GPR15是一种大肠炎症反应过程中T细胞向肠道迁移的受体

T细胞的激活与分化是在各淋巴结中发生的,因而激活后的T细胞需要经过特定的引导才能来到组织间隙行使功能。之前的研究已经证实T细胞表面表达一类趋化因子受体,它们在相应配体的刺激下迁移到组织附近,并通过T细胞表面与表皮细胞表面的粘附分子相互作用使其稳定。肠道是一个微生物高度富集的区域,因此也是高度"炎症化"的组织。小肠附近始终存在大量的T淋巴细胞,然而对引导这些细胞的趋化因子及配体的研究仍不清楚。 GPR15是一个"孤儿受体"(即其配体不清楚),同时也是HIV(免疫缺陷病毒)的一个辅助性受体。它的结构与已知的趋化因子受体十分相似。最近斯坦福大学医学院Aida Habtezion课题组在《自然:免疫学》杂志发表了它们关于GPR15在小鼠与人T淋巴细胞中的表达特征以及其在肠炎过程中引导T细胞向大肠组织迁移的相关研究。 作者首先利用GPR15-GFP转基因小鼠作为研究对象,分析了不同组织T细胞中GPR15的表达情况。结果显示:GPR......阅读全文

小鼠βactin基因的克隆表达(4)

实验步骤:(1)诱导靶蛋白表达分别挑取对照菌和重组菌1~2个菌落,接入5ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养过夜。取5ml过夜培养物接入500ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养2h以上,至对数中期(A550=0.5~1.0)。向诱导管中加入IPTG使其浓

小鼠βactin基因的克隆表达(1)

动物组织RNA的提取实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA

小鼠βactin基因的克隆表达(3)

(2)质粒的提取及酶切鉴定分析   质粒的提取按照质粒提取试剂盒的操作步骤进行,然后进行双酶切鉴定。   管号 ① ② 质粒DNA

小鼠βactin基因的克隆表达(2)

实验步骤:   (1)目的基因与表达载体的连接反应: ①表达载体和目的片段的酶切   管号 ① ② pGEX 4T-1

揭示新小鼠巨细胞病毒转录激活因子病毒晚期蛋白表达

 2020年1月2日,病毒学期刊Journal of Virology 在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所钱志康课题组的最新研究“Murine Cytomegalovirus Protein pM49 Interacts with pM95 and Is Critical for Vira

PNAS:小鼠模型需慎用,基因表达差异大

PNAS:小鼠模型需慎用,基因表达差异大  小鼠被广泛用于模拟人类代谢、疾病和药物应答,是医学研究中的一个基本工具。然而斯坦福大学的研究团队指出,人类和小鼠的基因表达存在着惊人的差异,不论是蛋白编码基因还是非编码基因。这项研究发表在十一月十七日的美国国家科学院院刊PNAS杂志上。  Mic

小鼠细胞鉴定

STR分型已作为成熟的金标方法用于人源细胞株鉴定,但在小鼠源细胞株鉴定方面,国内则缺乏相关STR鉴定试剂盒;而像IJC等外文期刊已经有条件的要求作者对小鼠源细胞进行鉴定。为满足各位老师对小鼠源细胞株鉴定的迫切需求,苏州鉴达自行研发18位点小鼠源细胞株鉴定试剂盒,正式开启小鼠源细胞株STR鉴定服务。经

CHO细胞表达系统与酵母细胞表达系统比较

 CHO细胞表达系统与毕赤酵母表达系统是当前发展前景看好的两个表达系统,为了能够更加直观地对两个表达系统有一定的认识,特意在此篇中对两个表达系统作一定的比较,从而能够更进一步的对两个表达系统有更深的了解1.CHO细胞表达系统       (1)优点       CHO细胞属于成纤维细胞,既可以贴壁生

从小鼠脾脏分离小鼠天然杀伤细胞

实验步骤 基本方案 12.为 检 验 细 胞 纯 度 ,可 加 入 终 浓 度 为 lOug/ml 的 抗 C D 3- F I T C 和 P K 136-PE (抗N K 1. 1 ) 抗体,进 行 流 式 分 析(第四章)。 展

真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体

原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统,由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷,人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今

小鼠feeder细胞分离

You will need:13.5 day pregnant mouse (we use MTK NEO inbred white mice)2 sets sterile instrumentsone containing a pair of curved forceps and a pair o

无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音

   1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。    到80年代中期Sp

无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音

1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。到80年代中期Spirin等对其进

嗅鞘细胞的细胞表达介绍

  OECs表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP),在血管壁形成终足,以及参与形成胶质界膜,此界膜大致勾勒出了嗅神经轴突与嗅球颗粒层嗅小球的交界线,OECs在免疫细胞化学超微结构特征以及与轴突的功能联系方面与星形胶质细胞存在明显不同。OECs对神经生长因子受体(P75NGR)Laminin细胞粘附分子L1

真核细胞表达系统1

自上世纪70年代基因工程技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今日已取得令人瞩目的成就 。随着人类基因组计划的完成,越来越多的基因被发现,其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基

真核细胞表达系统3

由于腺病毒易于培养、纯化,宿主范围广,故采用该类病毒构建的载体被广泛应用腺病毒载体的构建依赖于腺病毒穿梭质粒和包装载体之间的同源重组。但是哺乳动物细胞内的这种同源重组效率很低,利用细菌内同源重组法构建重组体效率会大大提高,即将外源基因插入到腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒,将其线性化后与腺病毒包装质粒

真核细胞表达系统2

在病毒感染晚期,由于大量外源蛋白的表达引起昆虫细胞的裂解,胞质内的物质释放出来,与 目的蛋白混在一起,从而使蛋白的纯化工作变得很困难,另外水解酶的释放会降解重组蛋白。为了克服以上这些困难,科学工作者先后尝试用丝蛾肌动蛋白基因启动子或杆状病毒ie-1基因启动子表达外源蛋白,但效果都不明显。Farr

小鼠纤维肉瘤细胞-WEHI-164细胞

小鼠纤维肉瘤细胞 WEHI 164细胞  在艾滋病(AIDS)面前,啮齿动物似乎比人类更为强大。大鼠和小鼠对人体免疫缺损病毒(HIV)具有天生的抵抗能力——这一情况也导致研究人员寻找一种AIDS小型动物模型的夙愿一直无法实现。然而科学家zui近发现,一种经过基因改造的小鼠很容易感染HIV,这就为AI

小鼠巨噬细胞的活化

巨噬细胞的活化经历两个阶段:致敏阶段和激活阶段。活化巨噬细胞的方案多采用一 步 法 (致敏并且激活),本方案则明确区分巨噬细胞活化的这两个阶段。经过一段时间 诱 导 后 (48〜72h) ,可 检 测 巨 噬 细 胞 对 病 原 体 (如寄生虫或细菌;单 元 6. 5 和 6. 6)的杀伤作用或所合

小鼠巨噬细胞的分离

基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠,洁 净 环 境 中 饲 养(最好置层流柜中饲养)7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤(Brewerthioglycollate medium,分离炎性腹腔巨嗤细胞用)7

小鼠巨噬细胞的活化

基本方案 小鼠巨噬细胞的活化材料小鼠巨噬细胞,静 息 状 态(单 元 6.1)D M E M - 10 : 含 1 0 % (V /V ) FBS (HyCloxie) 和 50 ug/1111 硫酸庆大霉素的 D M E M培 养 基(G I B C O /B R L )辅助方案炎性小鼠巨噬细胞的

提高SIRT6基因表达,能够延长小鼠模型30%寿命

  生老病死是自然规律,人总会不可避免地衰老,并伴随着健康状况下降、能量稳态下降、脆弱性增加。众所周知,人类整个生命过程中,染色体末端的端粒会随着细胞分裂而不断缩短,就像是生命的一个时钟,当端粒缩短到一定程度,生命也就随之停止。  就在几天前,Nature Communications 期刊发表了一

造血干细胞的表达

荧光标记单参数检测造血干细胞(CD34-FITC) 荧光标记双参数检测造血干细胞 荧光标记三参数检测造血干细胞(ProCOUNT法)             实验步骤

造血干细胞的表达

荧光标记单参数检测造血干细胞(CD34-FITC) 荧光标记双参数检测造血干细胞 荧光标记三参数检测造血干细胞(ProCOUNT法)             实验步骤

造血干细胞的表达

荧光标记单参数检测造血干细胞(CD34-FITC)实验步骤展开荧光标记双参数检测造血干细胞实验步骤展开荧光标记三参数检测造血干细胞(ProCOUNT法)实验步骤展开

体内无细胞DNA的表达

对于一些由缺乏三种特定蛋白质的基因突变引起的疾病(如Leber先天性黑蒙和血友病),直接的想法是将能够表达相关蛋白质的基因“播种”到体内,而不是“种”到基因组中,但在细胞质中自由表达。最典型的例子是几种批准的病毒转染基因疗法(如FDA批准的用于治疗遗传性眼病的基因药物“Luxturna”)。这种方法

无细胞蛋白表达技术介绍

无细胞蛋白表达技术是指用含有蛋白合成必需的组分(核糖体,转运RNA,氨酰合成酶,启动/延伸/终止因子,三磷酸鸟苷,ATP,Mg2+和K+)的细胞裂解物在体外进行蛋白合成。与传统的基于细菌或真核细胞的蛋白表达系统相比较,无细胞蛋白表达系统具有独特的优势,包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的

CHO细胞表达体系及其特点

子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中,最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功的一类细胞。本文就 CHO细胞表达系统在疫苗研制中的应用做一综述。C

细胞小鼠骨髓性白血病细胞

细胞小鼠骨髓性白血病细胞  1) 来源:传秋生物细胞库2) 形态:悬浮 淋巴母细胞样3) 含量:>1x106 个/mL4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装6) 运输:顺丰发货培养条件:培养基:1640+10%fbs+62 ng/ml M-CSF+0.

小鼠细胞-细胞生理活动的实验观察

小鼠细胞  细胞生理活动的实验观察【实验目的】 通过制片与观察加深理解细胞的运动、吞噬等生理活动。 【实验用品】 一、材料和标本 雄性蟾蜍、小白鼠、l%鸡血悬液、6%淀粉肉汤、草履虫。 二、器材和仪器 光镜、2ml注射器、载玻片、盖玻片、解剖器材、滴管、移液管、试管、玻璃片、黑纸。 三、试剂 0.3