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第一节 免疫细胞的分离 一、外周血单个核细胞的分离 将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合，其比重为1.077±0.002，可作为常规的淋巴细胞分离液，即Ficoll分离液。 主要用于分离外周血中单个核细胞，是一种单次密度梯度离心分离法，其分布由上到下依次为：稀释的血浆层、单个核细胞层、粒细胞层和红细胞层。 二、淋巴细胞的分离 纯淋巴细胞群的采集是利用单核细胞在37℃和Ca2＋存在时，能主动黏附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性，从单个核细胞悬液中除去单核细胞，从而获得纯淋巴细胞群。 1.黏附贴壁法 2.吸附柱过滤法 3.磁铁吸引法 4.Percoll分离液法 三、T细胞和B细胞的分离 1.E花环沉降法 2.尼龙毛柱分离法 四、T细胞亚群的分离 1.亲和板结合分离法 2.磁性微球分离法 3.荧光激活细胞分离仪分离法 五、分离细胞的保存 1.短期保存技......阅读全文
淋巴细胞主要分T淋巴细胞和B淋巴细胞两大亚群，它们具有不同的特性和功能，为此在进行某些免疫学实验时，首先需分离出纯的T淋巴细胞和B淋巴细胞。本试验的原理为：淋巴细胞与用溴花二氨基异硫氢化物（简称AET）处理的绵羊红细胞（SRBC）混合后，其中全部T淋巴细胞均能吸附AET—SRBC，形成牢固稳定而巨大
实验概要淋巴细胞主要分T淋巴细胞和B淋巴细胞两大亚群，它们具有不同的特性和功能，为此在进行某些免疫学实验时，首先需分离出纯的T淋巴细胞和B淋巴细胞。本实验介绍了T、B淋巴细胞分离试验的操作步骤。实验原理本试验的原理为：淋巴细胞与用溴花二氨基异硫氢化物(简称AET)处理的绵羊红细胞(SRBC)混合后，
淋巴细胞主要分T淋巴细胞和B淋巴细胞两大亚群，它们具有不同的特性和功能，用于（1）免疫学研究（2）淋巴细胞的鉴定。实验方法原理淋巴细胞与用溴花二氨基异硫氢化物（简称AET）处理的绵羊红细胞（SRBC）混合后，其中全部T淋巴细胞均能吸附AET-SRBC，形成牢固稳定而巨大的E-花环，较正常未处理的SR
中科院“百人计划”，国家杰出青年基金获得者许琛琦研究员主要从事淋巴细胞与疾病等领域的研究，今年其研究组在Nature杂志上发文，通过调节T淋巴细胞胆固醇代谢可以提高细胞膜胆固醇水平，从而促进T淋巴细胞对肿瘤的杀伤，由此发展了一种新的肿瘤免疫治疗方法。同时近期许琛琦研究员也受邀在Nature Re
实验概要淋巴细胞的分离方法是免疫学研究的重要技术，稳定、高效地分离出高纯度且活性不受影响的T淋巴细胞是进行一系列免疫学研究的前提与基础，进而能够在体外对机体各种免疫细胞分别作鉴定、计数或功能测定。实验原理混合的单核细胞悬液在通过尼龙毛柱时，B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上
淋巴细胞增殖法对于（1）免疫学的研究（2）淋巴细胞的T细胞，吞噬细胞等的功能研究。实验方法原理淋巴细胞在体外经某种物质刺激，细胞代谢和形态相继变化，在24——48h细胞内蛋白质和核酸的合成增加，产生一系列增殖的变化，如细胞变化、细胞浆扩大、出现空泡、核仁明显、核染色质疏松等，由淋巴细胞转变为淋巴母细
（4)致有丝分裂原受体：致有丝分裂原（mitohen)是指能刺激细胞发生有丝分裂的物质。在免疫学中，主要是指刺激多克隆淋巴细胞增殖的物质。不同的致有丝分裂原对T细胞和B细胞有作用有很大差别。常用的诱导T细胞发生增殖的致有丝分裂原有刀豆素A（concanavalinA,ConA),植物血
一、流式细胞仪的检测范围1．流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2．流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式细胞仪
一、流式细胞仪的检测范围1．流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA含量、蛋白质含量。2．流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式细胞仪的
2017年7月31日，清华大学生命学院刘万里研究组在《eLife》期刊在线发表了名为《蛋白激酶Cβ（PKCβ）和黏着斑激酶协同调控B淋巴细胞的免疫活化对呈递抗原的基质硬度的敏感性》（Substrate stiffness governs the initiation of B cell acti
Edit By Waiting.D细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。（1）平底和圆底（U型和V
作者：刘亦芬 高斌 刘琏单位：刘亦芬（100091 北京, 中国中医研究院西苑医院检验科）；高斌（合肥市第一人民医院）；刘琏（安徽医科大学微生物教研室）关键词：肾综合征出血热；中性粒细胞；淋巴细胞；Hantaan病毒 【 摘要 】 目的 研究肾综合征出血热（HFRS）患者的淋巴细胞和中性粒细胞免疫
B淋巴细胞作为抗体免疫应答过程中的重要参与者，维系着人类的健康，B细胞的免疫活化进程在其质膜表面的B细胞受体（BCR）识别外来病原体抗原后启动。该研究组的前期工作揭示B细胞利用BCR来精确地识别抗原的理化性状。其中，表达IgM-BCR的初始型B细胞的免疫活化对机械力信号敏感，呈现低、中、高的阶
信号转导是目前分子免疫学中研究的热点。免疫学中所涉及的信号转导主要包括淋巴细胞的信号转导以及细胞因子/细胞因子受体的信号转导，其研究手段多种多样，包括细胞生物学、分子生物学以及蛋白质化学等技术。本节将扼要介绍目前信号转导研究中常用的方法和技术。 一、磷酸化的信号转导分子的鉴定 在淋
来自清华大学生命学院和免疫学研究所，北京大学人民医院的研究人员发表了题为“An autoimmune disease variant of IgG1 modulates B-cell activation and differentiation”的文章，首次报道人类膜联免疫球蛋白IgG1重链胞内
这项研究报道了B淋巴细胞活化过程中，免疫突触内产生牵引力的详细特征和相关机制。 2018年8月8日，清华大学生命学院刘万里研究组在《Science Signaling》期刊在线发表了名为《B淋巴细胞活化过程中牵引力的起源、动态特征和功能》
收集浑浊带分离获得的淋巴细胞，用无钙、镁离子的PBS洗3次后，再用培养基洗1次后计数，分瓶培养。此法分离获得淋巴细胞纯度高。分离液的制备：9% Ficoll（20℃下相对密度约1.020）24份与33.4%泛影葡胺（用泛影钠或Conray400也可，在20℃下相对密度约1.200）10份混合后，
上世纪60年代，世界免疫学界形成了两个水火不容的阵营，只有对抗，没有团结可言了。当时免疫学亟待解决的核心问题是，脊椎动物究竟通过何种方式为每一种病原体量身定制特异性的防御机制，而且这种特异性防御的多样性几乎没有上限。 1963年，年轻的科学家麦克斯•戴尔•库珀加入了明尼苏达大学的罗伯特•古德的
近年来，中小型个人型流式细胞仪以其价格低廉，操作简便，售后维护成本低等优势，越来越受到用户们的青睐。但是，由于流式最初都用于细胞生物学相关的研究，因此传统的仪器多针对哺乳动物细胞而设计，对特殊样本如细菌、病毒、纳米颗粒、血小板等体积较小的微粒，无法达到最佳的检测效果。针对这一情况，英国Apogee公
英国Apogee洞察细微的流式细胞仪
一、免疫应答的概念 抗原性物质进入机体后激发免疫细胞活化，分化和效应过程称之为免疫应答（immune response)。但对这一过程的认识是随着免疫学的发展逐步深化和建立较为完整的概念。在免疫学发展的早期，人们发现抗原性物质进入体内后可在血液中检测出抗体，而对抗原是
上世纪60年代中期，麦克斯·库珀在明尼苏达大学罗伯特·古德的实验室。图片来自：US Natl Lib. Medicine 1963年，麦克斯·戴尔·库珀（Max Dale Cooper）加入了明尼苏达大学的罗伯特·古德（Robert Good）的实验室。在当时，免疫学界有两大阵营，他们互相看不
外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验最常用的细胞，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。1．原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大，为1.092左右；淋巴细胞和单核细胞的
实验概要外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验最常用的细胞，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。本实验介绍了两种单个核细胞的分离方法。实验原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密
细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。（1）平底和圆底（U型和V型）培养板的区别和选择：贴壁细胞一
细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，形状、规格、用途多样。 你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？ 你是否正为如何方便、正确使用培养板而苦恼？ 你对如何处理培养板是否也有困惑？ 对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？ 细胞培养板的选择 1）细胞培养板依底部形状的不同可分为
一、细胞培养板细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，形状、规格、用途多样。你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？你是否正为如何方便、正确使用培养板而苦恼？你对如何处理培养板是否也有困惑？对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？二、细胞培养板的选择1）细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底
产品的保存方法与质量有着莫大的关系，有不少老师反映出在保存血清的时候会遇见“什么温度*合适”“怎样避免沉淀物出现”等等问题。而实验新手们在保存科研血清时也难免会遇见一些突发问题，那么我们要如何随机应变呢？我公司技术员特别将常见问题整理出分享给大家：1. 问：保存血清的方法是怎样的呢？ &
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养ES细胞、平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。
产品的保存方法与质量有着密不可分的关系，有不少实验人员反映出在保存血清的时候会遇见“什么温度*合适”“怎样避免沉淀物出现”等等问题。而实验新手们在保存科研血清时也难免会遇见一些突发问题，那么我们要如何处理呢？今天，我公司技术员特别将血清保存过程中遇到的常见问题解决的方法做了总结：1. 问：保存血清的