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巴傲得生物,WB过程中常见的问题及可能原因分析

WB过程中常见的问题及可能原因分析问题可能原因验证或解决办法背景高膜没有完全均匀湿透使用100% 甲醇浸透膜5-10min洗膜不充分增加洗液体积和洗涤次数阻断不充分增加封闭液孵育时间,或者提高温度。选择合适的封闭试剂(脱脂奶粉,BSA,酪蛋白等)二抗浓度过高降低二抗浓度检测过程中膜干燥保证充分的反应液,避免出现干膜现象曝光过度缩短曝光时间抗体与阻断蛋白有交叉反应检测抗体与阻断蛋白的交叉反应性,选择无交叉反应的封闭剂。洗涤液中加入Tween-20可减少交叉反应没有阳性条带,或者阳性条带比较弱抗体染色不充分增加抗体浓度,延长孵育时间酶失活直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低设置阳性对照,如果阳性对照有结果,但标本没有则可能是标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低。可考虑增加标本上样量解决靶蛋白含量低的原因。试剂不匹配一抗与组织种属,一抗与二抗或/和底物与......阅读全文

巴傲得生物,WB过程中常见的问题及可能原因分析

WB过程中常见的问题及可能原因分析问题可能原因验证或解决办法背景高膜没有完全均匀湿透使用100% 甲醇浸透膜5-10min洗膜不充分增加洗液体积和洗涤次数阻断不充分增加封闭液孵育时间,或者提高温度。选择合适的封闭试剂(脱脂奶粉,BSA,酪蛋白等)二抗浓度过高降低二抗浓度检测过程中膜干燥保证充分的反应

巴傲得生物-WB实验流程

凝胶浓度与蛋白质分离范围凝胶浓度% (W/V)最适分离范围(KD)7.570-20010.050-15012.030-10015.012-4520.04-30不同浓度分离胶的制备(两块胶)组分7.5%10%12%15%20%Tris-HCL缓冲液*3.75ml3.75 ml3.75 ml3.75 m

Western Blot过程中常见的问题及可能原因分析

问题可能原因验证或解决办法背景高膜没有完全均匀湿透使用100% 甲醇浸透膜5-10min洗膜不充分增加洗液体积和洗涤次数阻断不充分增加封闭液孵育时间,或者提高温度。选择合适的封闭试剂(脱脂奶粉,BSA,酪蛋白等)二抗浓度过高降低二抗浓度检测过程中膜干燥保证充分的反应液,避免出现干膜现象曝光过度缩短曝

喷雾干燥常见问题及原因分析

喷雾干燥常见问题的分析一.产品含水量高原因分析解决措施料液雾化不均匀,喷出的粒子太大提高离心机转速提高高压泵压力发现喷嘴有线流时应及时更换进料量太大适当改变进料量排出空废弃的相对湿度太高提高进风温度,相应的提高排风温度 二.塔顶及喷雾器附近有积粉原因分析解决措施热风分配未调节好校正热风分配器的位置,

同科生物qPCR常见问题及分析

通常来讲,real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样,要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80~150 bp之间,所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法,zui好在PCR扩增程序结束后,加一个溶解程序,来形成溶解曲线,判断PCR产物的特异性扩增。而溶解程序

同科生物qPCR常见问题及分析

通常来讲,real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样,要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80~150 bp之间,所以只需要变性和退火就可以了。 SYBR@Green等染料法,zui好在PCR扩增程序结束后,加一个溶解程序,来形成溶解曲线,判断PCR产物

细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案

培养基pH值变化迅速培养箱CO2分压设置错误---根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压,NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时,应相应地使用5%-10%的CO2分压细胞培养瓶瓶盖过紧---将瓶盖旋松1/4圈碳酸氢盐缓存系统缓冲能力不足---加入HEPES缓冲液,使其终浓度为1

细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案

  细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案   培养基pH值变化迅速   培养箱CO2分压设置错误---根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压,NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时,应相应地使用5%-10%的CO2分压   细胞培养瓶瓶盖过紧---将瓶盖旋松1/4

western blot技术要点和WB常见问题分析

WB过程中常见的问题及可能原因分析

PCR实验过程中常见的问题分析

  开展 PCR 应具有一定的条件。需要一个正规的 pCR 实验室,采集标本、核酸提取、扩增及产物分析应在不同的房间进行;需有严密的防污染措施、假阳性和假阴性结果的质控等。实验者应具有一定的分子生物学理论知识及实验技能,能够及时发现和纠正实验中的问题。目前,我国在 PCR 应用中尤其是在临床诊断中存

石油产品馏程测定常见问题及原因分析

1.测定汽油馏程时,用棉花垫塞住量简口的目的?    是为了防止冷凝管上凝结的水分落人量简内和减少馏出物的挥发。2.造成馏出液体积过多或过少的原因   (1)造成蒸馏出液体积过多的原因有:    ①量取试油时液面高于lOOmL的标线,也就是油量多了;    ②zui取试油时,试油温度比室温低;   

雷迈分析包衣过程中常见问题及对策

机在实际操作中如遇到如下的问题:                            包衣机在实际操作中如遇到如下的问题:  1、粘片多发生在包隔离层。原因是素片表面不光华,单糖浆加入过量且温度低,水分蒸发慢,搅拌不及时,彼此粘附所致。  对策:一是糖浆应控制在40℃~50℃,与素片的比例

关于WB实验中蛋白样品制备的常见问题分析

 WB实验又称免疫印迹实验,是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术,具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。    对于一直都在做蛋白研究的你,在样品制备

常见品牌气缸故障问题及原因

  ⒈汽缸是铸造而成的,汽缸出厂后都要经过时效处理,使汽缸在住铸造过程中所产生的内应力完全消除。如果时效时间短,那么加工好的汽缸在以后的运行中还会变形。   ⒉汽缸在运行时受力的情况很复杂,除了受汽缸内外气体的压力差和装在其中的各零部件的重量等静载荷外,还要承受蒸汽流出静叶时对静止部分的反作用力,

气缸常见故障问题及原因

  ⒈汽缸是铸造而成的,汽缸出厂后都要经过时效处理,使汽缸在住铸造过程中所产生的内应力完全消除。如果时效时间短,那么加工好的汽缸在以后的运行中还会变形。   ⒉汽缸在运行时受力的情况很复杂,除了受汽缸内外气体的压力差和装在其中的各零部件的重量等静载荷外,还要承受蒸汽流出静叶时对静止部分的反作用力,

气缸常见故障问题及原因

  ⒈汽缸是铸造而成的,汽缸出厂后都要经过时效处理,使汽缸在住铸造过程中所产生的内应力完全消除。如果时效时间短,那么加工好的汽缸在以后的运行中还会变形。   ⒉汽缸在运行时受力的情况很复杂,除了受汽缸内外气体的压力差和装在其中的各零部件的重量等静载荷外,还要承受蒸汽流出静叶时对静止部分的反作用力,

地磅检定过程中常见问题分析

一、地磅检定的硏究Vmin

使用微量天平过程中常见问题原因剖析

1.温度问题:显示值单方向漂移可能原因:天平通电预热时间不够;样品与周围环境之间存在温度差异,导致顺沿称量容器出现气流。沿容器侧部流动的空气产生向上或向下力,从而导致称量结果错误。这种效应被称为动态浮力。这种效应在达到温度平衡之前不会消失。原理如下:冷性物体显示较重,暖性物体显示较轻。这种效应可导致

免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策

 良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染

多肽分析过程中常见问题解读

小分子越来越难做,大分子发展很强势,似乎成为了近年来药物研发市场的重要表现之一,“多肽”类药物正是其中的一大热门。目前多肽药物的质量监管日趋渐严,在这种趋势下,寻找能满足更高分离度,灵敏度的分析方法就显得尤为重要。很多小伙伴在在开发多肽类样品分析方法中总是遇到各种的问题,无比烦恼。这里小编就总结了一

了解恒温摇床最常见故障及可能的原因

    恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无级调速和良好的热循环功能,是一种多用途的生化仪器,是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研,教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备,适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作生物、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物

了解恒温摇床Z常见故障及可能的原因

  恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无级调速和良好的热循环功能,是一种多用途的生化仪器,是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研,教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备,适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作生物、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振

小儿静脉留置针输液常见问题原因分析及对策

  静脉留置针亦称套管针,其套管柔软,不易穿破血管,可长时间留置于血管内,既减少了患者反复静脉穿刺的痛苦,又能方便及时用药,具有传统头皮针不可替代的优势,因而被广泛应用于临床输液。由于小儿配合差,血管相对较细,静脉留置针的使用可大大减轻患儿的痛苦,也降低了护士进行穿刺时的精神压力。    但在临

高压灭菌锅在使用过程中常见的故障及原因分析

常见的故障有:加热功能失灵、水位器工作异常、联锁灯不亮、漏气、安全阀工作异常、无法正常排气、排液等。(1)仪器使用时,加热功能失灵导致无法正常产生蒸汽。仪器运行时,面板上加热指示灯亮,但温度指示不上升,一直维持室温状态。处理方法:打开仪器侧盖,面板显示正常表明220V电源正常进入控制电路。将与加热管

探伤过程中常见缺陷判断及产生的原因

1、气孔:单个气孔回波高度低,波形为单缝,较稳定。从各个方向探测,反射波大体相同,但稍一动超声波探伤仪探头就消失,密集气孔会出现一簇反射波,波高随气孔大小而不同,当探头作定点转动时,会出现此起彼落的现象。产生这类缺陷的原因主要是焊材未按规定温度烘干,焊条药皮变质脱落、焊芯锈蚀,焊丝清理不干净,手工焊

免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策-1

良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色

免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策-2

3)、DAB变质和显色时间太长:DAB最好现用现配,如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长,因为在没有酶的情况下,过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力,未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色最好在显微镜下监控,达到理想的

PH电极使用过程中的日常问题及常见故障分析

  1、PH电极的使用寿命?   国家标准规定电极的保证期:从电极上所标注的制造日期起,在一年的有效期内拆箱使用时,其性能符合本标准的全部要求,在保证期内,如发现电极因制造厂的原因而不能正常工作时,制造厂应负责修理或退换。由此可见,电极的质量保证期是在没有经过使用为前提,期限为一年,因此笼统的讲电极

巴发现可能经受星际旅行的微生物

  巴西里约热内卢联邦大学的科研人员近日发现一种可在强烈辐射条件下存活的微生物,为地球生命可能来自其他星球的假说增添了证据。   里约联邦大学生物学家伊万·保利诺-利马领导的科研小组报告说,他们在真空实验条件下用不同波长和强度的紫外线对一种名为“耐辐射球菌”的微生物连续辐射16个小

影响ELISA试验效果常见问题原因分析及解决办法

 ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。操作步骤可能原因解决办法选择试剂选择质量优良的检测