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细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法

一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测):如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助。4、透射电镜观察:(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测):可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边集,常呈新月形,核膜皱褶,胞质紧实,细胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。二、dna凝胶电泳(一)、检测原理(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)细......阅读全文

检测细胞凋亡的实验方法比较-4

六、Caspase-3活性的检测 Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个

细胞凋亡,细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法

  一、形态学观察方法   1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。   2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧

检测细胞凋亡的实验方法比较

◆ TUNEL 与 ELISA 检测凋亡的方法比较TUNEL法   细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3

miRNA影响椎间盘退变的机制研究进展

  在当今社会,腰痛(LBP)患者数量庞大,LBP患者也因此饱受病痛折磨,椎间盘退变(IDD)作为LBP的最主要病因,其发病机制十分复杂,目前已知的就有基因、年龄和包括职业因素、吸烟、酗酒在内的一些不良生活习惯等因素。据统计,作为腰痛的主要病因的IDD疾病一年会给全球的经济造成超过700亿欧元的损失

全能细胞质控仪在细胞研究中的应用

流式细胞仪已被广泛应用于从基础生命科学研究到临床医学研究,涵盖了细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、微生物学、遗传学等领域在各学科中发挥重要作用。传统鞘液流系统仪器体积较大,复杂的软件系统需要专人操作和维护,大大限制了流式细胞仪在普通实验的使用。默克生命科学秉承一贯的创新理念,突破流式研发的

Annexin V 与细胞凋亡的不解之缘

细胞凋亡(Apoptosis)或程序性细胞死亡(Programmed Cell Death)是指细胞为了清除自身不需要的和失去功能细胞的一种高级调控过程。凋亡可以发生在细胞生长、衰老、免疫反应或者当细胞受到疾病和毒害因素的破坏,例如放射性药物和化学化疗等的过程中。凋亡细胞会产生诸

PI3K/Akt/mTOR信号通路

目的:通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变,探讨相关的分子机制。 方法:在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上,以免疫印迹方法(Western blot)检测各细

抗肿瘤药物研究及新药筛选

  提 纲   一、化疗药物的发展   二、肿瘤的药物治疗   三、抗肿瘤药物筛选及评价   四、体外抗肿瘤活性试验   五、体内抗肿瘤活性试验   一、化疗药物的发展   • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。   • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等,

抗肿瘤药物研究及新药筛选

  提 纲   一、化疗药物的发展   二、肿瘤的药物治疗   三、抗肿瘤药物筛选及评价   四、体外抗肿瘤活性试验   五、体内抗肿瘤活性试验   一、化疗药物的发展   • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。   • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等,

利用自动细胞成像系统分析细胞凋亡

简介细胞凋亡是一种发生在多细胞生物体内的程序性细胞死亡过程!生化反应导致细胞形态和特征变化及细胞死亡。形态变化包括细胞收缩、核分裂、染色质凝缩、染色 DNA 分裂及 mRNA 衰减。细胞凋亡是一种高度调控的过程,通过内在途经对各种压力源做出响应,包括饥饿、感染、缺氧和氧化应激反应等。线粒体损

PI3K/Akt/mTOR信号通路_特异性阻断法

PI3K/Akt/mTOR信号通路可以:(1)诱导缺氧诱导因子1的表达和活性;(2)作为细胞内非常重要的信号转导途径;(3)在细胞的生长、存活、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等过程中发挥着极其重要的生物学功能。实验方法原理通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Ak

PI3K/Akt/mTOR信号通路

特异性阻断法 mTOR抑制剂作用法 样本比较法             实验方法原理 通过特异性阻断P

PI3K/Akt/mTOR信号通路

特异性阻断法 mTOR抑制剂作用法 样本比较法             实验方法原理 通过特异性阻断P

PI3K/Akt/mTOR信号通路

实验方法原理 通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变,探讨相关的分子机制。实验材料 HepG2人肝癌细胞Hep3B人肝癌细胞株人正常肝细胞株QSG-7701试剂、试剂盒 LY294002Rapamycin阿霉素仪器、

细胞衰老如何应对

  近年来,细胞体外培养造成细胞衰老的报导中指出,所有动物细胞皆有其本身的『海佛烈克极限』,影响其生物寿命长短。从细胞代数学说(也称细胞分裂次数学说)认为,人体细胞在培养条件下平均可培养60代。也就是说,无论是原代细胞或是细胞株,在细胞培养过程中细胞衰老现象是存在且常见,但却容易被操作人员忽略,往往

慢性HBV患者外周血Th细胞凋亡相关蛋白的检测及临床

作者单位:深圳市横岗人民医院,广东 深圳 518115【摘要】  目的:探讨慢性乙型肝炎患者外周血Th细胞凋亡信号蛋白的表达情况及临床意义。方法:提取35例慢性乙型肝炎患者和35例健康人外周血单核细胞,应用流式细胞术分析慢性乙型肝炎患者外周血Th细胞凋亡信号蛋白Fas、FasL和Bcl2表

吴瑞:中国旅美生化和分子生物学家的贡献

D. 1980 至1990年 李文华(Lee,Wen-Hwa)(加州大学圣迭哥分校,得州大学) 贡献:发现和克隆第一个人的肿瘤抑制基因,发现这个基因的突变是一些癌症的主要原因。 影响:他的工作给人类癌症遗传研究带来进化。这个知识的应用有益于一些癌症的诊断、预防和治疗

肿瘤生长的关键:细胞竞争

  最近,有研究人员证明,肿瘤可通过对邻近的健康组织产生不利影响,而为自身的生长提供空间。这种现象的机制,为癌症治疗提出了一种强大的新方法。  不受控制的增殖是癌细胞的主要标志,但是越来越明显的是,肿瘤的生长受到与周围细胞相互作用的影响。在某些情况下,相邻细胞可刺激或抑制肿瘤的生长,但目前还不清楚肿

活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用二

(二)活体生物发光成像技术应用领域活体生物发光成像技术是一项在某些领域有不可替代优势的技术,比如肿瘤转移研究、药物开发、基因治疗、干细胞示踪等方面。1.肿瘤学活体生物发光成像技术能够让研究人员能够直接快速的测量各种癌症模型中肿瘤的生长、转移以及对药物的反应。其特点是极高的灵敏度使微小的肿瘤病灶(少到

Wnt1蛋白在疾病和健康方面的作用

Wnt蛋白是存在于多种生物体内的一种细胞外配体,Wnt作为形态发生素通过激发细胞内远离信号发送区域的浓度依赖反应控制胚胎形态发育。Wnt通路调节动物 发育过程中的多个重要环节,例如细胞增殖、细胞迁徙及细胞分化。Wnt蛋白通过自分泌或旁分泌作用与位于细胞膜上的受体相结合,激活细胞内信号通路调节

多功能酶标仪测定荧光强度

  HSC-T6、Dulbeceo’s Modafied Eagle’s Medium(DMEM, Sigma);新生小牛血清(杭州四季青公司);Hoechst33258 (Sigma);MTT、JC-1和DMSO(Sigma);次氮基三乙酸铁(Fe-NTA, Sigma);其余为国产分析纯试剂。G

细胞衰老如何应对

近年来,细胞体外培养造成细胞衰老的报导中指出,所有动物细胞皆有其本身的『海佛烈克极限』,影响其生物寿命长短。从细胞代数学说(也称细胞分裂次数学说)认为,人体细胞在培养条件下平均可培养60代。也就是说,无论是原代细胞或是细胞株,在细胞培养过程中细胞衰老现象是存在且常见,但却容易被操作人员忽略,往往在细

Autophagy(自噬)

自噬是近年来很热门的领域,搜了一下园子,发现没有这方面系统的介绍或讨论,但很多战友有这方面的疑问,加上本人最近对此也非常感兴趣,因此,借本版来专门讨论一下自噬(说实在的,自噬属于丁香园哪一个版块的范围我也选不好),与各位同行或有志于研究自噬的战友共同学习,也欢迎大家提出自己的看法,本人的目的就是交流

不忘初心,相约2020 第五届全国原子光谱大会落幕

  分析测试百科网讯 2018年9月23日,第五届全国原子光谱及相关技术学术会议进入最后一天,虽然已经听过三天的精彩学术报告,但今天的报告依旧精彩不减。百科网小编继续为您带来原子光谱大会学术报告。今日报告首先由中国科学院生态环境研究中心蔡勇研究员带来,题目是“金属形态分析方法-挑战与展望”。中国科学

图像流式细胞仪——流式细胞术的最新突破

 ImageStream是一种台式多谱段成像流式细胞仪(Multispectral Imaging Flow Cytometry),能够同时采集6个检测通道中的细胞图像。它将流式细胞检测与荧光显微成像结合于一身,既能提供细胞群的统计数据,又可以获得单个细胞的图像,从而提供细胞形态学、细胞结

PI3K/Akt/mTOR信号通路_mTOR抑制剂作用法

实验方法原理观察阿霉素(Doxorubicin,DOX)单用或与RAPA联合用药对HepG2和Hep3B细胞生物学行为及PI3K/Akt/mTOR信号通路活性的影响,探讨mTOR抑制剂增强HCC化疗药物疗效的相关作用机制。实验材料HepG2细胞Hep3B细胞试剂、试剂盒阿霉素RAPA仪器、耗材培养箱

农产品污染物风险评估:毒性筛查与评价

  分析测试百科网讯 2015年9月17日,农产品中混合污染物风险评估技术研讨会在济南召开。军事医学科学院疾病预防控制所的彭双清研究员、中国农业科学院柑桔研究所的庞俊晓博士、江南大学的孙秀兰教授、浙江省农业科学院的蔡磊明教授级高工、浙江农科院质标所的王彦华副研究员和赛默飞世尔科技的高级工程

Autophagy(自噬)

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动态实时的细胞分析

图1.  E-plate底部的交叉微电极工作原理示意图。贴壁生长的哺乳动物细胞与微电极间的相互作用产生的阻抗与孔内的细胞数量、细胞形态以及细胞黏附质量相关;阻抗的大小用细胞指数(CI)进行衡量。生物学和细胞进程是动态变化的,而目前的细胞检测方法多采用传统的终点法,需要标记,并且

凋亡聚焦:Caspase检测新品

  Caspase是一组天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶,它们在凋亡中发挥重要作用。一般来说,哺乳动物的caspase可根据功能分类:细胞因子激活(包括caspases 1、4、5、13);凋亡起始(包括caspases 2、8、9、10)和凋亡执行(包括caspases 3、6、7)。   市场