细胞增殖生长_流式细胞仪检测细胞周期时相和DNA合成法
实验方法原理近年流式光度仪的发展已成为检测细胞增殖周期主要手段，可进行多项柱测，如细胞周期时相、DNA 合成强度、持续时间等，效果极好，已取代了应用同位素等繁琐方法。培养细胞是非常适用于做流式细胞仪检测的对象，程序简单、怏速、效果准确。实验材料细胞仪器、耗材流式仪实验步骤1. 细胞80 %接近合细胞；2. 悬液制备用消化法制备成单细胞悬液（细胞数量不少于106）；悬液制备中要仔细，避免产生细胞碎片；3. 检测进行流式仪检测。流式细胞仪除能检测细胞周期时相变化和反应DNA 合成情况外，也可借以了解染色体倍性；另外尚可结合荧光免疫法对细胞膜进行分析等。展开......阅读全文
细胞增殖新的工具以确定细胞分裂
细胞增殖，可能会发生许多刺激如细胞因子的曝光或多种其他进程。BD有一个新的产品，以帮助研究人员研究细胞增殖。空?紫扩散染料450，用于检测细胞的增殖与紫色激光，这有利于使用较大的面板。这使得更多的数据从有限样本使用多色流式细胞仪测定。 VPD450是一个非荧光酯化染料。酯基使染料进入细胞。一旦染
流式细胞仪细胞周期结果判断QA
请帮忙分析一下第一张是未转染的第12代，第二章是转染后的第22代。能说明转染后的细胞增值能力强了吗，怎么看出来的。据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比第一张图的S期有所增高，但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同分裂时期具有不同的DNA含量而分析细胞处于不同的时期的方法。确切的说结果
血液病骨髓细胞DNA变异临床意义
为探讨病患儿DNA的变异，我们采用流式细胞仪（FCM）检测54例血液病患儿骨髓单个核细胞（MNLL）的DNA含量，以分析其倍体水平及细胞增殖周期，进一步探讨其临床意义。 1、对象与方法 1.1对象 （1）急性白血病组（AL）:初诊为AL42例，其中急性淋巴细胞性白血病（A
血液病患儿骨髓细胞DNA变异的临床意义探讨
为探讨病患儿DNA的变异，我们采用流式细胞仪（FCM）检测54例血液病患儿骨髓单个核细胞（MNLL）的DNA含量，以分析其倍体水平及细胞增殖周期，进一步探讨其临床意义。 1 对象与方法 1.1 对象 （1）急性白血病组（AL）:初诊为AL42例，其中急性淋巴细胞性白血病（ALL）22
细胞周期测定实验（一）
标签： 细胞周期 体外培养 周期测定细胞周期测定可以：（1）作为生物相容性评价指标；（2）用于研究细胞凋亡；（3）作为选择细胞的依据。实验方法细胞计数法BrdU渗入法流式细胞仪测定法实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单
流式检测－T－细胞增殖的技巧有哪些？
集中于 T 细胞的许多基础和临床免疫研究包括增殖测定，都是为了确定 T 细胞是否能够在不同的体外或体内条件下增殖。流式细胞仪术是测量 T 细胞增殖的理想方法，现在有一套染色产品，可以在现有的流式细胞仪染色板中加入增殖染料。与所有流式细胞术染色步骤一样，一定要做一个预实验确定染色试剂的用量和确定采
流式细胞仪的应用分类都有哪些
自七十年代出现流式细胞仪以来，随着计算机技术、电子制造技术、激光技术及荧光素合成技术的不断发展，现代流式细胞仪已今非昔比，制造工艺、功能、精确度有了质的飞跃。流式细胞仪应用分类大致如下： 一、免疫表型分析 1993年在波士顿召开的人类白细胞分化抗原会议(leukocytedifferentiat
流式细胞dna分析的简介
流式细胞DNA分析是可以研究间期细胞，并不受细胞增殖状态的影响，对检测胸腔积液中的恶性细胞的有重要意义的一种检查方法。流式细胞仪的检测范围：(1)流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA含量、蛋白质含量。(2)流式细胞仪可以检测细
流式细胞仪测细胞周期图怎样分析
（1）细胞培养取对数生长期的细胞，按1X106个/mL以1mL体积接种于6孔板内。培养24h后，加入不同浓度样品。在37 ℃、5 % 的CO2恒温箱中培养24h后终止。（2）细胞固定胰酶消化并离心收集细胞（800rpm/min），弃上清，用预冷PBS洗细胞两次，加入预冷70％乙醇， -20℃固定保存
实验技巧：流式细胞仪细胞周期结果分析
*张是未转染的第12代，第二章是转染后的第22代。*张图：增值率S（合成期）+G2/M（合成后期/分裂期）：21.7%第二张图：增值率S（合成期）+G2/M（合成后期/分裂期）：19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比*张图的S期有所增高，但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同
实验技巧：流式细胞仪细胞周期结果分析
张是未转染的第12代，第二章是转染后的第22代。*张图：增值率S（合成期）+G2/M（合成后期/分裂期）：21.7%第二张图：增值率S（合成期）+G2/M（合成后期/分裂期）：19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比*张图的S期有所增高，但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同分
细胞增殖检测：CFSE原理和CFSE配制
一、原理 荧光染料CFSE， 也可称为CFDA SE（5，6- carboxyfluorescein diacetate，succinimidyl ester） 即羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂，是一种可穿透细胞膜的荧光染料，具有与细胞特异性结合的琥珀酰亚胺脂基团和具有非酶促水解作用的羟基荧
细胞增殖检测方法
一、胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）渗入法 胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的碱基，也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DAN合成代谢过程，通过测定细胞的放射性强度，可以反映细胞DAN的代谢及细胞增殖情况。但是具有放射性。 二、MTT检测法 MTT检
细胞增殖检测：BrdU
5-brdu 的分子量为307.1，将100mg分为三份30.7mg（0.1mmol），溶于1ml三蒸水，分装-20度保存。用的时候再稀释100倍，如在1ml 溶液里加入10ul即可。尽量分装为小剂量，如100ul，避免反复冻融使其活性降低。 1、BudR贮存液的配制 BudR 5mg（先用0.5m
流式细胞仪在生物学中的应用
流式细胞仪在生物学中的应用 耿慧霞 ,王 来 ,王 强 (河南大学生命科学学院 ,河南开封 475001) 摘 要 :简要论述了流式细胞仪(flow cytometry ,FCM) 的工作原理 ,并对其在生物学基础科学研究中的应用进行阐述 ,包括 对细胞凋亡、细胞周期、免疫细胞、细胞受体的研
钙调蛋白调控细胞增殖及细胞周期的功能简介
真核生物的细胞增殖远比原核生物复杂的多。在细胞增殖和细胞周期的过程中，钙调蛋白具有重要的调节作用。钙调蛋白在细胞中的分布会随着细胞周期的进行而迁移。在 G1 期，钙调蛋白主要分布在细胞质中，可与含肌动蛋白的微丝束组装结合；当细胞分裂进入 S 期时，发现钙调蛋白开始向细胞核中迁移；当分裂到 G2
流式细胞仪在血液学检验中的应用
摘要：流式细胞仪(flow cytometer，FCM)是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。在医学研究领域中，流式细胞仪能够快速分析单个细胞的多种特性，它既可以定性也可以定量，适于大量标本的检测。 1973
细胞周期检测方法
1. 细胞培养：取对数生长期的细胞，按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内，进行所需的处理（比如加入药物），特定时间后终止培养，进行下一步的实验。2. 细胞固定： 800rpm离心5min，收集细胞沉淀，弃上清，用预冷PBS洗涤两次，加入预冷75%乙醇，于4℃固定4
细胞周期如何检测
碘化丙啶（propidium iodide, PI）检测凋亡细胞早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞凋亡和坏死的一个重要指标，凋亡细胞在进入最终溶解阶段前，胞膜通透性无明显改变，相对分子质量大的与DNA结合的荧光染料（如PI）不能时入凋亡细胞内，而相对分子质量小的荧光染料（如Hoechest 3
细胞周期如何检测
碘化丙啶（propidium iodide, PI）检测凋亡细胞早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞凋亡和坏死的一个重要指标，凋亡细胞在进入最终溶解阶段前，胞膜通透性无明显改变，相对分子质量大的与DNA结合的荧光染料（如PI）不能时入凋亡细胞内，而相对分子质量小的荧光染料（如Hoechest 3
流式细胞仪在医学研究与检验工作中的应用(2）
22流式细胞仪在肿瘤学中的应用 FCM对DNA、RNA含量及细胞周期的分析具有独到之处。人体正常的体细胞均有较恒定的DNA二倍体含量，细胞癌变过程中伴随细胞DNA含量的改变，DNA非整倍体细胞是恶性肿瘤的特异性标志。根据DNA分布直方图，可对细胞周期的分布状态进行分析，计算出G0/G1比率,S相
细胞周期测定实验——流式细胞仪测定法
实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测，得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。
促进ECG1/S细胞周期转变和增殖－加强肿瘤内皮细胞作用
来自北卡罗来纳大学Lineberger综合癌症中心研究人员使用整合的生物信息学方法，发现作为RNA结合蛋白（RBP）的QKI蛋白是miR-200b内皮靶标，其在肺癌肿瘤微环境中的研究尚未得到详尽的研究。 此次，由Chad V. Pecot博士领导的研究团队证实， QKI通过稳定细胞周期蛋白D
流式细胞术PI染色进行细胞周期分析的原理
实验原理：流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测，得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。细胞
促进细胞增殖和抑制细胞增殖测定法
（一）放射性核素掺入法：通过细胞DNA合成的增加或减少来判断细胞增殖的方法。该法的优点是结果客观，可常规用于大标本量的测定，但方法的特异性受依赖细胞株依赖程度的影响。此外，测定过程中需要使用放射性核素，废物的处理较繁琐。（二）MTT比色法：不使用放射性核素，以细胞代谢变化作为增殖指征来检测细胞因子生
流式细胞术在组织化学与免疫组织化学中的应用
流式细胞术(flow cytometry，FCM)是对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术。该技术是一项集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学、免疫荧光细胞化学技术及单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。概括地说，流式细胞技术是通过流式细胞仪(flowcytometer)对处在快
流式细胞仪的发展历史及其原理与应用进展（二）
流式细胞术发展趋势可归纳为: ①流式细胞仪从单纯大型仪器发展为适应各种实际应用的便携式、台式、高分辨率、高质量分选的研究型流式细胞仪; ②对流式细胞术检测荧光参数,从采用荧光单色、双色分析发展为多色分析,目前最多可同时检测15 种荧光信号; ③从检测参数的相对定量发展为绝对定量; ④从检测参数的手动
细胞增殖检测：MTT法
细胞增殖检测：MTT法 实验方法原理 MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-（4，5）-dimethylthiahiazo（-z-y1）-3，5-di-
细胞增殖检测：MTT法
MTT法，又称MTT比色法，可以用于：检测细胞存活和生长。实验方法原理MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-（4，5）-dimethylthiahiazo（-z-y1）-3，5-di- phenytetrazoliumromide， MTT 噻唑蓝为基础。MTT 为黄色化合物，是一种接受氢离子的染
流式细胞仪分析技术及应用
在2019年的三月份我正式开始做单细胞相关研究工作，有趣的同时也是朋友我们经常误会的是：你是不是用流式细胞术？而我在得知自己要做这单细胞（single cell ）的研究时，在Google搜关键词（single cell ），居然有不少是介绍流式细胞术的。流式细胞术应用到高通量测序领域就变成了微流控