PCR Array FAQ:
任何一台能够做QPCR的仪器据能够做PCRarray吗?
QPCR 仪器都可以进行QPCR array的实验。
根据仪器采用的96孔或者384孔板,分为以下5种板型(plate format):
plate format | Instrument provider | QPCR instrument model |
A(384well) | lifetechnologies | 7900,ViiA7(384 well block) |
B(96 well) | lifetechnologies | 7300,7500,7700,7900(standard 96well),ViiA7(standard 96well) |
C(96 well) | lifetechnologies | 7500(fast block),7900HT(fast block),stepone plus,ViiA 7(Fast block) |
D(96 well) | Biorad | iCycler,MyiQ, iQ5 |
E(96 well) | Biorad | CFX96,DNA Engine opticon,opticon 2,Chromo4 |
BioTNT PCR array的适用在哪里?
回答:适用现有的通路研究;
适用少样本或中等样本,多基因的QPCR 检测;
在低样本或中等样本的情况下,费用和时间远小于自行建立QPCR实验;
使用方便,操作简单,结果稳定性好;
BioTNT PCR array的优点是什么?
Ct值的平均差异只有0.25个循环;
数据分析方便:专用软件方便数据统计与分析
从QPCR 得到实验数据后,如何进行后续的结果分析?需要配套的仪器设备吗?
回答: 您可以用这个链接,http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx
点击分析工具,然后再点击:分析软件下载下载后进行分析。不需要特殊的分析仪器。
BioTNT 的PCR array,如果自己使用,需要购买哪些配套产品?
http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx
PCR array 产品之外,您应购买以下产品,对PCR array进行配套使用:
PCR array cDNA第一链合成试剂盒 A2010B0B03
Real time 染料PCR PreMIX A2010A0112
建议使用高品质的抽提试剂盒,推荐型号为:
RNase-Free DNase Set (50),79254
如果使用其他公司的抽提试剂盒,如Trizol 法抽提试剂盒,能否使用BioTNT的PCR array 产品?
DNA 去除;使用PCR array 产品前,先进行样本质量的验证。能够通过样本质量验证的样本,可以进行PCR array实验。
如何进行PCR array 实验前的样本质量验证?
PCR array实验的质量,建议在使用前先进行样本质量验证;
定量与质量控制
使用无菌水(RNase-free)稀释 RNA 样本,检测 260 nm 和 280 nm 吸光值,A260/280 应大于 1.8。
使用公式A260× 40 ×稀释倍数 = XXXXμg/mL 计算 RNA 浓度。
使用琼脂糖凝胶电泳检测 RNA 完整性。
建议:RNA 质量测定后,逆转录得到CDNA,建议用多个内参基因自行验证CDNA 质量;
biotnt 的样本质量验证引物套装,可以在进行QPCR 之前对样本进行验证(包含内参引物,如human beta actin, GAPDH, 18sRNA等)
基因组DNA污染控制
Array板块上的GDC(Genomic DNA Control)反应孔专为检测每个样品进行qPCR反应时可能存在的基因组DNA污染而设置。如果该反应孔的CT值小于35,则表明存在可检测到的基因组DNA污染,应采取措施予以解决。因此,必须从RNA样品中去除基因组和其他全部残余污染物。建议采用Qiagen 柱式抽提过程中加入DNAse去除基因组污染。
PCR array 之前购买BioTNT 样本质量验证引物套装或者单独的GDC 引物进行基因组DNA 污染控制的质量验证;验证结果CT 值如果小于35,则表明存在可检测到的基因组DNA污染,应采取措施予以解决。
如何进行样本的调平?
PCR array之前,对样本需要进行调平。具体调平方式为:
RNA 含量调平:实验样本的RNA 尽量调到同一水平;加入RNA 酶free的水,调整RNA 浓度;
调平后的样本:通过内参引物进行验证,根据CT 值,进行二次调平。
BioTNT PCR array定制费用如何?
BioTNT PCR array 提供您的定制,仅比预制产品增加了400元/板的定制费用。您可以把您要检测的指标给我们,然后把您的仪器型号,以及sample 数量,重复数量提供给我们,我们为您设置相应的PCR array 形式,并核算相应的费用给您。
BioTNT PCR array的定制,方式灵活,1 plate起订。
http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx,点击定制服务。
如果我没有QPCR 仪器,BioTNT 能够提供什么服务?
BioTNT PCR array service。
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