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无细胞表达系统让研究人员能够快速生成蛋白质，从而受到人们的青睐。来自真核细胞的裂解物能够对蛋白质进行翻译后修饰，但不同翻译系统的细微差别也会导致蛋白生产的变化。无细胞表达究竟哪家强？亚利桑那州立大学的研究人员近日在《BioTechniques》上发表了他们的比较结果。 在目前的无细胞蛋白合成而言，大肠杆菌仍然是首选。不过，由于对人类和哺乳动物蛋白及其翻译后修饰的兴趣日益增加，真核系统也逐渐受到人们的欢迎。此外，对于某些技术，如mRNA展示和核酸可编程的蛋白芯片（NAPPA），研究人员倾向于使用真核表达系统来研究蛋白质互作。 在这项研究中，研究人员比较了市场上三种常用的真核无细胞表达系统：麦胚提取物（WGE，Promega）、兔网织红细胞裂解物（RRL，Promega）和HeLa细胞裂解物（HCL、赛默飞世尔）。 对于每个系统，研究人员定量了环状质粒和线性DNA所产生的萤光素酶蛋白的量。这些DNA模板的5’非翻译区（UT......阅读全文
细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导，其中热休克蛋白（热激蛋白）是细胞凋亡的调控因子之一。细胞是通过调节自身的防御系统来适应环境胁迫，并且根据胁迫程度的强弱，利用自身遗传机制或调控自身状态抵抗胁迫，或
细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导，其中热休克蛋白（热激蛋白）是细胞凋亡的调控因子之一。细胞是通过调节自身的防御系统来适应环境胁迫，并且根据胁迫程度的强弱，利用自身遗传机制或调控自身状态抵抗胁迫，或主动诱发细胞
细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导，其中热休克蛋白（热激蛋白）是细胞凋亡的调控因子之一。细胞是通过调节自身的防御系统来适应环境胁迫，并且根据胁迫程度的强弱，利用自身遗传机制或调控自身状态抵抗胁迫，或主动诱发细胞死亡
许多生物制品例如抗体，重组蛋白，疫苗等的制备还是通过生物体系细胞工程合成，尽管采用多种纯化方式，在生物药物中还会有微量的宿主蛋白残留（HCP），会对药品的安全性及药性产生影响。 一、HCP的概念 HCP：Host cell protein，宿主细胞蛋白 疫苗、抗体、重组蛋白药物
图1. 与细胞内蛋白表达相比，无细胞蛋白表达系统能够显著地节约时间。 与基于细胞的蛋白表达系统相比较，无细胞蛋白表达系统具有独特的优势，包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的总体产量。本文介绍了根据模板类型、期望产率以及下游实验等因素来选择无细胞蛋白表达系统的标
许多生物制品例如抗体，重组蛋白，疫苗等的制备还是通过生物体系细胞工程合成，尽管采用多种纯化方式，在生物药物中还会有微量的宿主蛋白残留（HCP），会对药品的安全性及药性产生影响。一、HCP的概念HCP：Host cell protein，宿主细胞蛋白疫苗、抗体、重组蛋白药物等生物制品的生产主要利用某些
在拥挤喧哗的酒吧中很难好好聊天，所以大家都选择在安静的小咖啡馆里促膝长谈。不过科学家们现在可以在复杂的细胞培养环境中，选择性倾听细胞间的“对话”。 细胞通过分泌蛋白来相互交流并对环境改变进行应答，分泌蛋白还能帮助细胞迁移。位于德国海德堡的著名欧洲分子生物学实验室EMBL与德国癌症研究中心DK
在拥挤喧哗的酒吧中很难好好聊天，所以大家都选择在安静的小咖啡馆里促膝长谈。不过科学家们现在可以在复杂的细胞培养环境中，选择性倾听细胞间的“对话”。 细胞通过分泌蛋白来相互交流并对环境改变进行应答，分泌蛋白还能帮助细胞迁移。位于德国海德堡的著名欧洲分子生物学实验室EMBL与德国癌症研
新型冠状病毒感染导致6万多人出现感染性肺炎，上千的病人丧失生命。无论是政府部门、科研团队还是普通民众，大家都在期盼抗体药物的出现，而从SARS期间直接收集痊愈患者的血清治疗重症患者的实践，直接折射出抗体对于治疗此类感染疾病的重要性。诚然，抗体是机体对抗病毒感染最重要的武器之一，针对病毒的中和性抗
一提到蛋白研究，首先跳入脑海的当然是抗体。的确，很多蛋白实验都离不开抗体。然而，即使抗体公司时不时推出新产品，但许多蛋白还是没有相应的抗体，我们只能望电脑兴叹。而且，也有很多抗体无能为力的情况，比如观察蛋白在细胞内的运输。所幸，各种各样的蛋白标签让我们能够从容应对这些挑战。 遗传标签
抗体药物是目前生物技术药物研究中最为活跃的领域，特别是在肿瘤和自身免疫性疾病等方面的临床应用，更是大放异彩。随着临床需求的增加，单克隆抗体药物发展迅速，FDA已批准的抗体药物多达70多个，抗体药物销售量年增长率基本在10%以上，大大高于制药行业平均水平，其市场规模已经达到千亿美元。 我国针对单
一直以来，科学家们在研究某个基因的功能时无非就只有两种方法，要么就是敲除这个基因，或者下调其表达量，要么就是提高其表达量。在20世纪90年代发现的RNA干扰技术又给科学家们提供了一条新的研究基因功能的途径，RNA干扰技术可以通过小RNA分子(small RNA molecule)与目标m
无细胞蛋白表达技术是指用含有蛋白合成必需的组分（核糖体，转运RNA，氨酰合成酶，启动/延伸/终止因子，三磷酸鸟苷，ATP，Mg2+和K+）的细胞裂解物在体外进行蛋白合成。与传统的基于细菌或真核细胞的蛋白表达系统相比较，无细胞蛋白表达系统具有独特的优势，包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的
蛋白质组（Proteome）的概念最先由Marc Wilkins提出，指由一个基因组，或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。 蛋白质组的概念与基因组的概念有许多差别，它随着组织、甚至环境状态的不同而改变。 在转录时，一个基因可以多种mRNA形式剪接，一个蛋白质组不是一个基因组的直接产物，蛋白质组中蛋
六、Caspase-3活性的检测 Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个
C.起源于细胞核的凋亡信号及HSP的调控 细胞核内DNA的断裂是细胞凋亡的一种生化特征，是由于特异的核酸内切酶活化后将染色质切割成较短的DNA片段。但是，DNA的损伤也可能是一个细胞凋亡级联反应的早期信号转导事件，经研究认为：当DNA发生断裂后，组蛋白H1.2转运至细胞质，通过激活Bcl-2蛋白-B
原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统，由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷，人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今
二、细胞凋亡的细胞化学测定细胞凋亡的细胞化学测定包括细胞表面（细胞膜）的结构和通透性改变的测定和细胞核DNA改变的测定。根据应用的范围，又可分为细胞群休和单个细胞测定两种，以下仅介绍其中几种较为常用的方法。碘化丙啶（propidium iodide,PI）检测早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞
12月28日，嘉和生物1类新药lerociclib片临床试验申请获CDE受理。拟开发用于治疗HR+/HER2 -转移性乳腺癌。 Lerociclib是G1 Therapeutics开发的一款潜在“best-in-class”的口服CDK 4/6（细胞周期蛋白依赖性激酶 4/6）抑制剂。今年6月
科学家们早就知道，数十种遗传性疾病（也称为毒性蛋白病），是由细胞中特定错误折叠蛋白的堆积引起的。但是，负责这种堆积的分子机制仍然是个谜，这就阻止了开发相应疗法的努力。 如今，在一项新的研究中，来自美国布罗德研究所、哈佛医学院和布莱根妇女医院的研究人员发现一些毒性蛋白病（toxic protei
科学家们早就知道，数十种遗传性疾病（也称为毒性蛋白病），是由细胞中特定错误折叠蛋白的堆积引起的。但是，负责这种堆积的分子机制仍然是个谜，这就阻止了开发相应疗法的努力。 如今，在一项新的研究中，来自美国布罗德研究所、哈佛医学院和布莱根妇女医院的研究人员发现一些毒性蛋白病（toxic protei
微生物琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)ELISA试剂盒固体样本的收集 1、组织标本：切割标本后，称取 1g 组织，加入 9ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分），仔细收集上清。分装一 份待检测，其余冷冻备用
实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒，其基因组含有一段外源核酸序列，通常为编码目标蛋白质的dDNA，在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成
报道：上皮细胞是最常发生癌变的细胞类型。癌细胞的扩散一般经过一个EMT转化(上皮细胞到间叶细胞转化)。最近，约翰霍普金斯大学的研究人员，通过对小鼠上皮细胞的研究，发现了一种蛋白能够使细胞与邻近细胞分离，从健康乳腺组织游离出来。他们还发现，删除一个细胞“Vecro蛋白”(velcro，维可牢，是一
如果将特定类型的活细胞涂布在显微镜载玻片上，细胞会在玻片上缓缓移动，找到它们的邻居，自组装成为简单原始的组织。斯坦福大学的新研究能解释这一现象，并能帮助人们理解复杂生物体的机械力结构和行为。 化学工程师Alexander Dunn博士和斯坦福大学的一个跨学科研究团队，对活细胞内和细胞间
5月份即将结束了，5月份Science期刊又有哪些亮点研究值得学习呢？小编对此进行了整理，与各位分享。 1.Science：重磅！开发出延缓癌细胞生长的新方法 doi:10.1126/science.aai9372 癌症是一种非常复杂的疾病，但是它的定义是相当简单的：细胞发生异常和不受控制
调节性T细胞(Treg)是具有免疫抑制功能的T细胞，其主要的功能是抑制效应T细胞介导的免疫反应及维持机体的免疫耐受。效应性Treg只占次级淋巴器官和外周循环Treg细胞的较少一部分，大多数分布于各种组织脏器，效应性Treg是一群已经接受过抗原刺激、活化程度比较高且具有较强的免疫抑制功能的Treg
调节性T细胞(Treg)是具有免疫抑制功能的T细胞，其主要的功能是抑制效应T细胞介导的免疫反应及维持机体的免疫耐受。效应性Treg只占次级淋巴器官和外周循环Treg细胞的较少一部分，大多数分布于各种组织脏器，效应性Treg是一群已经接受过抗原刺激、活化程度比较高且具有较强的免疫抑制功能的Treg
调节性T细胞(Treg)是具有免疫抑制功能的T细胞，其主要的功能是抑制效应T细胞介导的免疫反应及维持机体的免疫耐受。效应性Treg只占次级淋巴器官和外周循环Treg细胞的较少一部分，大多数分布于各种组织脏器，效应性Treg是一群已经接受过抗原刺激、活化程度比较高且具有较强的免疫抑制功能的Treg
尽管在20世纪60年代后期首次描述了在哺乳动物组织或液体中，有囊泡在细胞周围存在，但是直到2011年才提出通用术语“胞外囊泡（extracellular vesicle, EV）”来定义所有的由脂质双层包围的胞外结构，如图1所示。在1980年代，人们描述了EV可以通过质膜向外出芽或通过细胞内内吞