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P糖蛋白检测

1.P-糖蛋白是一种分子量170KD的跨膜糖蛋白(P170),它具有能量依赖性“药泵”功能。P-gP既能与药物结合,又能与ATP结合,ATP供能,使细胞内药物泵出细胞外,减低了细胞内的药物浓度使细胞产生耐药性。医学教育|网搜集整理MDR1有两种不同的表型:对第一次化疗产生的耐药天然性耐药;在化疗过程中产生耐药的获得性耐药。化疗前MDR高表达的肿瘤,其化疗作用往往不理想,化疗前MDR低表达的肿瘤,对化疗有较好的效果,化疗后高表达的肿瘤与肿瘤的疗效及复发有关,如非霍奇金病,急淋、慢淋等。有资料报道,复发和难治的白血病其P-gP表达增加。 2.成人白血病P-gP表达与预后的关系:据苏州医学院对成人白血病P-gP检测的报道,以P-gP≥10%为阳性:P-gP+的AML完全缓解率明显小于P-gP-的AML,而在ALL中无显著性差异;P-gP+的ALL,ALL6个月复发率高于P-gP患者,Pg+患者的平均无病生存期较P-gP-者短,提......阅读全文

泛冠状病毒药物开发的基础知识

  高致病性冠状病毒感染成了这十年来广受关注公共卫生问题。严重急性呼吸综合征(SARS,2002-2004),中东呼吸综合征(MERs,2012-至今),2019-nCov(COVID-19),每一个对人类健康,经济发展都带了巨大的冲击。   病毒通过接触,飞沫,气溶胶等形式,引起广泛传播,引起高

沃特世:同中国科学家深度合作共促糖组学创新

  分析测试百科网讯 如果说基因是生命的起点,那么糖蛋白的表现很大程度上就是研究生命功能的终点。人类蛋白中有50%以上都发生了糖基化的修饰,在病理和生理过程中糖蛋白发挥了至关重要的作用,在生物制药中最亮眼的单抗药100%都是糖蛋白药物。对糖蛋白和糖蛋白质组学的研究是贯穿生物制药、疾病与临床研究生生不

直链淀粉树脂亲和层析纯化麦芽糖结合融合蛋白实验

实验材料 表达 BMP 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液细胞洗涤缓冲液柱洗脱缓冲液柱洗涤缓冲液MgCl2PMSFSDS 凝胶加样缓冲液Tris-ClDNase溶菌酶RNase凝血酶、肠激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 Beckman Ti60 转头或相当的转头

Western Blot详解

  Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。   本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:   一、原理   二、分类

糖蛋白(4)

评价糖蛋白是含糖的蛋白质,由寡糖链与肽链中的一定氨基酸残基以糖苷键共价连接而成。细胞中糖蛋白的形成其主要生物学功能为细胞或分子的生物识别,如卵子受精时精子需识别卵子细胞膜上相应的糖蛋白。受体蛋白、肿瘤细胞表面抗原等亦均属糖蛋白。 糖蛋白普遍存在于动物、植物及微生物中,种类繁多,功能广泛。可按存在方式

生物质谱技术在蛋白质组学中的应用

  一、 前言[1,2]   基因工程已令人难以置信的扩展了我们关于有机体DNA序列的认识。但是仍有许多新识别的基因的功能还不知道,也不知道基因产物是如何相互作用从而产生活的有机体的。功能基因组试图通过大规模实验方法来回答这些问题。但由于仅从DNA序列尚不能回答某基因的表达时间、表达量

PNAS:肌肉萎缩症的最新发现

  一直以来,在分子水平上对肌肉萎缩症的研究还知之甚少,来自哥本哈根大学的研究者在11月的PNAS杂志上发表的最新研究成果对此提出了新的见解,这个突破有望提高对于这种疾病的诊断和治疗。   生物通报道:在丹麦,大约有3000人患有某种严重的肌肉疾病,其中以肌肉萎缩症为首。一些被诊断为肌肉萎缩症的患

植物蛋白质组学和糖基化实验2

3. 糖基释放后的蛋白质分析1 ) 糖基释放的化学处理方法还原性氨化反可应选择性的解离糖蛋白上的 O-糖苷(见注释 10) 。去糖基化的蛋白用 1D SDS-PAGE 分析,将其迁移情况与其糖基化形式的蛋白进行比较,电泳迁移率的增加是 O-连糖苷出现在蛋白上的证据(见注释 11)。( 1 ) 将 1

蛋白质组学几种定量方法的案例解读

   上期分享的蛋白组学内容,是不是有些小伙伴还绕在云里雾里呀?这次,小编用实例说话,帮您梳理清楚。   一、Label-free定量    Label-free定量,顾名思义就是不需要对比较样本做特定标记处理,只需要比较特定肽段/蛋白在不同样品间的色谱质谱响应信号便可得到样品间蛋白表达量的变化

Nature报道肿瘤细胞耐药新机制

  有一种“臭名昭著”的蛋白质,能够将化疗药物从癌细胞中“泵”出来,还能阻止药物到达中枢神经系统。范德堡大学医学中心的研究人员最近绘制了一副这名“罪犯”“犯罪”时的构象变化。  P-糖蛋白是一种,ATP结合盒(ABC)转运蛋白。ABC转运蛋白是一个膜内在蛋白超家族。它将ATP水解,释放ATP分子中储

蛋白质糖基化修饰在生命体中的作用

  治疗性重组蛋白或单克隆抗体是影响细胞、组织、器官乃至生命的外源性重组蛋白,在细胞内成熟过程中几乎均会发生蛋白质糖基化修饰,而糖基化修饰的质和量的差异,可能会影响相关重组蛋白表达水平、结构及功能。重组蛋白表达服务可以帮助研发人员研发高效、高质量的蛋白质。在生物体中50%以上的蛋白质存在糖基化现象,

“甜蜜诱惑”侵蚀孩子健康 儿童“减糖”“戒糖”刻不容缓

  世界卫生组织的调查指出,嗜糖之害,甚于吸烟,长期食用含糖量高的食物会使人的寿命明显缩短,并提出了“戒糖”口号。但是近年来,中国人对糖的消耗量居高不下,特别是孩子,2008年我国儿童人均每天喝饮料715毫升,10年时间翻了一番。而目前市售饮料中大部分为含糖饮料,多数饮品含糖量为8%~11%,一瓶容

植物蛋白质组学和糖基化实验(三)

3. 糖基释放后的蛋白质分析1 ) 糖基释放的化学处理方法还原性氨化反可应选择性的解离糖蛋白上的 O-糖苷(见注释 10) 。去糖基化的蛋白用 1D SDS-PAGE 分析,将其迁移情况与其糖基化形式的蛋白进行比较,电泳迁移率的增加是 O-连糖苷出现在蛋白上的证据(见注释 11)。( 1 ) 将 1

植物蛋白质组学和糖基化(一)

 1. 前言与其他真核细胞一样,植物细胞中,糖基化通常发生在分泌蛋白质上,虽然在细胞质蛋白和核蛋白上也发现一些糖基化反应。根据寡糖部分和蛋白质骨架之间的连接方式,可将糖基化分为两种类型:N -糖基化和 O-糖基化。植物中 N-糖基化研究最多。1.1 N-糖基化与其他真核细胞一样,在植物细胞

糖蛋白标志物研究工具——凝集素芯片

   糖基化是Z为广泛和复杂的蛋白质共翻译或翻译后修饰之一,它是通过糖基转移酶,在新生多肽或者成熟蛋白质的特定氨基酸上添加多个单糖的过程,通俗的理解就是在细胞器内“出厂”的蛋白质上添加各种糖链“标签”的过程。人体内至少50%的蛋白质都会发生糖基化修饰。这类修饰与蛋白质的正确折叠、构象稳定性及分泌等密

为何要关注抗体药物的糖基化修饰?

   在众多的蛋白质翻译后修饰中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,也是评价抗体的关键质量属性之一。单抗药物功能的实现与其糖基化修饰密切相关,糖基化修饰会影响蛋白的性能,如构象、稳定性、溶解度、药物代谢动力学、活性及免疫原性。本文中,笔者就糖基化及其对抗体药物的稳定性/半衰期、安全性及生物活性进

蛋白冻干技术和冻干后的影响

第一:什么是蛋白?蛋白又名鸡子白,异名鸡卵白(《别录》)、鸡子清(《食疗本草》)。为雉科动物家鸡的蛋白,是常见的食品。营养优良、润肺利咽、清热解毒。第二:蛋白为什么要冻干?蛋白质对热敏感,冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来,提高蛋白的稳定性并延长保存时间,同时降低运费。第三:冻干对蛋白会有哪些影响

新冠疫苗为何难以研发成功?牛津大学顶尖学者这样解释

  随着各国对新冠病毒检测能力的提高,确诊人数有井喷态势。今晚,全球累计确诊罹患新冠病毒肺炎人数已突破50万。  全球科学界正在马不停蹄地进行药物研发和疫苗研发,根据世界卫生组织介绍,目前全球有42种候选疫苗正在进行临床前的评估,有2种疫苗正在进行临床实验,已经是史上最快速度。  虽然疫苗被认为是预

跑胶蛋白质弥散

  estern Blot(WB)可以说是生物学方向的同学最...最基本的实验技能了,然而好看的 WB 总是别人的,自己的 WB 总是杂带丛生,尤其是新课题、新抗体,总在目的条带附近出现非特异性条带。产生这种状况的原因是什么呢、用下面的几个例子,咱们一起研究一下。  案例一:啥也没有  原因:比较多

跑胶蛋白质弥散

  estern Blot(WB)可以说是生物学方向的同学最...最基本的实验技能了,然而好看的 WB 总是别人的,自己的 WB 总是杂带丛生,尤其是新课题、新抗体,总在目的条带附近出现非特异性条带。产生这种状况的原因是什么呢、用下面的几个例子,咱们一起研究一下。  案例一:啥也没有  原因:比较多

蛋白冻干损失有哪些影响?

  第一:什么是蛋白?  蛋白又名鸡子白,异名鸡卵白(《别录》)、鸡子清(《食疗本草》)。为雉科动物家鸡的蛋白,是常见的食品。营养优良、润肺利咽、清热解毒。  第二:蛋白为什么要冻干?  蛋白质对热敏感,冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来,提高蛋白的稳定性并延长保存时间,同时降低运费。  第三:冻

研究抗体药物的糖基化修饰为何重要?

  在众多的蛋白质翻译后修饰中,糖基化修饰是最重要和最复杂的修饰之一,也是评价抗体的关键质量属性之一。单抗药物功能的实现与其糖基化修饰密切相关,糖基化修饰会影响蛋白的性能,如构象、稳定性、溶解度、药物代谢动力学、活性及免疫原性。本文中,笔者就糖基化及其对抗体药物的稳定性/半衰期、安全性及生物活性进行

第三届中国药品质量安全大会特邀报告

  2013年4月20日第三届中国药品质量安全大会在北京亦庄隆重召开,此次大会由全国医药技术市场协会主办,北京中培科检信息技术中心承办,国内外专家学者、知名厂商、研发机构等近400人参加了本次盛会,国内外数十名知名学者在会议期间做特邀报告,另有20多家厂商参展。  以下是大会下午精彩的报告: 中国

糖蛋白标志物研究工具——凝集素芯片

   糖基化是Z为广泛和复杂的蛋白质共翻译或翻译后修饰之一,它是通过糖基转移酶,在新生多肽或者成熟蛋白质的特定氨基酸上添加多个单糖的过程,通俗的理解就是在细胞器内“出厂”的蛋白质上添加各种糖链“标签”的过程。人体内至少50%的蛋白质都会发生糖基化修饰。这类修饰与蛋白质的正确折叠、构象稳定性及分泌等密

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

特定蛋白项目的临床应用与检测的质量控制

目前已用于临床诊断的特定蛋白多达40~50种,涉及免疫球蛋白及补体系列、风湿及类风湿系列、尿微量蛋白系列、急性炎症蛋白系列等。通过专业的特定蛋白分析仪或生化分析仪对其分析,为临床提供有效的病理生理指标,并作为临床诊断、治疗效果和分析预后的依据。血浆蛋白成分至少有1000多种,已分离出的具有临床意义的

植物蛋白质组学和糖基化实验(一)

实验材料 链霉亲和素-过氧化物酶牛胰核糖核酸酶 B甲基比喃甘露糖苷卵清白蛋白试剂、试剂盒 DIG 糖链检测试剂TTBS 缓冲液Lectin- biotinTBS 缓冲液实验步骤 3.1 这个蛋白质是糖蛋白吗只有一种方法能全面的回答“这个蛋白质是糖蛋白吗?”这个问题。这需要使用能检

凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验

实验方法原理 用于亲和层析的凝集素应根据它们结合的特异性和紧密度加以选择。例如,刀豆素 A(Con A)与糖蛋白含有的葡萄糖或甘露糖结合,而麦芽凝集素只与具 N-乙酰葡糖胺的蛋白质结合。胞膜糖蛋白常与麦芽凝集素结合,而可溶性糖蛋白却通常用 Con A 或扁豆凝集素亲和柱纯化。由于在许多情

糖蛋白(1)

糖蛋白(glycoprotein)是分支的寡糖链与多肽链共价相连所构成的复合糖,主链较短,在大多数情况下,糖的含量小于蛋白质。同时,糖蛋白还是一种结合蛋白质,糖蛋白是由短的寡糖链与蛋白质共价相连构成的分子,糖链作为缀合蛋白质的辅基。化学品简介糖蛋白(glycoprotein)是分支的寡糖链与多肽链共

细胞需要促贴壁的条件与操作指南

上次我们已经浅论过细胞不贴壁的原因今天我们来深扒细胞贴壁具体与哪些物质有关?那么如何促进细胞贴壁?许多细胞必须添加促贴壁物质才能贴壁生长,促贴壁物质一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。不同细胞外基质对细胞粘附的效果一样吗?细胞外基质的包被浓度是什么标准?今天我们就来扒一扒那些常见的促贴壁物质