细胞培养用液的配制具体步骤与消毒方法2
六．血清的灭活细胞培养常用的是小牛血清，新买来的血清要在56℃ 水浴中灭火30分钟后，再经过抽滤方可加入培养基中使用。七.HEPES溶液HEPES的化学全称位羟乙基呱嗪乙硫磺酸（N’-a-hydroxythylpiperazine-N’- ethanesulfanic acid ）。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol /LHEPES即可达到缓冲能力。 1mol/L HEPE缓冲液配制方法如下： 准确称取HEPTS 238.3g，加入新鲜三蒸水定容至1L。过滤除菌，分装后4℃保存。 注意：因为现在市售HEPES为约10g包装的小瓶，所以可根据实际情况灵活配制，但是要保证培养液内HEPES的终浓度仍然为20m mol/L 。如：称取4.766克HEPES溶于20ml三蒸水中，过滤除菌后可完全（20ml）加入......阅读全文
细胞培养技术
实验概要细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使期生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。主要设备细胞培养设施和基本条件 1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染
肿瘤细胞培养
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正
细胞培养技巧
细胞复苏 细胞复苏和冻存讲究“慢冻快溶”，复苏时一定要将冻存在液氮或-80℃中凝固的细胞冻存液快速融化至37℃，使胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复苏准备●打开水浴锅加热至37℃。● 超净台上放好离心管（一般15ml的），细胞培养瓶，移液
羊水细胞培养
羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞，可在体外培养用以分析胎儿染色体核型。目前国内外大都采用腹腔羊膜穿刺术，妊娠12-30周的羊水细胞均可培养成功。羊膜腔穿刺取羊水行染色体分析，最佳孕周为16周左右。因此时羊水增长快，羊水中细胞较多，细胞培养易于生长，而且不易损伤胎儿。国内多数选择的穿刺时间在妊娠的第16-
特殊细胞培养实验_微载体细胞培养法
实验方法原理微载体细胞培养开始于60年代末期，最早使用离子交换凝胶作为载体，轻微搅动即可悬液在培养基中，因而可增加细胞附着的面积，达到大量培养细胞的目的。后来，根据细胞附着生长的特点，对微载体进行了改良，使其带有电荷或其它介质，更利于细胞附着和生长。这一方法亦可用于常规量的培养，也可用于大规模的培养
细胞培养的概念及细胞培养的技术特点
细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮？
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮？ 1、收到细胞，先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢
细胞培养实验中细胞培养液的相关介绍
现代生物技术均通过细胞作为载体来进行，无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境，用于维持细胞生长的营养基质称为培养基，即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质，就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境，使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮？
细胞培养之如何将细胞培养的更漂亮？ 1、收到细胞，先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如2
结缔组织类细胞培养实验——巨噬细胞培养实验
实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养，并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群，难以长期生存，好的条件下仅能生活2~3 周，因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限细胞系；大多来自小鼠，如P388D-1、J774A.1、RAW
细胞培养细胞培养的操作步骤及注意事项
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗，弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5
细胞培养基本概念和细胞培养的环境
一、细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使期生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。 细胞培养 的培养物为单个细胞或细胞群。在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血淋
细胞培养中支原体污染对细胞培养的危害
1. 支原体污染的普遍性支原体污染是细胞培养领域遇到的性问题，据文献报道，综合美国食品药品监督管理局（FDA）、美国模式菌种收集中心(ATCC)等机构收到的相关数据，世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。该数据未统计中国大陆的数据，但可以确定，大陆地区的支原体污染比例与此相当，或更严
特殊细胞培养实验
一、二倍体细胞培养法 加支持物培养法 单细胞分离培养法 多孔塑料培养板单细胞克隆法 球体细胞培养实验 微载体细胞培养法 悬浮培养法
上皮细胞培养
1、取材：外科植皮或手术残余皮肤小块，早产流产儿皮肤更好，取角化层薄者，切成0.5－1平方厘米小块。2、置0.02%EDTA中，室温，5分钟。3、换入0.25%胰蛋白酶中，4℃过夜。4、分离：取出皮块，用血管钳或镊子将表皮与真皮层分开。5、取出表皮，剪成更小的块后，置0.25%胰酶中，37℃，30—
细胞培养的应用
动物细胞系的大规模培养是生产病毒疫苗和其他生物技术产品的基础。人干细胞的培养用于扩大细胞数量，并将细胞分化为各种体细胞类型以进行移植。干细胞培养还用于收获干细胞释放的分子和外来体，以达到治疗发展的目的。通过重组DNA（rDNA）技术在动物细胞培养中产生的生物产品包括酶、合成激素、免疫生物学（单克隆抗
上皮细胞培养
1）表皮细胞培养 1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。 2．EDTA处理：先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。 3．冷消化：换入0.25%胰蛋白酶中，置4℃过夜。 4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分
ATCC细胞培养方法
基本原理 通过在支持物（如盖玻片）上培养贴壁细胞，可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固，能够维持细胞生长时的状态。 试剂和设备 细胞悬浮液； 6孔平底组织培养板，或φ60 mm培养皿； 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于
常规细胞培养方法
原理 1 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱
细胞培养常规方法
. 冻存细胞的复苏应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度，取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内，约5ml左右，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养并内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养。2. 传代:对于贴壁细胞
球体细胞培养
1、琼脂铺底的培养瓶：30ml无菌培养瓶，每瓶中加5 ml 2%琼脂培养基，冷却，形成平坦底层后备用。 2、取生长状态良好已连接成片的细胞，用弯头吸管伸入瓶内，把细胞纵横割划成若干小区后，倒出培养液。 3、加入0.25%的胰蛋白酶液，在倒置显微镜下边消化边观察，当细胞小区边缘微卷
活细胞培养系统
活细胞培养系统能够为大多数细胞培养准确地提供所需的温度、湿度及CO2浓度。适用培养皿（35mm、50/60mm）、多孔板。同时系统也配备Z轴防漂移系统，可以自动补偿显微镜Z轴焦点漂移，始终红外检测目标细胞，保证长时间（几小时到数天）观察，视野始终处于清晰状态，并可实现细胞追踪功能。
羊水细胞培养实验
实验方法原理 羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞，可在体外培养用以检验胎儿核型。 试剂、试剂盒 碘酒 酒精 营养液
羊水细胞培养实验
羊水细胞培养实验实验方法原理羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞，可在体外培养用以检验胎儿核型。 试剂、试剂盒碘酒 酒精
ATCC细胞培养方法
基本原理 通过在支持物（如盖玻片）上培养贴壁细胞，可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固，能够维持细胞生长时的状态。 试剂和设备 细胞悬浮液； 6孔平底组织培养板，或φ60 mm培养皿； 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于
细胞培养——细胞保藏
Working Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a working cell bank Master Cell Bank (Contributed by Na
植物细胞培养条件
植物细胞培养 技术就是为了某种目的而在细胞水平上对离体植物细胞或原生质体进行的一系列生物工艺学操作。它包括分离、培养、再生以及一系列相关的操作。就有用化合物的生产来说，它主要是指在无菌条件下通过悬浮培养植物细胞生产有用化合物的过程。 理论与技术基础：植物细胞全能性、微生物 液体深层发酵系
特殊细胞培养实验
实验方法原理 二倍体细胞来源体内二倍体细胞，也即正常细胞的初代培养。初代培养细胞成功后能始终保持二倍体细胞性状，便成为二倍体细胞培养。二倍体细胞虽不难培养，但欲求长期呈旺盛地增殖生长、并保持二倍体细胞性状，亦非易事。为此必须采取一些有效的措施，一是低温冻存，二是妥善的培养方法。用反复传代的方法以求获
细胞培养技术1
一.细胞培养的基本原理 细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞，用培养基制成细胞悬液，在体外适宜条件下，使细胞生长繁殖，并保留其一定的结构和功能特性。细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。细胞培养使用的是单个细胞悬液，组织培养使用的是组织块(0．5～1立方毫米)或薄片
动物、植物细胞培养
动物细胞培养与植物细胞培养和微生物细胞细胞培养相比，动物细胞培养是当中最麻烦的。它需要一些特殊的条件：⑴血清：动物细动物细胞离体培养需要要到血清，通常使用小牛血清。血清相当于动物细胞离体培养的天然营养液，为动物细胞培养提供像矿物质微量元素、脂肪和激素的生长必需因子。⑵支持物：很多动物细胞有贴壁生长的