如何简单有效地实时监测细胞增殖和细胞周期?

生物研究和药物发现越来越需要扩大基于细胞的检测方法的多样性和复杂性。活细胞检测可以实时监测细胞反应,并提供关于化合物治疗效果和生物复杂性的重要见解。为了描述抗癌化合物的作用,我们监测了HeLa 宫颈癌细胞增殖和细胞周期的时间依赖效应。采用透射光延时成像技术对细胞数量、融合度、细胞面积进行量化,采用荧光标记技术评价化合物处理对细胞周期的影响。图1:有丝分裂细胞的活细胞检测使用 ImageXpress Pico 系统结合 CellReporterXpress® 成像采集和分析软件进行细胞检测。该成像设备系统配备了一个环境控制室,可以控制和监控温度、CO2 和 O2 浓度以及湿度,同时系统提供五个荧光通道加上透射光 (brightfield) 以及比色成像。环境控制室和高精度自动移动台支持长时间、延时显微成像技术,可自动监测细胞增殖、分化、化合物毒性和各种其他基于细胞的检测。研究结果证明了环境控制室和活细胞延时......阅读全文

植物细胞周期观察

一、实验目的1.学会植物细胞、组织的固定、离析和压片方法,了解并初步掌握制作临时玻片和永久玻片的方法。2.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化过程,着重了解分裂期内中、后期染色体变化的特征。二、实验原理植物根尖分生组织的细胞,依一定的程序有规律地进行着有丝分裂过程,植物种类不同,细胞周期所需

细胞周期测定实验

细胞计数法 BrdU渗入法 流式细胞仪测定法             实验方法原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的

细胞周期如何检测

碘化丙啶(propidium iodide, PI)检测凋亡细胞早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞凋亡和坏死的一个重要指标,凋亡细胞在进入最终溶解阶段前,胞膜通透性无明显改变,相对分子质量大的与DNA结合的荧光染料(如PI)不能时入凋亡细胞内,而相对分子质量小的荧光染料(如Hoechest 3

细胞周期的划分

细胞周期的划分:G1期→S期→G2期→M期,以及G0期。G1期:进行细胞生长,S 期:进行DNA复制,使DNA成为相同的两份,G2期:制造蛋白质,准备细胞分裂的所需物质,M期:有丝分裂;为进行核裂(染色体分离)和质裂(细胞质分裂)的阶段。当细胞处于G0期时 就会停止细胞一切的复制分裂过程总的看来,细

细胞增殖的分裂介绍

  有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式。(右上角图就是常见有丝分裂的开始和结果)多细胞生物体以有丝分裂的方式增加体细胞的数量。体细胞进行有丝分裂是有周期性的,也就是具有细胞周期。  细胞周期 细胞周期是指连续分裂的细胞,从一次分裂完成时开始,到下一次分裂完成时为止,这是一个细胞周期。  一个细

细胞增殖的分裂介绍

  有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式。(右上角图就是常见有丝分裂的开始和结果)多细胞生物体以有丝分裂的方式增加体细胞的数量。体细胞进行有丝分裂是有周期性的,也就是具有细胞周期。  细胞周期 细胞周期是指连续分裂的细胞,从一次分裂完成时开始,到下一次分裂完成时为止,这是一个细胞周期。  一个细

T细胞增殖试验类型

  (1) 形态法:其原则是将外周血液或分离的单个细胞与适量的植物血凝素(PHA)混合,置37℃培养72h,取培养细胞作涂片染色镜检。据细胞的大小、核与胞浆的比例、胞浆的染色性和核结构以及有无核仁等特征,分别计数淋巴母细胞、过渡性母细胞和核有丝分裂相以及成熟的小淋巴细胞,以前三者为转化细胞,每份标本

细胞DNA增殖的特点

细菌DNA复制、RNA转录和蛋白质合成同时进行,这是细菌对快速生长的原因。DNA复制不受细胞周期的限制,快速生长的细菌,在上一次细胞分裂结束时,细胞内的DNA经复制到一半进程,以保证迅速进行下一次分裂。1、细胞周期是第一次分裂开始到第二次分裂开始所经历的全过程。《普通生物学》陈阅增2、细胞周期是第一

细胞增殖的研究方法

  细胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU检测方法是最新的细胞增殖检测方法。  EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确

细胞增殖检测:MTT法

MTT法,又称MTT比色法,可以用于:检测细胞存活和生长。实验方法原理MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT 噻唑蓝为基础。MTT 为黄色化合物,是一种接受氢离子的染

浆细胞的增殖方式

  浆细胞(plasmacell)B淋巴细胞在抗原刺激下分化增殖而形成的一种不再具有分化增殖能力的终末细胞。在分化过程中获得特有的浆细胞抗原,这是浆细胞区别于淋巴细胞的主要膜标志。浆细胞在体内的分布与淋巴细胞大致相似,主要分布在淋巴结和脾脏。B细胞接受抗原信息刺激后,最初形成体积较大的浆母细胞。在浆

细胞增殖检测:MTT法

细胞增殖检测:MTT法             实验方法原理 MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-

细胞增殖的基本定义

细胞增殖是指细胞生长和分裂成两个子细胞的过程。细胞增殖使细胞数量成倍增加,因此它是组织生长的快速机制。细胞增殖要求细胞生长和细胞分裂同时发生,以使细胞的平均大小保持不变。细胞增殖与细胞生长或细胞分裂不同的是,细胞分裂时可以不发生细胞生长,这样会生成许多小细胞(如卵裂),而细胞生长可以不发生细胞分裂,

淋巴细胞增殖实验

淋巴细胞增殖法对于(1)免疫学的研究(2)淋巴细胞的T细胞,吞噬细胞等的功能研究。实验方法原理淋巴细胞在体外经某种物质刺激,细胞代谢和形态相继变化,在24——48h细胞内蛋白质和核酸的合成增加,产生一系列增殖的变化,如细胞变化、细胞浆扩大、出现空泡、核仁明显、核染色质疏松等,由淋巴细胞转变为淋巴母细

细胞凋亡和细胞增殖的意义

细胞凋亡和细胞增殖都是生命的基本现象,是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施。在胚胎发育阶段通过细胞凋亡清除多余的和已完成使命的细胞,保证了胚胎的正常发育;在成年阶段通过细胞凋亡清除衰老和病变的细胞,保证了机体的健康。和细胞增殖一样细胞凋亡也是受基因调控的精确过程。

细胞周期测定实验_细胞计数法

细胞周期测定可应用于:(1)作为生物相容性评价指标;(2)研究细胞凋亡;(3)作为选择细胞的依据。实验方法原理体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比,它是测定

利用细胞计数仪检测细胞周期

前言球体是小型的3D细胞培养微环境,可以用于诸如低吸附微孔板等特殊的方法进行细胞培养。这种体外3D细胞培养模型具有高度的临床及生物可靠性,并且已经被广泛应用于高通量筛选(HTS)和高级细胞培养,从而方便对诸如化合物毒性和癌症等重大疾病进行研究。Multicellular tumor sphe

检测DNA分析细胞周期

Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠         0.25gTriton-X 100          0.75mlPropidium iod

细胞周期的DNA检测

Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠     0.25gTriton-X 100 0.75mlPropidium iodide 0.025g核糖核

细胞周期测定实验(一)

标签: 细胞周期 体外培养 周期测定细胞周期测定可以:(1)作为生物相容性评价指标;(2)用于研究细胞凋亡;(3)作为选择细胞的依据。实验方法细胞计数法BrdU渗入法流式细胞仪测定法实验方法原理流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单

细胞周期该如何测定?

一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测

brdu细胞周期实验步骤

  1、细胞生长至指数期时,向培养液中加入BrdU,使最终浓度为10μg/ml。  2、44小时加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。  3、48小时后常规消化细胞至离心管中,注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。  4、常规染色体制片(见第三部分:染色体技术)。  5、染色体玻片置56℃水浴锅盖

细胞周期测定实验(二)

一、常见问题1.  Q:要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查,但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查,请问:胃组织要怎样保存好呢?用低温保存,还是用乙醇固定?或者固定后再低温下保存? A:我做过乳腺细胞的DNA含量测定,取得组织以后,先处理成单细胞悬液,然后再加70%冰乙醇固定,要保证冰乙醇的最终

人体细胞周期详解

人体有46条染色体,具体分析如下,减数分裂前期Ⅰ持续时间长,结构变化复杂,通常又可分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。细线期:第一次分裂开始时,染色体浓缩为细长的细线,但相互间往往难以区分,虽然染色体已在减数分裂前的间期时复制,每一染色体应该已有两个染色单体,但在细线期的染色体上还看不到双重

细胞周期的过程介绍

间期间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。1.G1期(first gap) 从有丝分裂到DNA复制前的一段时期,又称合成前期,此期主要合成RNA和核糖体。该期特点是物质代谢活跃,迅速合成RNA和蛋白质,细胞体积显著增大。这一期的主要意义在于为下阶

细胞周期蛋白的概念

中文名称细胞周期蛋白英文名称cyclin定  义一类与细胞周期功能状态密切相关的蛋白质家族,其表达水平随着细胞周期发生涨落,可通过与特定蛋白激酶结合并激活其活性,从而在细胞周期的不同阶段发挥调控作用。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)

细胞周期的间期定义

间期是细胞循环中细胞生长和工作的时段,一个细胞在细胞循环90%左右的时间是在间期中。间期应注意与前期、中期、后期、末期相区分,后四者属分裂期。

细胞周期的影响因素

细胞周期内有两个阶段最为重要:G1到S和G2到M;这两个阶段正处在复杂活跃的分子水平变化的时期,容易受环境条件的影响,如果能够人为的进行调控,将对深入了解生物的生长发育和控制肿瘤生长等有重要意义。已发现很多体内因素可以激发或抑制细胞的增殖,例如多种激素、血清因子、多胺、蛋白水解酶、神经氨酶、cAMP

细胞周期的过程分析

  间期  间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。  1.G1期(first gap)  从有丝分裂到DNA复制前的一段时期,又称合成前期,此期主要合成RNA和核糖体。该期特点是物质代谢活跃,迅速合成RNA和蛋白质,细胞体积显著增大。这一期的主要