类器官荧光染色实验流程(一)

固定注意: 合并2-3孔的几十个类器官最为理想,但也可只使用一个孔的类器官。使用PFA固定和O.C.T包埋的实验流程使用1.5 mL的EP管收集类器官,使用4% PFA溶液室温固定半小时。室温下用PBS清洗3次,每次5分钟。然后将样本转移至30% 蔗糖溶液4度孵育过夜。第二天,移除蔗糖溶液,在O.C.T中孵育15分钟。将类器官转移至组织模具中,置于-20度,继续在O.C.T中进行包埋。可于-80度储存或进行冷冻切片。使用福尔马林固定和琼脂糖包埋的实验流程1. 从孔板中吸出培养基。加入1 mL的福尔马林。2. 使用1 mL的枪头轻柔地重悬类器官和基质胶,将混合物转移至EP管中。将所需的所有孔的类器官加入同一EP管中。(也可以在孔板中进行固定,一起重悬)3. 轻轻混合,放在冰上孵育至少一个小时。4. 4度,1500 rpm,离心5分钟。5. 小心地吸出福尔马林。6. 用冰冷的PBS清洗,4度,1500 rpm,离心5分钟,小心吸......阅读全文

类器官荧光染色实验流程(二)

染色(免疫荧光)10. 晾干切片,使用免疫组化笔标出类器官切片的部分。11. 使用适合的封闭缓冲液在室温封闭1小时(或按照常用的封闭方法进行封闭)。12. 加一抗,室温孵育2小时,或在4度孵育过夜。13. 用PBS清洗2次,每次2分钟。14. 加二抗,室温孵育1小时。避光。15. 用PBS清洗两遍,

类器官荧光染色实验流程(一)

固定注意: 合并2-3孔的几十个类器官最为理想,但也可只使用一个孔的类器官。使用PFA固定和O.C.T包埋的实验流程使用1.5 mL的EP管收集类器官,使用4% PFA溶液室温固定半小时。室温下用PBS清洗3次,每次5分钟。然后将样本转移至30% 蔗糖溶液4度孵育过夜。第二天,移除蔗糖溶液,在O

类器官(organoids):器官芯片技术培育人胰岛类器官

  近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员秦建华团队利用器官芯片技术培育人多能干细胞衍生的胰岛类器官取得新进展,相关成果发表在器官芯片领域刊物Lab on a chip上,并被选为封面文章。  类器官(organoids)是一种通过干细胞自组织方式形成的多细胞三维复杂结构,它能够在体外模拟具有来源

什么是类器官?

类器官和真正的器官非常相似,从专业角度阐释,类器官是体外的3维立体微型细胞簇,高度模拟体内相应器官的结构和功能。通俗来讲就是类器官是一个体外构成的具有自我更新,自我组织能力的微型器官,与真实的器官具有相似的空间组织并且能够执行原始器官功能。

什么是类器官?

类器官属于三维(3D)细胞培养物,包含其代表器官的一些关键特性。此类体外培养系统包括一个自我更新干细胞群,可分化为多个器官器官特异性的细胞类型,与对应的器官拥有类似的空间组织并能够重现对应器官的部分功能,从而提供一个高度生理相关系统。

类器官当前成就

  类器官研究的当前成就已经非常显著,并且在多个方面推动了生物医学科学的发展。以下是一些关键的成就:  多种类器官的成功构建:  科学家们已经能够从人类和动物的干细胞和组织源性细胞中构建出多种类型的类器官,包括肠道、胃、肝脏、胰腺、肾脏、心脏和大脑等。  疾病模型的建立:  类器官技术被广泛应用于模

类器官的发展历程

1907年,Henry Van 发现物理分离的海绵细胞可以重现聚集,自行组成一个新的功能完善的海绵。在接下来的几十年里,脊椎动物中也发现了相似的细胞分离再聚合现象,例如1944年Holtfreter的两栖动物肾组织实验和1960年Weiss的禽类胚胎实验。1961年 Piercehe和 Verney

类器官进展人鼠混合大脑类器官首次对视觉刺激做出反应

  随着干细胞技术的不断进步,源自人诱导多功能干细胞(human induced pluripotent stem cells, hiPSCs)的脑类器官已成为疾病模型中的热门话题。脑类器官有望为药物筛选、精准医学、神经修复等领域带来新的发展契机。  脑类器官的优势体现在下面两个方面:  -与二维细

研究创造新型人脑“类器官”

  人类神经系统疾病背后的遗传学是复杂的,大跨度的基因组参与了疾病的发生和发展。研究其他动物的神经疾病给相关发现提供了的机会很有限,因为人类的大脑非常独特。哈佛大学(Harvard University)和布罗德研究所(Broad Institute)斯坦利精神病学研究中心(Stanley Cent

人脑“类器官”研究获得突破

  近日,来自哈佛大学、南加州大学及麻省理工学院的科学家们在开发人脑类器官方面取得的重大进展。相关研究成果发表于Nature杂志,论文标题为“Individual brain organoids reproducibly form cell diversity of the human cerebr

类器官的构建与制备

类器官的形成:类器官可以由两种类型细胞产生,一是多能干细胞(PSCs),例如胚胎干细胞(ESCs)、诱导干细胞(iPSCs),或器官限制性成体干细胞(ASCs)。这些细胞被培养在一个特定的环境中,允许它们遵循根深蒂固的基因指令,自x行组织成功能性的3D结构。从各种组织中培养类器官的方法是相似的。干细

类器官发育指标首次定义

  近日,德国和奥地利的联合科研团队首次定义了器官发育的指标,揭示了组织中三维结构的连通性和结构的出现之间的联系,将有助于科学家设计模仿人体器官的自组织组织。  人体器官具有复杂的充满液体的管路和环路网络。它们具有不同的形状,并且不同器官的三维结构彼此之间的连接也不同。这方面的一个例子是肾脏的分支网

小小类器官-承载移植梦

  经过近10年的快速发展,科学家们已经能在实验室利用细胞培育、分化、自组装成各种类似人体组织的3D结构,制造出肝脏、胰脏、胃、心脏、肾脏甚至乳腺等在内的各种类器官。英国著名学术期刊《发育》杂志3月刊以专版形式,对类器官研究领域进行了全面回顾。  《科学》杂志网站报道称,这些实验室类器官并不是各种细

类器官培养方法的比较

类器官的来源广泛,样本材料经过不同方法处理后需要在体外进行培养,构建3D培养模型。不同细胞外基质可采用的培养方法也会存在差异,但都可以为类器官体外培养提供生长的微环境。其中VitroGel水凝胶为无动物源成分的功能性水凝胶,室温下与细胞培养基或含离子成分的溶液混合即可成胶,类器官培养方法多样;而目前

类器官的类别及应用

自2009年成功建立上皮类器官以来,类器官培养已应用于各种器官,包括:大脑(brain)、视杯(Optic Cup)、内耳(Inner Ear)、肺(lung)、肝(liver)、结肠(Colon)、肾(Kidney)、胰腺(Pancreatic)、前列腺(Prostate)、胃(Gastroids

类器官的作用和前景

目前类器官的培养主要是指上皮细胞类器官, 如消化道上皮细胞、乳腺上皮细胞、皮肤上皮细胞、肺泡上皮细胞等, 大部分的类器官中只有上皮细胞, 不含有成纤维细胞、免疫细胞、血管细胞等周围基质细胞. 这在很大程度上限制其在其他领域的应用, 如免疫防御的研究、干细胞微环境、肿瘤微环境调控方面的研究. 今后的研

类器官构建的三要素

细胞分化物理特征关键信号路径的激活/抑制原始细胞的类型及条件

类器官的三个特征

细胞能够通过空间组织和细胞特异化自行组织,重现原始器官功能;含有一种以上与原始器官相同的细胞;能够再现原始器官的某些功能,例如:过滤,排泄,神经链接以及收缩功能等。

Cell:首个癌症类器官生物银行

  研究人员利用由癌症患者肿瘤衍生出的三维(3D)类器官,接近复制出了原发肿瘤的一些关键特性。这些“类器官”培养物适用于大规模的药物筛查来检测与药物敏感性相关的一些遗传改变,为采用个体化治疗改善癌症患者的临床结局铺平了道路。他们将这项研究发表在5月7日的《细胞》(Cell)杂志上。  直到现在,人们

Cell:首个癌症类器官生物银行

  研究人员利用由癌症患者肿瘤衍生出的三维(3D)类器官,接近复制出了原发肿瘤的一些关键特性。这些“类器官”培养物适用于大规模的药物筛查来检测与药物敏感性相关的一些遗传改变,为采用个体化治疗改善癌症患者的临床结局铺平了道路。他们将这项研究发表在5月7日的《细胞》(Cell)杂志上。  直到现在,人们

比类器官还要高级的操作——类装配体

  【前沿技术】Nature最新揭露:比类器官还要高级的操作——类装配体  01研究背景  类器官大部分来源于能自我分化的干细胞,常形成三维细胞团,具有器官的部分特性,但是此类模型未考虑到天然的组织结构和微环境,而且大量的细胞从生理环境中取出都会改变其特性。  这篇研究中使用了正常膀胱干细胞或膀胱肿

色素类染色实验

实验方法原理 含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素,常规染色为棕黄色大小不等的颗粒,呈点状和团块状分布于细胞内或细胞外。有的存在于血管内。染色反应是由于三价铁离子从蛋白质中被盐酸分离出来,再与亚铁氡化钾反应,生成蓝色的亚铁氰化铁物质,通常用普鲁士(Perls)蓝反应。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒

大连化物所发表类器官和器官芯片相关研究进展

  近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员秦建华及其团队在《先进材料》(Advanced Materials)上发表题为《水凝胶介导的类器官和器官芯片研究》(Advances in Hydrogels in Organoids and Organs-on-a-Chip)的进展报告。  类器官和器官

类器官模型揭示大脑多巴胺系统秘密

  一次畅快的跑步、一杯清晨的咖啡,一块香喷喷的饼干……这些令人愉悦的时刻都归因于神经递质多巴胺的释放。多巴胺由我们大脑神经网络中的神经元释放,称为“多巴胺能奖赏通路”。据5日发表在《自然·方法》杂志上的论文,奥地利科学院分子生物科技研究所的研究人员开发了一个多巴胺系统的类器官模型,揭示了其复杂的功

心脏类器官可模拟胚胎心脏发育

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/2/517628.shtm

类器官研究的未来发展趋势

虽然类器官技术在研究界的广泛应用依然处于起步阶段,但是作为一种工具,类器官技术在研究广泛的对象方面潜力巨大,包括发育生物学、疾病病理学、细胞生物学、再生机制、精准医疗以及药物毒性和药效试验。对于这些应用以及其他应用,类器官培养实现了对现有2D培养方法和动物模型系统的高信息量的互补。此外,通过类器官繁

人类胎盘“类器官”可长期稳定培养

   英国《自然》杂志29日在线发表的一项医学成果称,英国剑桥大学的科学家团队建立了长期稳定的人体胎盘“类器官”。这些“类器官”模型代表了人体胎盘发育研究的一项重大创新。  许多妊娠疾病,如子痫前期、胎儿生长受限、死产等,都会在妊娠早期出现胎盘发育异常。但是,由于缺少进行实验的功能性模型,对人体胎盘

PeproTech类器官培养操作的答疑解惑

类器官(organoids)是一种利用具有干性潜能的细胞体外培养出的3D细胞培养物。由于与对应的器官拥有高度相似的组织学特征,具有自我更新和自我组织能力,并能重现该器官的部分生理功能,因此类器官可作为多种疾病的体外模型,在干细胞与发育、再生医学、疾病研究、药物开发和精准医疗等多个方面拥有广泛的应用前

色素类染色实验_胆色素染色

实验方法原理在不正常的情况下,如血红蛋白分解产物和代谢发生的障碍等情况,使胆红素的含量增多,在组织中形成大小不等的颗粒或团块状物质,通过 Hall 胆红素反应,能够清楚地显示胆色素。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯乙醇蒸馏水三氯乙酸三氯化铁丽春红 S 水溶液苦味酸饱和液中性树胶仪器、耗材滴管玻