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蛋白质双向电泳过程与体会

双向电泳IEF (sigma)IEF(not IPG)/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下,适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的. IEF用Biorad的圆盘电泳槽(不行用国产的吧,不推荐),SDS-PAGE用六一厂的就可以了(ft,六一厂应该给我money吧,给你做广告了)(money不是很多的强烈推荐六一的,买进口电泳槽的钱留出来测搞出的差异蛋白质的序列吧,呵呵) BIO-RAD 的圆盘电泳槽,国产的不推荐,因为 上槽 Biorad 的铂金丝凹进去了一点,不是很进去,而国产的凹得太进去了以至于电聚焦时产生的气泡绕在铂金丝一圈,影响电聚焦.双向电泳1.蛋白质样品制备 秧苗蛋白质样品的提取按Davermal 等(1986)的方法进行.100mg 材料剪碎后加入10mgPVP-40(聚乙烯......阅读全文

蛋白质双向电泳过程与体会

蛋白质双向电泳过程与体会 双向电泳IEF (sigma) IEF(not IPG)/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下,适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的,嘻嘻! IEF用Biorad的圆盘电泳槽(不行用国产的吧,不推荐),SDS-PAGE用六一厂的就可以了(ft,六一厂应

蛋白质双向电泳过程与体会

    双向电泳IEF (sigma)IEF(not IPG)/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下,适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的.    IEF用Biorad的圆盘电泳槽(不行用国产的吧,不推荐),SDS-PAGE用六一厂的就可以了(ft,六一厂应该给我money吧,

蛋白质双向电泳(two-dimensional electrophoresis)过程与体会-3

二、一向电泳(13cm的holder) (1)取大约70-100ng的蛋白与溶胀液混合总体积达到250vl (2)将上述溶液加到holder 的两个电极之间。 (3)去掉胶条的保护膜,胶面朝下,先将胶条尖端朝胶条槽的尖端方向放入胶条槽中,慢慢下压胶条,并前后移动,避免生成气泡,最后放下胶条平

蛋白质双向电泳(two-dimensional electrophoresis)过程与体会-1

双向电泳IEF (sigma)IEF(not IPG)/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下,适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的,嘻嘻!IEF用Biorad的圆盘电泳槽(不行用国产的吧,不推荐),SDS-PAGE用六一厂的就可以了(ft,六一厂应该给我money吧,给你做广告

蛋白质双向电泳(two-dimensional electrophoresis)过程与体会-2

2.3.2 第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)选用DYY-Ⅲ型(北京六一仪器厂生产)电泳槽(规格为200×200×1mm),分离胶浓度为12%,无浓缩胶。待胶聚合后,将电聚焦后已经平衡的胶条平放于浓缩胶顶端(避免胶条拉直),并用1%琼脂糖(电极缓冲液配制)封胶,特别应注意避免胶条与

双向电泳的实验过程

实验原理2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离,第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同,而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。主要试剂1. BSA2. Bradford液3. DTT 4. 0.05% 的溴酚兰 5. IPG buffe

双向电泳的实验过程

一、        实验原理:2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离,第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同,而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。二、        实验步骤:1. 样品的溶解取纯化后的晶体蛋白3.0mg,加入300u

双向电泳的实验过程

实验概要本实验介绍了双向电泳的详细实验过程。实验原理2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离,第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同,而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。主要试剂1. BSA2. Bradford液3. DTT4. 0.

蛋白质技术——双向电泳

实验概要蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心.  双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1000个E.coli蛋白,并表明蛋白质谱不是稳定的,而是随环境而变化.  双向电泳原理简明,第一向进行等电聚焦,蛋白质沿pH梯度分离,至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行分子

蛋白质的双向电泳实验

实验方法原理 蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦( Isoelect rofocusing ,IEF) , 根据蛋白质的等电点不同进行分离; 第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE ) , 按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后, 可以得到蛋白质分子的等电点