实验方法原理在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液,将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面,离心,从交界部位收集活细胞。实验材料细胞悬液D-PBSA试剂、试剂盒Ficoll-Hypaque溶液或其他类似物仪器、耗材离心管或常规容器生长培养基注射器移液管细胞计数器离心机实验步骤1. 让悬液中大的组织团块沉降。2. 把 9 ml 的细胞悬液(细胞团尽量少)加在6 ml 的Ficoll (Ficoll/metrizoate 调至 1.077 g/ml)泛酸溶液上面,此步骤应在广口、透明有盖的离心管中进行,如 25 ml 无菌离心管或Nunclon 普通容器(清澈光亮的离心管或常规容器),或 Corning 50 ml 透明的塑料管,体积应两倍于上述溶液的体积。3. 400 g (在界面中间测量),离心15 min 。4. 小心吸去上层液体勿破坏界面。5. 用注射器(带有钝的......阅读全文
环保、 低耗气 New Brunswick S41i CO2 恒温摇床培养杂交瘤细胞及中国仓鼠卵巢(CHO) 细胞Nick Kohlstrom, George Wang, Linette Philip and Ma Sha, Eppendorf Inc., Enfield, CT, U.S.A.摘要
近年来随着现代医学研究技术的进步和CTC临床应用价值凸显,许多研究机构和研发团队都在推出不同的CTC检测技术。由于血液中CTC的含量极低,目前主流的检测方法是先捕获(富集)后检测,少量方法是不捕获(富集)直接检测。CTC检测技术包括CTC的富集(分离)和CTC的分析鉴定(识别)。本篇文章将介绍C
处于非均匀电场中的微粒由于极化效应而产生运动,这种现象称之为介电电泳(Dielectrophoresis,DEP)。Maxwell和Wagner分别在1891和1914年研究悬浮液的介电特性时发现,由于介电微粒与悬浮介质的介电性能不同,在外加电场作用下介电微粒会发生界面极化,形成很大的感应偶极矩。1
预测细胞毒性新方法——多种药物研发早期预测细胞毒性的解决方案在体外快速的、高效的、可靠的早期预测毒性对药物研发、减少药物临床试验风险至关重要。利用现代生命科学的新进展,建立和应用新药临床前安全性评价和毒理学机制研究的新技术、新方法和新模型成为当今国际新药研发的新趋势。高内涵筛选(HCS)系统可以说是
流式细胞术(Flow cytometry,简称FCM)是20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质,如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术,能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应用于
细胞凋亡(Apoptosis)或程序性细胞死亡(Programmed Cell Death)是指细胞为了清除自身不需要的和失去功能细胞的一种高级调控过程。凋亡可以发生在细胞生长、衰老、免疫反应或者当细胞受到疾病和毒害因素的破坏,例如放射性药物和化学化疗等的过程中。凋亡细胞会产生诸
分子识别是生命过程的基础,揭示生物活性分子间识别作用是透彻理解生命过程的重要途径。发展新型识别分子、构筑分子探针,在分子水平上探索生命过程和疾病发生发展机制是现代生化分析领域前沿研究方向之一。 中国科学院化学研究所活体分析化学院重点实验室上官棣华课题组科研人员长期致力于分子探针的开发和分子识别
论文摘自山东师范大学化学化工与材料科学学院,济南 250014摘 要 荧光显微镜与荧光光谱仪耦合系统可获取显微荧光成像及微区荧光光谱、荧光寿命的测定信息,广泛应用于细胞、组织中蛋白质的结构功能分析,核酸的识别检测,金属离子、自由基的定量测定,以及纳米生物探针的研制等生物分析研究的热点领域。1 引 言
第一节 免疫细胞的分离 一、外周血单个核细胞的分离 将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合,其比重为1.077±0.002,可作为常规的淋巴细胞分离液,即Ficoll分离液。 主要用于分离外周血中单个核细胞,是一种单次密度梯度离心分离法,其分布由上到下依次为:稀释
血液是唯一与所有器官都有接触的组织,携带着有关机体的大量宝贵信息。在理论上,检测血液携带的 DNA、RNA、囊泡和细胞残骸可以帮助人们诊断和监控各种疾病。 产前基因筛查是血液检测的一个重要应用,通过分析孕妇血液中的胎儿DNA来鉴定染色体异常(比如唐氏综合症)。此外,越来越多的研究者开始关注血液
高通量组学研究已经发展了快20年,从最开始的基因芯片到二代测序,从编码基因到lncRNA,circRNA,从三代测序的出现到单细胞组学研究的火热,相信在这个领域中共事的小伙伴们都深有感触。大家都知道高通量单细胞测序现在很火,但是不是所有的研究都适用,是不是所有的样本都能进行单细胞测序呢?本期小编
高通量组学研究已经发展了快20年,从最开始的基因芯片到二代测序,从编码基因到lncRNA,circRNA,从三代测序的出现到单细胞组学研究的火热,相信在这个领域中共事的小伙伴们都深有感触。大家都知道高通量单细胞测序现在很火,但是不是所有的研究都适用,是不是所有的样本都能进行单细胞测序呢?本期小编带来
DNA结合转录因子(TF)是真核基因表达的典型调节因子。针对转录因子的早期研究揭示出它们的结构良好的DNA结合结构域(DNA binding domain, DBD)并鉴定出转录所需的功能上至关重要的激活结构域(activation domain, AD)。后来很明显的是,许多激活结构域包含着固
表观遗传修饰如m6A甲基化在肿 瘤的发生和发展中起到重要作用。而甲基化酶对ai症的影响也受到广 泛关注。其中去甲基化酶ALKBH5已被报道过能通过维持乳腺ai细胞的干细胞性而促进肿 瘤的形成,还有文章探究过其在急性白血病中的作用,但其对胰腺ai的影响还缺乏研究。今年5月份发表在Molecular
文章导读 表观遗传修饰如m6A甲基化在肿 瘤的发生和发展中起到重要作用。而甲基化酶对ai症的影响也受到广 泛关注。其中去甲基化酶ALKBH5已被报道过能通过维持乳腺ai细胞的干细胞性而促进肿 瘤的形成,还有文章探究过其在急性白血病中的作用,但其对胰腺ai的影响还缺乏研究。今年5月份发表在M
实验步骤基 本 方 案 1 未 致 敏 T 淋巴细胞的活化材 料备选方案1 用抗体激活未致敏的T 细胞这种方法适用于当抗C D 3/T C R 复合物抗体不能有效结合小鼠辅助细胞上的F c 受体 ,或其可溶形式不能有效活化T 细胞时。值得注 意 的 是 ,在 某 种 抗 体(如 抗 G 7、Thy-
◆ TUNEL 与 ELISA 检测凋亡的方法比较TUNEL法 细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3
人们往往以为,血液、尿液、乳汁和脑脊液这些体液系统是均匀的,不过事情并非这么简单。蛋白(和核酸)的确能够在这些体液系统中自由流动。但也有一些生物分子被包裹在脂质囊泡中,这些囊泡被称为胞外体。近年来研究者们渐渐发现,这些胞外体中含有大量可以成为生物学指标的分子。 本文针对胞外体的研究价值、研究现
今天为大家介绍一篇ACS Chem. Biol.的文章 “A Molecular Logic Gate Enables Single-Molecule Imaging and Tracking of Lipids in Intracellular Domains”,文章的通讯作者是来自瑞士洛桑联
组织驻留记忆T细胞(tissue -resident memory T (TRM) )是一个特殊的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)亚群,能够无限期地驻留在组织中,并能够对其同源抗原作出快速的免疫反应的TIL。 CD103(整合素αe)是TRM细胞的识别标志,在大多数研究中发现与CD69和/或PD
文章提出了一种新的基于逻辑与的荧光探针(NY-Lyso),它由吗啉基、半花菁苷和1,8-萘二甲酰亚胺显色团组成,用于特异性检测溶酶体中的亚硫酸氢盐。该智能探针由两个功能部件组成:NY-Lyso探针上的吗啉基对细胞内溶酶体(pH 4.5-5.5)和其他细胞器之间的pH差异产生敏感反应,噻吩和花菁之
NK 细胞,又叫自然杀伤细胞,主要介导天然免疫应答,不依赖抗体和补体,即能直接杀伤靶细胞,如肿瘤细胞或受病毒感染的细胞等;此外,尚有免疫调节功能,也参与移植排斥反应和某些自身免疫病的发生发展。 与肥胖有关的炎症是由免疫细胞的复杂通路介导的。目前,一项新的研究确定了导致肥胖的明显NK细胞群,
还记得CRISPR-Cas9基因组编辑技术,cryo-EM,甚至高通量测序技术未出现之前,我们是怎样进行研究的吗?其实大家不用回忆太久,因为这不是很久以前的事。在过去几年间,生物学研究技术进步步伐快的让人难以置信。 Cell出版社旗下Molecular Cell杂志推出了技术特刊,介绍了新技术
微流控芯片,高通量技术,单细胞测序,CTC循环肿瘤细胞,纳米医学,ddPCR技术,单分子免疫阵列技术(SiMoA),ctDNA,质谱检测,大数据,人工智能等等最新技术成果与应用案例纷纷亮相。 01 微流控芯片技术 微流控芯片,又称为芯片实验室(Lab on a Chip),是指在几平方厘米
微流控芯片,高通量技术,单细胞测序,CTC循环肿瘤细胞,纳米医学,ddPCR技术,单分子免疫阵列技术(SiMoA),ctDNA,质谱检测,大数据,人工智能等等最新技术成果与应用案例纷纷亮相。 01 微流控芯片技术 微流控芯片,又称为芯片实验室(Lab on a Chip),是指在几平方厘米
在雌性哺乳动物胚胎形成过程中,两条X染色体的其中一条失活,完成剂量补偿效应。对于小鼠而言,X染色体失活(XCI)主要分为两个阶段,第一阶段父源X染色体(Xp)启动印记失活,此失活状态在滋养外胚层细胞(TE)及原始内胚层细胞(PrE)中得以维持,但在囊胚内细胞团(ICM)的外胚层细胞中,Xp会出现
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多
真核细胞转录组在三维空间中的分布特征对于基因表达具有重要调节作用。在记忆形成、胚胎发育、细胞增殖等一系列生理学过程中,细胞通过将特定RNA分子选择性富集在亚细胞区域,能够实现对蛋白质翻译过程的精准调控,或帮助建立和维持染色体三维结构。因此,发展一种能在转录组层面解析细胞中RNA三维空间定位的方法
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多