盒，与使用中国疾病预防控制中心、泰国卫生部以及HKU的引物/探针组进行类似实验获得的结果相符。当然，这是基于电子模拟研究，建议用户在自己的实验室中对所选试剂盒进行验证。