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血清胰蛋白酶虽然胰液中含有大量的胰蛋白酶，正常时却很少进入血循环，健康人血清中存在的主要为游离胰蛋白酶原～1，没有游离的胰蛋白酶。 急性胰腺炎时，血清胰蛋白酶和淀粉酶平行升高，其峰值可达参考值上限的2～400倍，两种胰蛋白酶的分布和急性胰腺炎的类型及严重程度有关。轻型者80%～99%为游离胰蛋白酶原～1及极少的结合型的胰蛋白酶～1；而重型者游离胰蛋白酶原～1可低到胰蛋白酶总量的30%，大部分以结合形式存在，它可以和α1～抗胰蛋白酶或α2～巨球蛋白结合。 由于有上面所说的临床意义，许多人都想把血清胰蛋白酶测定用于胰腺疾病诊断，但因为血清中还有其他蛋白酶也能水解试剂中的底物，同时还有蛋白酶的抑制物存在，这些都会影响测定结果，所以以前临床很少测定血清胰蛋白酶。但现在已经有了测定胰蛋白酶原～1、胰蛋白酶～1、胰蛋白酶～1：α1～抗胰蛋白酶复合物的免疫方法，不过目前还没有广泛用于临床。其临床意义和价值尚需观察和总结。......阅读全文
原代细胞的培养与建系 细胞的来源多样，培养方法也各不相同，凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离
细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒 清洗 在组织细胞培养中，体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物，上次细胞残留物及非营养成分的化学物质，均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗，且要根据器皿的组成材料不同，选择不同 的清
消化液：分离组织和分散细胞。常用的有胰蛋白酶和二乙胺四乙酸二钠 (EDTA) 两种溶液。可以 单独使用，也可以混合使用。（1）胰蛋白酶溶液胰蛋白酶（简称胰酶）是一种黄白色粉末，易潮解，应放置冷暗干燥处保存。目前应用的胰蛋白酶主要来自牛或猪的胰腺。胰酶的主要作用是使细胞间的蛋白质水解，使细胞相
细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中，体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物，上次细胞残留物及非营养成分的化学物质，均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗，且要根据器皿的组成材料不同，选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清
细胞分离技术一、从原代组织中分离细胞 将组织块分离（散）成细胞悬液的方法有多种，最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短，以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织，获得较高产量的有活性细胞。1.胰蛋
贴壁因子使用方法：①选择适宜的贴壁因子。②将贴壁因子贮存液用三蒸水或PBS液或D-Hanks液稀释成0．1毫克/毫升的工作液。③滤过除菌的工作液按50微升/平方厘米涂布培养器皿的细胞生长面。④室温静置5分钟(胶原基质延长24小时)。⑤除去多余溶液。⑥涂布面用灭菌三蒸水洗涤后，再经细胞培养基浸泡过渡，
实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况，同时进行细胞爬片H-E染色和透射电镜等形态学观察分析，并应用免疫荧光染色平滑肌特有的α-肌动蛋白进行细胞学鉴
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层
酶分离法 实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层
（2） 胶原酶（Collagenase）消化法 胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶，对胶原有很强的消化作用。适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织，它对细胞间质有较好的消化作用，对细胞本身影响不大，可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害。该酶分离效果好，即使有钙、镁离子存在仍有活性，故
实验材料链霉亲和素-过氧化物酶 &
培养基按不同方式分类也是不同，这其中有一种天然培养基－－血清。今天上海劲马来为您说说我公司优质血清的特性功能技术。要知道，它是细胞培养中用量的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1、起酸碱度缓冲液作用。2、提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余
目前已用于临床诊断的特定蛋白多达40~50种，涉及免疫球蛋白及补体系列、风湿及类风湿系列、尿微量蛋白系列、急性炎症蛋白系列等。通过专业的特定蛋白分析仪或生化分析仪对其分析，为临床提供有效的病理生理指标，并作为临床诊断、治疗效果和分析预后的依据。血浆蛋白成分至少有1000多种，已分离出的具有临床意义的
实验方法原理 组织块移植组将直径2 mm的人肺癌新鲜标本癌组织块移植于BALB/C裸鼠背部皮下组织内，每例人肺癌新鲜标本均移植入5只裸鼠体内，成瘤者为第1代。取第1代移植瘤组织块以相同方法每例标本移植于另5只BALB/C裸鼠背部皮下组织内，成功者为第2代。重复上述传代方法得到第3代移植瘤。将
（2） 胶原酶（Collagenase）消化法 胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶，对胶原有很强的消化作用。适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织，它对细胞间质有较好的消化作用，对细胞本身影响不大，可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害。该酶分离效果好，即使有钙、镁离子存在仍有活
实验方法原理 嗅鞘细胞是在功能上介于施万细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊胶质细胞，是决定嗅神经元轴突终生再生的关键因素。它具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘等作用，为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移特性，已成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。基于其与成纤维细胞贴壁能力的不同，目前我
基本方案实验方法原理嗅鞘细胞是在功能上介于施万细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊胶质细胞，是决定嗅神经元轴突终生再生的关键因素。它具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘等作用，为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移特性，已成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。基于其与成纤维细胞贴壁能力的不同，
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
实验概要精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究，精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用，都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化，以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞，用于体外培养。资料表明，从成年啮齿类的睾丸分离粗线
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
兔膀胱平滑肌细胞培养可以：（1）分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞；（2）进行细胞学鉴定研究；（3）用于细胞学其他研究。实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后，完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞，体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于一196~C液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细
作者：首都医科大学附属北京佑安医院 闫惠平自身抗体(autoantibodies)是指由于各种原因导致机体产生的针对自身组织成分的抗体，可以是生理性，也可以是病理性的。正常人群中自身抗体的存在相当普遍，其作用之一就是清除体内衰老及死亡的细胞，但是生理性自身抗体一般滴度很低，只有达到一定的检测阈值才具
实验十四 细胞集落形成实验非整倍体无限细胞系和癌细胞株中，仍然存在不同细胞亚群，它们的功能和生长特点有些差异，其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力，细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞，细胞遗传性状、生物学特性相似，利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系，细
实验概要非整倍体无限细胞系和癌细胞株中，仍然存在不同细胞亚群，它们的功能和生长特点有些差异，其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力，细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞，细胞遗传性状、生物学特性相似，利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系，细胞集落率很低。细胞
三、染色体标本预处理和变性1.染色体标本至少自然老化2d或用前37℃过夜。2.染色体标本在系列乙醇（70%、80%和95%)中分别脱水5min，晾干。3.加入15〜20μL的10%胃蛋白酶储存液到50mL预热的0.01mol/L HCl中，将染色体标本在37℃染色缸中温育5min。同时，准备一缸70
基本方案 实验方法原理 光谱染色体核型分析（SKY)采用24种颜色对所有染色体进行涂染，在一次试验
实验方法原理光谱染色体核型分析（SKY)采用24种颜色对所有染色体进行涂染，在一次试验中可以观察到每一条染色体。该技术以光谱成像和傅里叶光谱学原理为基础。对流式分选的染色体进行PCR标记，直接标记荧光素或间接标记半抗原。5种光谱学不同的纯色染料进行组合得到独特的染色体探针混合物。探针混合物与中期染色
细胞培养容器 有关培养容器的详细内容，请参阅《微载体细胞培养：原理与方法》手册。 简而言之，微载体培养液可置于各类细胞培养容器中。但是，应用一些在轻微搅动即可使微载体均匀悬浮的容器所获得的效果最佳，如WAVE生物反应器。那些在应用了能有效的混合悬液但不产生高剪切力的装置能够形成一个均匀的培养环境