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影响ELISA试验效果常见问题原因分析及解决办法

ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。在此,我们将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结如下: 操作注意问题解决方案加样1、血清或血浆标本分离不好即进行加样 2、手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵育箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时) 3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外1、标本为血清,最好将血液先自然存放1-2h后,再用3000rmp离心15分钟,标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要储存,则置于-20℃的低温冰箱中2、加样后及时放入孵箱3、加酶试剂后用吸水纸在酶标版表面轻拭吸干4、如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理......阅读全文

免疫学检验中的酶免疫技术

 目前,免疫学检验中的标记技术主要包括酶免疫技术、荧光免疫技术、放射免疫技术、金免疫技术、化学发光免疫技术等。其中酶免疫技术是以酶标记的抗体(抗原)作为主要试剂,将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。作为经典的三大标记技术之一,酶免疫技术在检验医学中得到广

酶免疫分析技术进展与自动化

郝繁运   综述 中国误诊学杂志  2007年 第一期  第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编 摘要:本文主要介绍了酶免疫分析的发展现状,从酶免疫分析标记技术若干环节的技术进步、在方法学上与现代化技术的融合与发展、酶免疫分析技

酶联免疫法在食品检测中的应用发展探讨

  摘要:文章通过分析酶联免疫法的检测原理,并对酶联免疫法在食品检测中的具体应用发展进行探讨分析,主要阐述了酶联免疫法在检测食品中的病原微生物、毒素、农药残留情况、动物源性食品中的兽药残留以及转基因食品等方面的应用。   随着我国食品安全问题日趋严重,食品安全检测也越来越受到重视酶联免疫法

酶联免疫法在农药残留检测中的应用

  摘 要:酶联免疫法(ELISA)是以酶标记抗体或抗原为主要试剂的一种标记免疫分析技术,其结合了抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用,具有灵敏度高、特异性强、准确性好、检测成本低、迅速等优点,该方法近年来被广泛应用于食品安全中农药残留的检测。   古语有云:“民以食为天”,随着人们

酶联免疫检测技术的应用现状和发展前景

酶联免疫检测技术的应用 真菌毒素的检测:黄曲霉毒素 B 1 、 M 1 以及 T-2 毒素,脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素 DON ),二乙酰草镰刀菌烯醇( DAS ),玉米赤霉烯酮,赫曲霉毒素 A ( OA )。 农药的检测:主要有除草剂与杀虫剂两大类,例如杀暝松( FN )、甲

酶学技术在食品加工与食品质量检测中的运用

  在人类社会发展的历史中,食品加工工艺的不断改进,对于人类体力和智力的发展起到了重要的作用。从面包、奶酪、酒类、酱类等古老的食品可以看出,人类对酶的应用几乎同人类文明史一样古老。当然,在19世纪后期微生物学、生物化学,尤其是酶学诞生之前,人类所利用的酶学技术在很大程度上依赖于实践经验及朴素总结。人

酶技术在食品加工与食品质量检测中的应用

  在人类社会发展的历史中,食品加工工艺的不断改进,对于人类体力和智力的发展起到了重要的作用。从面包、奶酪、酒类、酱类等古老的食品可以看出,人类对酶的应用几乎同人类文明史一样古老。当然,在19世纪后期微生物学、生物化学,尤其是酶学诞生之前,人类所利用的酶学技术在很大程度上依赖于实践经验及朴素总结。人

酶联免疫吸附法在食品检验中的应用

  摘要:酶联免疫吸附技术(ELISA)是将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合的一种免疫分析方法,具有操作简便、快速、有效、特异性强等特点,能批量检测食品中的药物残留、病原微生物以及转基因食品等。本文主要阐述了酶联免疫吸附法在食品安全检测中的应用。   食品安全问题是全球关注

ELISA实验所用试剂详解

在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制

ELISA试剂盒进口大鼠实验的技术流程

ELISA试剂盒进口大鼠的技术流程是在抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶符号的基础上。在实验室运用的对比老练,是全世界科研人士较为认可的查看方法。针对不一样工作的需求,不断完善、更新其技术和方法。在从前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质,如受体、细胞因子以及酶等均可运用酶联免疫测定技术来测定

方兴未艾的IVD黄金细分化学发光行业深度报告

  此报告详细描述化学发光行业整体情况,分析竞争格局,指出进口替代是行业发展方向。把国产和进口产品进行对比,对进口替代中行业的痛点进行阐述。在成文过程中,调研多家医院,检测终端及经销商,对一手数据进行分析,得出较切实的结论。   1、化学发光是IVD行业的黄金细分领域  1.1 体外诊断潜力大,发光

艾滋病抗体(HIV)筛查方法的选择

作者:甘肃省康县疾控中心实验室  贾世生艾滋病又称获得性免疫缺陷综合征(AIDS),是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起,主要经性接触、血液及母婴传播的慢性传染病,具有传播速度快、发病缓慢、病死率高、不易发现等的特点,我国自1985年报道首例艾滋病病例以来,在30年的时间里,艾滋病流行经历了

辨别ELISA试剂盒价格的制备方法

LISA试剂盒价格在国内有许多种叫法:例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。ELISA试剂盒包括以下步骤:1)抗原表位的计算机筛选;2)抗原的制备;3)

ELISA的试剂-2

3.1.3  包被用抗原   用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等,须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取,一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取,蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中

荧光显微镜滤光片系统的组成

    显微镜:荧光显微镜与普通显微镜一样均由光学系统(物镜和目镜)和镜架机械装置组成。但是,荧光显微镜中的物镜最好用消色差物镜,因其自身荧光极微且透光性能(波长范围)适合于荧光。由于图像在显微视野中的荧光亮度与物镜数值孔径的平方成正比,而与其放大倍数成反比,所以,为提高荧光图像

酶联免疫吸附实验(ELISA)

一、实验目的:酶联免疫吸附试验是免疫酶技术的一种,免疫酶技术属于三大标记技术之一,掌握该试验的原理和主要技术,了解三大标记技术的异同及各自的主要应用。 二、实验原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)是应用酶标记的抗体(或抗原)在固相支持物表面检测未知抗原(或抗体)的方法。酶与抗体(或抗原)交联后,

酶联免疫吸附试验(ELISA)

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后

免疫学测定技术的应用与研究进展

现代免疫学测定技术源于标记技术的发展。继1941年Coons等创立荧光素标记抗体技术(f1uorescent antibody technique)以来,上个世纪50年代末60年代初,Yalow等创立了放射免疫分析(radioimmunoassay, RIA)技术,1966年由美国和法国学者又同时报

ELISA中的试剂(2)-结合物

3.2  结合物 结合物即酶标记的抗体(或抗原),是ELISA中最关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性,也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。结合物中酶与抗体(或抗原)之间有恰当的分子比例,在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的(未结合的)酶或游离的抗体(或抗原)。此外,结合物尚要

ELISA中的抗原与抗体的反应

抗体的结构抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为 IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两

什么是甲肝抗体检测?

什么是甲肝抗体检测?甲肝抗体检测,是明确诊断受检者是否患上甲型肝炎的检查手段。甲肝抗体检测方法主要有放射免疫分析法(RIA)和酶联免疫吸附法(ELISA),临床上多用酶联免疫吸附法(ELISA)查抗。甲型肝炎是甲肝病毒造成的一种肝脏疾病,病毒因未受感染者(或未接种疫苗者)摄入由甲肝病毒感染者的粪便污

实验室酶联免疫技术的质量控制(升级版)

简述:由于酶联免疫(ELISA)技术具有简便、快速、经济等特点而被广泛应用于各行业。尽管如此,在应用过程中仍然存在着许多难点,必须严格控制才能保证检测的质量。酶联免疫试剂盒质量保证是一个复杂的过程,许多重要的环节都影响到检测的质量。实验室酶联免疫技术的质量控制(升级版):1. 测定模式的影响&nbs

现代检测技术在食品安全检测中的应用

  摘要:指出了随着人们生活水平的提高,食品安全越来越受到大家的重视。论述了目前食品安全检测中常用的几种现代检测技术,主要有实时荧光定量PCR技术、核酸探针技术、酶联免疫吸附技术(ELISA)和高效液相色谱-质谱连用技术(HPLC-MS)和近红外光谱技术在食品安全检测的应用及研究进展。  

常见的免疫检测技术!

  (一)皮内试验 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原体刺激后,体内产生亲细胞性抗体(IgE和IgG4)。当其与相应抗原结合后,肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒,释放生物活性物质,引起注射抗原的局部皮肤出现皮丘及红晕,以此便可判断体内是否某有种特异性抗体存在。   (二)免疫

临床检验中化学发光免疫分析的应用

  化学发光是一种常见的科学现象,利用化学发光现象可以进行免疫分析检验,这种技术在近年来得到了越来越广泛的推广。在此之前,临床上主要采用免疫酶技术、免疫荧光技术以及放射免疫技术等进行临床检验,这几种检验方法各有优缺点,在临床应用上均存在一定的缺陷。而随着化学发光免疫分析技术的不断发展,其在临床检验中

重点农业检测技术(二)

(2)常规化分析法采用常规化学分析方法也可开展农药残留检测。这类方法不需要特殊的分析仪器、操作简单、费用少,但准确性和精确度低,灵敏度差,因此较适用于大样本的筛查、定性分析或粗略定量测定。①分光光度法根据物质对光的吸收特征和吸收强度,对物质进行定性和定量分析。只适用于一些能在某些条件下产生或转变成有

酶标记抗体

酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(

免疫球蛋白标记技术

酶标记抗体 荧光素标记抗体技术 125I标记单克隆抗体技术             实验方法原理 酶标

生物技术在食品检测中的应用研究

  摘 要:当代社会人类对食品安全的关注度越来越高,相应的食品检测技术也得到不断改善。其中生物技术挥了重要的作用,PCR技术、酶联免疫吸附技术(ELISA)、PCR-免疫技术(PCR-ELISA)、免疫亲合色谱(IAC)、生物芯片(Biochips) 等技术以各自的优点,被广泛地运用于食品检测领域。

略谈生物技术在食品检测中的应用

  摘要:当代社会人类对食品安全的关注度越来越高,相应的食品检测技术也得到改善。其中生物技术也挥了重要的作用,PCR技术、酶联免疫吸附技术(ELISA)、PCR-免疫技术(PCR-ELISA)、免疫亲合色谱(IAC)、生物芯片(Biochips)等技术以各自的优点,被广泛地运用于食品检测领域。&nb