发布时间:2020-06-03 17:45 原文链接: 植物组织pcr

   直接PCR(Direct PCR)使用未纯化的样本进行PCR扩增,无需核酸纯化步骤,为DNA扩增带来前所未有的便捷。如果您研究领域涉及基因分型、转基因、质粒检测、基因敲除分析、DNA来源鉴定、物种鉴定、SNP分析等,请看完下面的介绍吧。

  直接PCR需要的试剂

  样本裂解液

   样本裂解液可自己配置,也可购置。不同品牌裂解液组份的差异,使得裂解能力各有不同,进而裂解时间稍有差异。比如动物组织样本制备,一般推荐30min或过夜裂解,也有极少数裂解液可以将样本制备时间缩短为5min。

  PCR master mix

   建议使用热启动DNA聚合酶,增强特异性扩增,扩增能力也更强。

  清除或抑制样本中影响DNA扩增的组份

   对于较难处理的样本,如植物和血液,含有较多的可以影响DNA聚合酶结构和活性的抑制剂组份,造成PCR扩增难以进行。针对这类样本,处理样本时需要加入可以清除或抑制样本中影响DNA扩增的组份。

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   德国MACHEREY-NAGEL(MN)具有小鼠、血液、植物叶片和种子直接扩增PCR检测试剂盒。

   产品的整体理念为:

   1. 快速:优化的裂解液组份,应对不同类型的样本,比如小鼠毛发,植物的种子或坚硬的植物叶片等样本;同时裂解样本所需的时间最短,比如5min完成小鼠组织样本制备。

   2. 便捷:all in one形式试剂盒,包含了取样工具、裂解液、抑制剂清除剂、PCR master mix、loading 染液等。

  NO.1

  NucleoType Mouse PCR

   专为小鼠快速基因分型实验设计,适用于剪碎的鼠尾(1mm)、耳号嵌取样鼠耳(1mm Ø)、鼠血(1µL)、毛皮(比如3–30 鼠毛)。

   特点

   1. 仅5分钟完成DNA样本的准备,也可不裂解样本直接PCR反应;

   2. 包含热启动的Master mix,扩增的核酸片段可达1000bp;

   3. Loading染料包含其中,可直接进行后续的凝胶电泳。

   流程

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  NO.2

  NucleoType Blood PCR

   用于各种来源全血(EDTA、柠檬酸盐或肝素等抗凝剂处理)和血卡的血斑快速基因分析检测。

   特点

   1.仅1min完成血液样本的准备;

   2.含有新型血液转移工具,可以快速方便的将小份血液转移到PCR mix里面;

   3.内含的Inhibitor Removal Pearl,应对难处理的血液样本;

   4.包含热启动的Master mix,扩增的核酸片段可达1000bp;

   5. Loading 染料包含其中,可直接进行后续的凝胶电泳。

   流程

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  NO.3

  NucleoType Plant PCR

   适用于植物叶片快速简单基因分型分析。

   特点:

   1.仅1分钟完成植物叶片样本的准备;

   2.包含了ZL的植物样本取样工具Plant Transfer Tool(PTT);

   3.PTT上面附有的特殊涂层可以让植物材料中存在的PCR抑制剂在相当长的一段时间内失活;

   4.样本转移到PCR mix之后,可以在4℃到37℃环境下存放2h,然后进行PCR循环反应;

   5.包含热启动的Master mix,扩增的核酸片段可达1000bp;

   6.Loading 染料包含其中,可直接进行后续的凝胶电泳。

  流程

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  NO.4

  NucleoType Seed PCR

   用于植物种子或坚硬的植物材料快速基因分型实验。

   特点

   1.仅5分钟完成种子样本的准备;

   2.包含热启动的Master mix,扩增的核酸片段可达2000bp;

   3.Loading 染料包含其中,可直接进行后续的凝胶电泳;

   4.适用于坚硬的植物材料比如大豆、小麦、玉米、水稻等植物种子或苔藓、蕨叶、枞叶等样本。

   流程

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