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葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用

实验步骤1. 克隆胚胎制备和胚胎培养卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作为工作液,卵母细胞在此液中被去掉纺锤体-染色体复合体;用卵丘细胞作为核供体。用注射针反复吸入、吹出卵丘细胞,以除去其细胞膜和大部分细胞质,然后用注射针将裸卵的核注入去除纺锤体-染色体复合体的卵母细胞中。孤雌胚胎所用的卵母细胞与用于制备核移植胚胎的卵母细胞来源相同。孤雌胚胎和核移植胚胎用不含Ca2 、却含10mM Sr2 和细胞松弛素B的CZB培养液进行激活。所有步骤中都不使用二甲基亚砜,以避免其对克隆胚胎造成的不受控制的影响。单细胞正常受精胚胎是通过超排的(B6D2)F1雌鼠和(B6D2)F1雄鼠交配获得的。所有胚胎用Whitten 培养液(MW)培养。之所以选择此培养液是因为利用(B6D2)F1小鼠卵母细胞制备的受精......阅读全文

葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用

实验步骤 1. 克隆胚胎制备和胚胎培养 卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作为工作液,卵母细胞在此液中被去掉纺锤体-染色体复合体;用卵丘细胞作为核供体。用注射针反复吸入、吹出卵丘细

葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用

实验概要为了研究葡萄糖对克隆胚胎早期发育的影响,本实验检测了克隆胚胎与对照组胚胎中葡萄糖的代谢及相关代谢情况,也检测了线粒体的超微结构、分布和数量。实验步骤1. 克隆胚胎制备和胚胎培养卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HE

葡萄糖在小鼠克隆胚胎发育中的作用

实验步骤1. 克隆胚胎制备和胚胎培养卵母细胞在含有5.5mM葡萄糖的CZB培养液中培养。用含有5.5mM葡萄糖和2.5ug/ml 细胞松弛素B的HEPES-CZB液(HCZB)作为工作液,卵母细胞在此液中被去掉纺锤体-染色体复合体;用卵丘细胞作为核供体。用注射针反复吸入、吹出卵丘细胞,以除去其细

制滴菌素A对小鼠克隆胚胎的染色体重建

实验概要 体细胞移植胚胎制备完成后,若用制滴菌素A(TSA)处理一下,其胚胎制备效率会显著增加。本次试验中以小鼠早期SCNT胚胎为研究对象,检测了TSA在体细胞核重编程方面的影响;检测方面包括:染色体重排、组蛋白修饰、DNA复制和转录活性恢复。 实验步骤 1. 卵母细胞收集 B6D2F1雌

分离小鼠胚胎实验

            实验方法原理 胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神经演变为纵贯胚体的神经管。神经管和神经

分离小鼠胚胎实验

分离小鼠胚胎可以用于:(1)体外培养小鼠胚胎,摸索适宜培养条件。(2)使用胚胎进行发育生物学研究。实验方法原理胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神

分离小鼠胚胎实验

实验方法原理 无菌条件下切除孕鼠(已知怀孕时间)子宫,分离胚胎。实验材料 DBSS试剂、试剂盒 70%乙醇仪器、耗材 培养皿尖镊子尖剪刀超净工作台本生灯实验步骤 1. 交配。将分笼的雄鼠和雌鼠合笼进行交配,雌鼠 3 天后可进入动情期,此时交配的成功率最高。这一过程可以有计划地进行,使胚胎在适宜的时间

美成功克隆猴子胚胎 人体克隆可能性增大

美国科学家新近取得的一种技术突破可帮助利用成年猴子克隆胚胎,预示着克隆人类胚胎终于有可能成为现实。这种新技术承诺将革命性地提高科学家把人类卵子转化为克隆胚胎的效率,同时也引发新一轮关于克隆人伦理的讨论。  据悉,被克隆的是一只10岁的雄性恒河猴。(华盖图) 基于新的卵子处理方法 这是科学家首次

小鼠胚胎干细胞的培养

实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐

小鼠胚胎干细胞的培养

完全培养基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巯基乙醇(GIBCO 21985); 1