细胞培养——细胞保藏
Working Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a working cell bank Master Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a master cell bank Freezer and Cell Line Database (contributed by Nanci Donacki)Very useful Microsoft Access database program (486kb) for managing your cell li......阅读全文
细胞培养——细胞保藏
Working Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a working cell bank Master Cell Bank (Contributed by Na
菌种保藏实验_沙土保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征干燥菌种使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法多用于能产生孢子的微生物如霉菌
菌种保藏实验_滤纸保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征隔绝空气使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保
细胞培养实验——悬浮细胞培养
实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安
菌种保藏实验_液氮冷冻保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征通过低温使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法除适宜于一般微生物的保藏外，对
菌种保藏实验_液体石蜡保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。选用优良菌株，根据生理生化特征隔绝空气使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法实用而效果好。霉菌、放线菌、芽孢
菌种保藏实验_斜面低温保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。选用优良菌株，根据生理生化特征创造一个低温环境使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法为实验室和工厂菌种室常用
动物细胞培养——细胞培养介绍
实验方法原理目的细胞培养的评判性检查。应用检查常规维持的一致性；在复苏、传代、冻存前培养状况的评估；对新的或实验性情形反应的评估；确认明显的污染物。训练目标熟悉不同类型和不同密度的细胞培养的外观；数码或胶片相机的使用；灭菌物品和污染物间的区别，健康的和不健康的培养物间的区别；培养物生长阶段的评估。监
细胞培养技术的细胞培养方式
高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内（in vivo）的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外（in vitro）培养进行观察和研究，则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动，特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格，稍有不
细胞培养实验——贴壁细胞培养
实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶／EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒，打开安瓿，用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm
细胞的筛选驯化和保藏方法介绍
实现悬浮培养首先需要选择合适的宿主细胞，细胞系的特征直接影响放大的可能性以及放大技术的选择。同一种细胞在悬浮培养和贴罐培养时对同一病毒的敏感性不同；同一株细胞不同的克隆对营养条件有不同的需求，对病毒敏感性亦可能不同。 常根据毒株特性，综合考虑所用毒株能在何种细胞上增殖、表达，悬浮或贴壁细胞属性足否适
菌种保藏
实验概要学习与比较几种菌种保藏的方法。实验原理 微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设
细胞培养
细胞培养是一种常用的实验室技术，其中原核或真核细胞在受控条件下生长。大规模哺乳动物细胞培养被广泛用于生物技术中，特别是用于生产疫苗，蛋白质，酶，抗体和激素。细胞培养还用于许多研究**域，特别是在制药**域，其中将细胞用作研究许多疾病（例如癌症或心脏病）的模型。细胞用于靶标鉴定和验证，基于细胞的测定法
菌种保藏实验_冷冻干燥保藏法
实验方法原理微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 选用优良菌株，根据生理生化特征通过冷冻干燥使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态，生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法为菌种保藏方法中最有效的方
巨噬细胞培养常用细胞培养器皿介绍
常用细胞培养器皿有培养瓶、培养板、培养皿等。常准备量是使用量的三倍。器皿应选择透明度好，无毒，利于细胞粘附和生长的材料，常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面几种。巨噬细胞1、液体储存瓶：用于储存各种配制好的培养液、血清等液体，常用规格有500ml、250ml、100ml等几
细胞培养细胞培养的具体步骤
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗，弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步，是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
悬浮培养法细胞的筛选驯化和保藏
实现悬浮培养首先需要选择合适的宿主细胞，细胞系的特征直接影响放大的可能性以及放大技术的选择。同一种细胞在悬浮培养和贴罐培养时对同一病毒的敏感性不同；同一株细胞不同的克隆对营养条件有不同的需求，对病毒敏感性亦可能不同。 常根据毒株特性，综合考虑所用毒株能在何种细胞上增殖、表达，悬浮或贴壁细胞属性足否适
猪甲状腺细胞培养实验_细胞培养技术
实验方法原理由于甲状腺富含纤维性组织，所以甲状腺的消化分离一般采用胶原酶与胰蛋白酶联合消化法，用单一的胰蛋白酶消化效果一般；促甲状腺激素(TSH)是培养甲状腺细胞必备的，它能够起到促进甲状腺细胞生长的作用。实验材料猪甲状腺试剂、试剂盒F-12培养基胎牛血清胰蛋白酶胶原酶Ⅳ牛 TSH仪器、耗材眼科剪滴
骨骼肌细胞培养和肌细胞培养
骨骼肌细胞培养 1．杀死动物，无菌取大腿肌组织，切成0.3～0.5厘米小块。 2．用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25％胰蛋白酶消化，无菌纱网或纱布滤过，合成培养基加10％小牛血清培养，为促进分化可加1％的胎汁。 3．细胞接种量为2×106/皿，接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化
特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验
实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质，如细胞长成片之后，让细胞片与底物脱离，更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时，则细胞片能卷聚成球体形，成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶，每
大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术
大鼠肝星状细胞原代培养可以：（1）用于细胞保种；（2）用于分子生物学研究；（3）用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM
细胞培养细胞培养的一般过程
一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料
细胞培养方法
一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。 二、取材
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
LSCM细胞培养
细胞培养上述生化介导的质粒转染方法是瞬时导入。这种方法使细胞能暂时但高水平表达目的蛋白。一般在转染后 1 ~ 4d 内可获得大量的表达蛋白。此外还有物理方法(电转方法和显微注射)和病毒介导的方法。当细胞用常规方法很难转染(如原代细胞)，或转染试剂的毒性较大，这时可使用显微注射 (microinjec
细胞培养FAQ
1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别
细胞培养方法
一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。 二、取
细胞培养实验
实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒，打开安瓿，用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起