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酶的固定化方法有哪些

一、包埋法 定义:将酶、细胞或原生质体包埋在各种多孔载体中,使其固定化的方法。 分类:根据载体的材料和方法的不同分为凝胶包埋法(网格型包埋法)、半透膜包埋法(微囊型包埋法)。 1、凝胶包埋法:应用最广泛的固定化方法。 定义:以各种多孔凝胶为载体,将酶、细胞或原生质体包埋在凝胶的微孔内的固定化方法。 载体:琼脂凝胶、海藻酸钙凝胶、角叉菜胶、明胶、聚丙烯酰胺凝胶等。 注意事项:凝胶的孔径应控制在小于酶分子直径的范围内;不适于那些底物或产物分子很大的酶类的固定化。 2、半透膜包埋法 定义:将酶或细胞包埋在由各种高分子聚合物制成的小球内,制成固定化酶或固定化细胞。 载体:聚酰胺膜、火棉胶膜等。 适用:底物和产物都是小分子物质的酶的固定化。 方法:将酶液滴分散在与水互不相溶的有机溶剂中,在酶液滴表面形成半透膜,将酶包埋在微胶囊中。 二、结合法 定义:选择适宜的载体,使之通过共价键或离子键与酶结合在一起的固定化方......阅读全文

细胞化学技术-1

细胞化学技术(cytochemistry)是在保持细胞结构完整的条件下,通过细胞化学反应研究细胞内各种成分(主要是生物大分子)的分布情况以及这些成分在细胞活动过程中的动态变化的技术,可以通俗地说,这类技术让人们在显微镜下看到细胞内大分子的位置。这类技术包括光镜和电镜水平的酶细胞化学技术、免疫细胞化学

固定化α-淀粉酶及活性测定

一、实验目的和原理目的:学会交联法制备固定化酶的操作技术内容:制备固定化酶的方法很多,利用双功能试剂或多功能试剂在酶分子间,酶分子与惰性蛋白间,或酶分子与载体间进行交联反应,以共价键制备固定化酶的方法称为交联法,本实验即采用这种方法。交联剂为戊二醛,载体为甲壳素。 二、实验器材 1.恒

石蜡包埋组织DNA提取的基本方法

石蜡包埋组织的DNA提取蜡包埋组织DNA提取的基本方法影响DNA提取质量的因素提高DNA提取质量的方法  近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和

DNA提取方法 影响提取质量的因素 提高提取质量的方法

一、石蜡包埋组织DNA提取的基本方法从石蜡包埋组织中提取DNA的基本步骤,是在常规DNA提取方法的基础上改良和演变而业。Goelz等(1985)最先提出的石蜡包埋组织DNA提取技术,是用机械的方法破碎组织,切除多余的石蜡,进入含SDS和高浓度蛋白酶K(1mg/ml)的提取缓冲液加温孵育,然后进行苯酚

石蜡包埋组织的DNA提取

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表过和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

石蜡包埋组织的DNA提取方法

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表过和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

石蜡包埋组织DNA提取方法

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表过和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义

石蜡包埋组织的DNA提取及其应用

  近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意

石蜡包埋组织的DNA提取及其应用

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

电镜组织化学技术样品制备

良好的样品制备是电镜酶细胞化学技术成功的关键。酶电镜组织化学 样品制备要求既要保存酶的活性,同时又要保存细胞的超微结构。并能防止酶反应产物扩散。每种酶对固定液的要求和显示方法虽不尽相同。但电镜酶组织化学的基本程序相似,下面简要介绍其基本要求: 1.取材  组织标本的取材是样品制备

可调孔玻璃的固定化实验

基本方案             实验方法原理 可调孔玻璃(CPG,Bioran)有多微孔的结构,是一种特殊的有较大表面的

生物反应器是由什么组成的?

  中文名称:生物反应器英文名称:bioreactor  定义1:用于生物反应过程的容器总称。包括酶反应器(游离酶和固定酶反应器)、固定细胞反应器、各种细胞培养器、发酵罐和转基因动植物等。   可用于制备或生产某些生物反应产物,有的可作为生物传感器。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);方法与

高分子磁性微球在生物化学的应用

高分子磁性微球是指通过适当的方法使有机高分子与无机磁性颗粒结合起来形成的具有一定磁性的高分子微球。高分子磁性微球在生物化学中有广阔的应用前景。一. 固定化酶    固定化酶是指利用物理吸附或化学结合法将自由酶固定到载体上,以提高酶的操作稳定性和反复回收利用酶的

酶组织化学对组织处理的基本要求

    根据组织化学酶检出的基本步骤。主要有以下5方面影响酶活性:    1.选择zui适温度、pH及缓冲液。    2.固定和切片标本制作  由于固定液易使酶丧失酶活性,因此用不固定的冰冻切片显示酶

基于碳纳米管修饰电极的胆碱电化学发光生物传感器研制

  电化学发光(ECL)分析法由于其可控性好、灵敏度高、选择性好、仪器简单等优点已成功应用于环境科学、生命科学和材料科学等领域。鲁米诺是常用的发光试剂,它具备很好的发光性能,尤其是对活性氧有良好的响应,可作为酶催化反应的信号输出,以研制ECL生物传感器〔1~3〕。诸多酶催化反应的产物为H2O2,可以

电镜专用戊二醛固定液(2.5%)使用说明书

戊二醛固定液(2.5%,电镜专用) 【产品组成】 Component SBJ-0639S SBJ-0639M Store at 戊二醛固定液(2.5%,电镜专用) 100ml 500ml 4℃,避光 【保存条件】 4℃,避光 【产品概述】 固定的目的在于保存

组织标本的处理

取 材 取材是制作切片程序中的首要步骤,取材不当,将直接影响病理诊断和科研工作的效果。组织标本的选用非常重要,不能随意的切取组织来制作组织切片,否则病理检验的结果是不会令人满意的。 一、取材工具:取材刀具必须锋利。切取标本不应该挤压和揉擦,不应使用有钩镊子或血管钳等

可调孔玻璃的固定化实验

实验方法原理 可调孔玻璃(CPG,Bioran)有多微孔的结构,是一种特殊的有较大表面的烧结玻璃,现在已经被用于直接的酶固定的活化型。这个实验使用 46 nm 孔宽的可调孔玻璃和甘油,通过一个硅氧烷桥结合到玻璃的表面。甘油被偏高砩酸盐氧化产生乙醛玻璃(图 1)。由亚苯基二胺形成希夫碱,并通过

《星际穿越》科学考:玉米为何能成为“末日作物”?

  把人类的未来推向近乎末日的绝境,是不少科幻大片所津津乐道的故事背景。最近热映的电影《星际穿越》在这方面也不免俗。影片中,激发人们穿越虫洞寻找新家园的最大原因,就是地球环境的极度恶化:高温、干旱和疫病席卷了全球,人类只能依靠种植玉米苟延残喘……  在这部聘请了多为知名科学家作为科学顾问的影片中,虫

组织标本的处理

 取 材 取材是制作切片程序中的首要步骤,取材不当,将直接影响病理诊断和科研工作的效果。组织标本的选用非常重要,不能随意的切取组织来制作组织切片,否则病理检验的结果是不会令人满意的。一、取材工具:取材刀具必须锋利。切取标本不应该挤压和揉擦,不应使用有钩镊子或血管钳等手术

酶在非孔玻璃表面的共价固定化实验

基本方案             实验方法原理 用 1 mm 直径的玻璃珠,通过与硅烷成分的反应来实现玻璃表面的活化,从而

酶在非孔玻璃表面的共价固定化实验

实验方法原理 用 1 mm 直径的玻璃珠,通过与硅烷成分的反应来实现玻璃表面的活化,从而引入氨基。通过对硝基苯酰氯化物的进一步修饰,硝基被加到氨基上,氨基和亚硝基一起被转变为阳离子重盐,酶通过酪氨酰残基被连接(图 1)。实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 3-氨基丙基-三乙氧基硅烷对硝基苯酰氯化物二氯甲醇

组织和细胞的固定方法

 组织和细胞的固定方法 固定 的目的是用人为的方法尽可能使组织细胞的形态结构和化学成分保持生活状态,防止组织细胞死后发生自溶和组织腐败。固定还能增加组织块硬度,使其更容易切片,使不同的结构更容易染色。 固定方法有物理固定和化学固定两类,物理固定可采用空气干燥(血涂片)、

组织和细胞的固定方法

组织和细胞的固定方法 固定 的目的是用人为的方法尽可能使组织细胞的形态结构和化学成分保持生活状态,防止组织细胞死后发生自溶和组织腐败。固定还能增加组织块硬度,使其更容易切片,使不同的结构更容易染色。 固定方法有物理固定和化学固定两类,物理固定可采用空气干燥(血涂片)、骤冷(在液氮

电镜专用戊二醛固定液(2.5%)使用说明书

戊二醛固定液(2.5%,电镜专用) 【产品组成】Component  SBJ-0639S  SBJ-0639M  Store at戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)  100ml  500ml  4℃,避光【保存条件】4℃,避光【产品概述】

可调孔玻璃的固定化实验

实验方法原理可调孔玻璃(CPG,Bioran)有多微孔的结构,是一种特殊的有较大表面的烧结玻璃,现在已经被用于直接的酶固定的活化型。这个实验使用 46 nm 孔宽的可调孔玻璃和甘油,通过一个硅氧烷桥结合到玻璃的表面。甘油被偏高砩酸盐氧化产生乙醛玻璃(图 1)。由亚苯基二胺形成希夫碱,并通过减少硼氢化

透射电镜超薄切片和染色实验

实验方法原理 实验步骤 1. 取材 对一般的动物组织取材的要求如下:(1) 标本材料要新鲜,取材速度要快:由于生物组织离体后,细胞将会立即释放出各种水解酶而引起细胞自溶,使其微细结构发生改变而产生假象,故要尽量保持材料的新鲜,经解剖、手术或活检取材后迅速投入固定液内,以尽量保持细

透射电镜超薄切片和染色实验

实验步骤1. 取材 对一般的动物组织取材的要求如下:(1) 标本材料要新鲜,取材速度要快:由于生物组织离体后,细胞将会立即释放出各种水解酶而引起细胞自溶,使其微细结构发生改变而产生假象,故要尽量保持材料的新鲜,经解剖、手术或活检取材后迅速投入固定液内,以尽量保持细胞在活体状态的结构。(2) 取材小,

透射电镜超薄切片和染色实验

实验步骤1. 取材 对一般的动物组织取材的要求如下:(1) 标本材料要新鲜,取材速度要快:由于生物组织离体后,细胞将会立即释放出各种水解酶而引起细胞自溶,使其微细结构发生改变而产生假象,故要尽量保持材料的新鲜,经解剖、手术或活检取材后迅速投入固定液内,以尽量保持细胞在活体状态的结构。(2) 取材小,

德借助人工光合作用高效固碳

  应对气候变化措施中,减少空气中温室气体含量是重要一项。德国研究人员日前报告说,他们在实验室中研究出一种人工光合作用方法,可以更快地固定空气中的二氧化碳。   植物光合作用中的卡尔文循环是一种重要的生物固碳形式,大气中的二氧化碳进入卡尔文循环转化成糖,这是减少大气中二氧化碳含量最便宜且副作用最少的