细胞周期测定实验

细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法 实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比,它是测定细胞 周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。 实验材料 细胞 试剂、试剂盒 胰酶 甲醇 培养液 ......阅读全文

细胞周期的测定

一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测

细胞周期测定实验

细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法             实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的

细胞周期测定实验

细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法             实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的

细胞周期测定实验(一)

标签: 细胞周期 体外培养 周期测定细胞周期测定可以:(1)作为生物相容性评价指标;(2)用于研究细胞凋亡;(3)作为选择细胞的依据。实验方法细胞计数法BrdU渗入法流式细胞仪测定法实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单

细胞周期该如何测定?

一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测

细胞周期测定实验(二)

一、常见问题1.  Q:要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查,但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查,请问:胃组织要怎样保存好呢?用低温保存,还是用乙醇固定?或者固定后再低温下保存? A:我做过乳腺细胞的DNA含量测定,取得组织以后,先处理成单细胞悬液,然后再加70%冰乙醇固定,要保证冰乙醇的最终

细胞周期测定的方法步骤

一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测

细胞周期测定的方法步骤

一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测

细胞周期蛋白质的细胞周期

我们可以把细胞周期人为地划分为几个时期。开始人们按照细胞所处的形态学变化将细胞划分为间期和分裂期两相,霍华德学说划分细胞周期各期则是以细胞核的遗传物质DNA的复制和分裂作为主要标界——即按时间顺序将细胞周期确定为四个期:DNA合成前期(G1期),DNA合成期(S期),DNA合成后期(G2期)和分裂期

细胞周期测定实验_细胞计数法

细胞周期测定可应用于:(1)作为生物相容性评价指标;(2)研究细胞凋亡;(3)作为选择细胞的依据。实验方法原理体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比,它是测定

细胞周期测定实验——BrdU渗入法

实验方法原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。 BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经

细胞周期1

以有丝分裂方式增殖的细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的过程。这一过程周而复始。细胞周期是50年代细胞学上重大发现之一。在这之前认为有丝分裂期是细胞增殖周期中的主要阶段,而把处于分裂间期的细胞视为细胞的静止阶段。1951 年霍华德等用32P-磷酸盐标记了蚕豆根尖细胞,通过放射自显影研究根尖

细胞周期2

G2 期  是DNA复制结束和开始有丝分裂之间的间隙,在这期间细胞合成某些蛋白质和RNA分子,为进入有丝分裂提供物质条件。 用放射标记的RNA前体和蛋白质前体示踪,表明G2 期进行着强烈的RNA和蛋白质的合成。假如破坏这些合成过程,细胞就不能过渡到M期。G2 期合成的是染色体浓缩以及形成有丝

什么是细胞周期?细胞周期时间如何确定?

细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。过程间期间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。1.G1期(first gap) 从有丝分裂到DNA复制前的一段时期,又称合成前期,

什么是细胞周期?

细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。生命是从一代向下一代传递的连续过程,因此是一个不断更新、不断从头开始的过程。细胞的生命开始于产生它的母细胞的分裂, 结束于它的子细胞的形成,或是细胞的自身死亡。通常将子细胞形成作为一次

细胞周期的概念

细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。生命是从一代向下一代传递的连续过程,因此是一个不断更新、不断从头开始的过程。细胞的生命开始于产生它的母细胞的分裂, 结束于它的子细胞的形成,或是细胞的自身死亡。通常将子细胞形成作为一次

细胞周期如何检测

碘化丙啶(propidium iodide, PI)检测凋亡细胞早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞凋亡和坏死的一个重要指标,凋亡细胞在进入最终溶解阶段前,胞膜通透性无明显改变,相对分子质量大的与DNA结合的荧光染料(如PI)不能时入凋亡细胞内,而相对分子质量小的荧光染料(如Hoechest 3

细胞周期检测方法

1. 细胞培养:取对数生长期的细胞,按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内,进行所需的处理(比如加入药物),特定时间后终止培养,进行下一步的实验。2. 细胞固定: 800rpm离心5min,收集细胞沉淀,弃上清,用预冷PBS洗涤两次,加入预冷75%乙醇,于4℃固定4

流式检测细胞周期

线粒体膜电位(MMP):使用几种染料中的其中一种就可以检测到细胞在凋亡过程中MMP的降低,如双氰基-双己氧基羰基靛蓝,它能够隐藏在活细胞的线粒体内。当MMP体系崩溃时,细胞的荧光就会减少。磷脂酰丝氨酸(PS)在细胞表面的分布情况:PS一般分布在质膜的内侧上。在细胞凋亡过程中,PS残余物会曝露在细胞表

细胞周期如何检测

碘化丙啶(propidium iodide, PI)检测凋亡细胞早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞凋亡和坏死的一个重要指标,凋亡细胞在进入最终溶解阶段前,胞膜通透性无明显改变,相对分子质量大的与DNA结合的荧光染料(如PI)不能时入凋亡细胞内,而相对分子质量小的荧光染料(如Hoechest 3

植物细胞周期观察

一、实验目的1.学会植物细胞、组织的固定、离析和压片方法,了解并初步掌握制作临时玻片和永久玻片的方法。2.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化过程,着重了解分裂期内中、后期染色体变化的特征。二、实验原理植物根尖分生组织的细胞,依一定的程序有规律地进行着有丝分裂过程,植物种类不同,细胞周期所需

细胞周期的划分

细胞周期的划分:G1期→S期→G2期→M期,以及G0期。G1期:进行细胞生长,S 期:进行DNA复制,使DNA成为相同的两份,G2期:制造蛋白质,准备细胞分裂的所需物质,M期:有丝分裂;为进行核裂(染色体分离)和质裂(细胞质分裂)的阶段。当细胞处于G0期时 就会停止细胞一切的复制分裂过程总的看来,细

什么是细胞周期?

细胞周期(英语:cell cycle),是指能持续分裂的真核细胞从一次有丝分裂结束后生长,再到下一次分裂结束的循环过程(准确来说只要有DNA复制,不管是不是有没有有丝分裂它都有细胞周期。生殖细胞无细胞周期。)。细胞周期的长短反映了细胞所处状态,这是一个细胞物质积累与细胞分裂的循环过程。癌变的细胞以及

原代细胞周期测定的原理和BrdU方法

原理: 细胞周期:细胞一世代所经历的时间从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计法等。BrdU(5溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基

细胞周期测定实验——流式细胞仪测定法

实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。 

检测DNA分析细胞周期

Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠         0.25gTriton-X 100          0.75mlPropidium iod

细胞周期的DNA检测

Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠     0.25gTriton-X 100 0.75mlPropidium iodide 0.025g核糖核

细胞周期的间期定义

间期是细胞循环中细胞生长和工作的时段,一个细胞在细胞循环90%左右的时间是在间期中。间期应注意与前期、中期、后期、末期相区分,后四者属分裂期。

brdu细胞周期实验步骤

  1、细胞生长至指数期时,向培养液中加入BrdU,使最终浓度为10μg/ml。  2、44小时加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。  3、48小时后常规消化细胞至离心管中,注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。  4、常规染色体制片(见第三部分:染色体技术)。  5、染色体玻片置56℃水浴锅盖

细胞周期蛋白的概念

中文名称细胞周期蛋白英文名称cyclin定  义一类与细胞周期功能状态密切相关的蛋白质家族,其表达水平随着细胞周期发生涨落,可通过与特定蛋白激酶结合并激活其活性,从而在细胞周期的不同阶段发挥调控作用。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)