qpcr加完样可以放4°冰箱吗

qpcr加完样可以放4°冰箱。qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度一般在80-150bp之间，所以只需要变性和退火就可以了。

一般来讲，进行qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。

制度须知

通常来讲，10微升反应体系的10nM引物浓度加0.2微升左右就可以模板如果是总RNA一般是10ng-500ng，如果是cDNA，通常情况下是1微升或者1微升的10倍稀释液。

要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值，在操作过程中，还需要根据所用MasterMix、模板和引物的不同进行优化，以达到一个最佳反应体系。