类器官荧光染色实验流程（二）

类器官荧光染色实验流程（二）

染色（免疫荧光）10. 晾干切片，使用免疫组化笔标出类器官切片的部分。11. 使用适合的封闭缓冲液在室温封闭1小时（或按照常用的封闭方法进行封闭）。12. 加一抗，室温孵育2小时，或在4度孵育过夜。13. 用PBS清洗2次，每次2分钟。14. 加二抗，室温孵育1小时。避光。15. 用PBS清洗两遍，

类器官荧光染色实验流程（一）

固定注意: 合并2-3孔的几十个类器官最为理想，但也可只使用一个孔的类器官。使用PFA固定和O.C.T包埋的实验流程使用1.5 mL的EP管收集类器官，使用4% PFA溶液室温固定半小时。室温下用PBS清洗3次，每次5分钟。然后将样本转移至30% 蔗糖溶液4度孵育过夜。第二天，移除蔗糖溶液，在O

类器官培养与应用的简易流程图

色素类染色实验

实验方法原理 含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素，常规染色为棕黄色大小不等的颗粒，呈点状和团块状分布于细胞内或细胞外。有的存在于血管内。染色反应是由于三价铁离子从蛋白质中被盐酸分离出来，再与亚铁氡化钾反应，生成蓝色的亚铁氰化铁物质，通常用普鲁士（Perls）蓝反应。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒

类器官（organoids）：器官芯片技术培育人胰岛类器官

　　近日，中国科学院大连化学物理研究所研究员秦建华团队利用器官芯片技术培育人多能干细胞衍生的胰岛类器官取得新进展，相关成果发表在器官芯片领域刊物Lab on a chip上，并被选为封面文章。　　类器官（organoids）是一种通过干细胞自组织方式形成的多细胞三维复杂结构，它能够在体外模拟具有来源

革兰氏染色的实验流程

　　1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。　　2、 涂片：　　液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂

实时荧光定量PCR（RealTimePCR）实验流程（二）

五、cDNA与引物质量检测　　　　取0.2ml薄壁PCR管，编号。向各管中加入含染料2×PCRTaqMix10ul;加入正反向引物各0.5ul(引物浓度10uM)，向管中加入混合的cDNA各1ul。各管补加水至20ul。　　　　组份加量　　　　2×PCRTaqMix10ul　　　　10uMPrime

色素类染色实验_胆色素染色

实验方法原理在不正常的情况下，如血红蛋白分解产物和代谢发生的障碍等情况，使胆红素的含量增多，在组织中形成大小不等的颗粒或团块状物质，通过 Hall 胆红素反应，能够清楚地显示胆色素。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯乙醇蒸馏水三氯乙酸三氯化铁丽春红 S 水溶液苦味酸饱和液中性树胶仪器、耗材滴管玻

色素类染色实验_黑色素染色

实验方法原理黑色素不正常情况下，可在全身各处形成含有黑色素的沉着物。黑色素组织易保存，常规固定剂与石蜡组织切片均不会丢失，其形态特点为大小不等的颗粒状物质，经过 Masson Fontana 的氨银液作用一定时间后，能够较好地显示黑色素。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水硝

色素类染色实验_脂褐素染色

实验方法原理脂褐素是一种衰老或破坏的线粒体和内质网等细胞器结构经过溶酶体消化未完的残余物，多见于老年入或患慢性消耗性疾病患者的组织细胞，常用 Schmorl 反应方法染色。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水铁氰化钾三氯化铁中性红乙酸仪器、耗材滴管玻片实验步骤试剂配制三氯化铁

色素类染色实验_含铁血黄素染色

实验方法原理含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素，常规染色为棕黄色大小不等的颗粒，呈点状和团块状分布于细胞内或细胞外。有的存在于血管内。染色反应是由于三价铁离子从蛋白质中被盐酸分离出来，再与亚铁氡化钾反应，生成蓝色的亚铁氰化铁物质，通常用普鲁士（Perls）蓝反应。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯

免疫荧光实验流程

免疫荧光实验步骤实验流程：（1） 细胞准备。对单层生长细胞，在传代培养时，将细胞接种到预先放置有处理过的盖玻片的培养皿中，待细胞接近长成单层后取出盖玻片，PBS洗两次；对悬浮生长细胞，取对数生长细胞，用PBS离心洗涤（1000rpm，5min）2次，用细胞离心甩片机制备细胞片或直接制备细胞涂

从3D类器官到单细胞（二）

   PerkinElmer高内涵系统的3D方案不仅仅局限于3D微组织，包括模式生物、细胞伪足等立体结构都可以通过高内涵系统完成全面的检测和分析： 　　珀金埃尔默的单细胞ICP-MS技术，基于业界较快的的细胞脉冲信号读取速度(可达100000点每秒)，能定量单个细胞中低至阿克级别的金属和纳米颗粒含量

什么是类器官？

类器官和真正的器官非常相似，从专业角度阐释，类器官是体外的3维立体微型细胞簇，高度模拟体内相应器官的结构和功能。通俗来讲就是类器官是一个体外构成的具有自我更新，自我组织能力的微型器官，与真实的器官具有相似的空间组织并且能够执行原始器官功能。

什么是类器官？

类器官属于三维（3D）细胞培养物，包含其代表器官的一些关键特性。此类体外培养系统包括一个自我更新干细胞群，可分化为多个器官器官特异性的细胞类型，与对应的器官拥有类似的空间组织并能够重现对应器官的部分功能，从而提供一个高度生理相关系统。

Nature：实验室中的类器官——“肾”

　　刊登在国际杂志Nature上的一篇研究报告中，来自澳大利亚和荷兰的科学家们通过研究表示，他们在实验室中成功利用干细胞培养出了具有初步生长状态的人类肾脏组织，而这一过程通向在实验室中开发全功能性的移植器官又进了一步。　　研究者表示，这种组织并不是一种有活力的组织，但可以用于其它用途，比如在药物毒性

类器官未来会取代天价实验猴吗？

《科创板日报》10 月 10 日讯（记者 朱洁琰） 日前，美国参议院通过的美国食品药品监督管理局现代化法案（FDA Modernization Act 2.0）的消息引起业界关注，缘于该法案旨在推动减少临床前试验对动物的应用，用更现代的科学方法取而代之。对此，有市场解读说，该法案出台后，美国制药界可

SYPRO－Orange－荧光染色实验

实验材料单向凝胶电泳分离后的蛋白样品仪器、耗材铝箔荧光扫描仪塑料容器实验步骤1.电泳结束后，将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中，试剂 A 的量要足够覆盖整块凝股。例如，一’块典型的 mini 胶（8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的试剂 A。2.用铝箔遮盖好容器

SYPRO－Ruby－荧光染色实验

实验方法原理到目前为止，在常用来检测经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后的蛋白质的方法中，SYPRORUBY 可能是最灵敏的突光染色方法了，它能检测出仅含 1?2ng 蛋白的条带。遗憾的是，如此微量的蛋白条带经染色后用肉眼却不可见，需要一个荧光扫描仪检测（SYPRORuby 的最大激发光和发射光的波长分别是

3D类器官深层智能成像分析加速精准用药流程

如今研究人员正越来越多的应用3D 细胞培养、微组织和类器官技术来填补2D 细胞培养与体内动物模型之间的差距。这是因为3D 模型能够更好地模拟微环境、细胞间相互作用和体内生物过程，因此相较于生化检测和2D 模型，3D 模型可提供更具生理相关性的条件。此外，其形态学和功能分化程度更高，这也赋予了它们更接

病毒免疫荧光实验_​荧光抗体染色

实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制，可有以下几种：1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合，在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，特

类器官的发展历程

1907年，Henry Van 发现物理分离的海绵细胞可以重现聚集，自行组成一个新的功能完善的海绵。在接下来的几十年里，脊椎动物中也发现了相似的细胞分离再聚合现象，例如1944年Holtfreter的两栖动物肾组织实验和1960年Weiss的禽类胚胎实验。1961年 Piercehe和 Verney

荧光免疫染色和DAPI染色实验步骤

免疫染色实验方法和步骤免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)、免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等，可以参考如下步骤进行操作。 1. 样品准备(Sample

DAPI染色流程

DAPI染色1．原理DAPI为4’，6二脒基-2-苯吲哚(4’，6―diamidino-2―phenylindole)能与双链DNA小槽，特别是AT碱基结合，也可插入少于3个连续AT碱基对的DNA序列中。当它与双链DNA结合时，荧光强度增强20倍，而与单链DNA结合则无荧光增强现象，因此是一种简易、

细胞免疫荧光染色实验

实验原理利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec

细胞免疫荧光染色实验

实验原理利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec

类器官进展人鼠混合大脑类器官首次对视觉刺激做出反应

　　随着干细胞技术的不断进步，源自人诱导多功能干细胞（human induced pluripotent stem cells, hiPSCs）的脑类器官已成为疾病模型中的热门话题。脑类器官有望为药物筛选、精准医学、神经修复等领域带来新的发展契机。　　脑类器官的优势体现在下面两个方面：　　-与二维细

研究创造新型人脑“类器官”

　　人类神经系统疾病背后的遗传学是复杂的，大跨度的基因组参与了疾病的发生和发展。研究其他动物的神经疾病给相关发现提供了的机会很有限，因为人类的大脑非常独特。哈佛大学(Harvard University)和布罗德研究所(Broad Institute)斯坦利精神病学研究中心(Stanley Cent

人脑“类器官”研究获得突破

　　近日，来自哈佛大学、南加州大学及麻省理工学院的科学家们在开发人脑类器官方面取得的重大进展。相关研究成果发表于Nature杂志，论文标题为“Individual brain organoids reproducibly form cell diversity of the human cerebr

类器官的构建与制备

类器官的形成：类器官可以由两种类型细胞产生，一是多能干细胞（PSCs）,例如胚胎干细胞(ESCs)、诱导干细胞(iPSCs)，或器官限制性成体干细胞（ASCs）。这些细胞被培养在一个特定的环境中，允许它们遵循根深蒂固的基因指令，自x行组织成功能性的3D结构。从各种组织中培养类器官的方法是相似的。干细