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如何选择缓冲液pH值在选择缓冲液pH值之前，应先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka两个PH值单位的，有助于获得好的、尖锐的峰，从公式：pH＝pKa＋log([Ａ-]/[Ａ]）得知，溶液pH值高于或低于pKa两个单位，化合物中99％以一种形式存在，而一种形式存在的化合物才能获 得好的尖锐的峰。显示的是它的离子形式和中性化合物的转变，苯甲酸的 Pka等于4.2，理论上由ＨＨ公示得知，当溶液ＰＨ值等于2.2时，99％的苯甲酸以中性化合物存在，PH值等于6.2时99％的苯甲酸以离子形式存在，所以当缓冲液ＰＨ值等于2.2时，中性化合物以羧酸形式保 留于反相柱，表１列出了一般缓冲液和他们的缓冲范围。从表１知磷酸盐和柠檬酸盐缓冲液能用于ＰＨ值等于2.2。 当化合物只有氨基时，缓冲体系的选择十分简单，大多数氨基化合物在ＰＨ值小于９时都被质子化，所以所有ＰＨ值在７或更低的溶液均适合应用，你也许会问水的ＰＨ值大约是７，为什么还用缓冲盐，因为缓冲......阅读全文
反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定 反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中，选择正确的缓冲液PH值，对可离解的化合物分析的重现性十分重要，不恰当的PH值可能导致不对称峰，宽峰，分裂峰或肩峰，而尖锐的，对称的峰是定量分析中获得低的检测限以，两次分析之间较低的相对标准偏差（
反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中，选择正确的缓冲液PH值，对可离解的化合物分析的重现性十分重要，不恰当的PH值可能导致不对称峰，宽峰，分裂峰或肩峰，而尖锐的，对称的峰是定量分析中获得低的检测限以，两次分析之间较低的相对标准偏差(RSD)和保留时间的高重现性的前提。我
秘诀1：由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。 秘诀2： 三倍规则：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是一个聪明
流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
本文详尽阐述了如何科学、客观地拟定质量标准中溶出度试验各参数，并廓清了拟定出发点和控制要素，为如何使该试验法的拟定体现出制剂的内在品质提供了佐证与参考。 溶出度试验作为“评价固体制剂内在品质的灵魂与核心”，随着人们对该项技术的不断研究与深入，对其认识与理解亦在不断发展与变化着。现今，该试验
在高效液相色谱中，酸碱缓冲液的分离对保持流动相的恒定ph值和提高保留时间的重现性具有重要意义。怎么选择缓冲液：Pka和缓冲容量溶解度紫外吸光度（使用UV检测器）挥发性（MS蒸发光散射检测器）离子对性质稳定性和仪器的兼容性根据上述理论流动相缓冲能力取决于缓冲盐的pKa缓冲盐浓度和流动相pH。当缓冲溶液
开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况，大部分原因就是流动相没调好，那到底该怎么调，怎么选择呢？看完下文可能你就知道答案了。 01、由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离
色谱流动相如何调整？还在模棱两可的看过来 开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况，大部分原因就是流动相没调好，那到底该怎么调，怎么选择呢？看完下文可能你就知道答案了。 秘诀1：由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水
秘诀1：由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。 秘诀2：三倍规则 每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中
表1和表2中的变量归类方式有点不一样。这里列出了一些变量的特性，可以帮我们来确定首先选择哪一个（类）的变量。我们详细地探讨一下溶剂强度，然后会简要提到表2中其它变量。因为如果能理解表2 中所列的内容的话，大多数的信息就很容易理解了。 溶剂强度（%B）：在方法建立过程中，色谱峰间距α的变化是一个希
实验方法原理 可进行离子交换的蛋白质在实验条件下必须有单一电荷。溶液中单一电荷的蛋白质可被离子交换树脂上的小离子置换（指与蛋白质末端离子的交换）；固定在树脂上。通过提高溶液中相反离子浓度或降低蛋白质所带电荷数等方法可将蛋白质从树脂上洗脱下来。利用此法，可根据不同蛋白质电荷性质不同而将其分离开来。若已
离子交换层析法 实验方法原理 可进行离子交换的蛋白质在实验条件下必须有单一电荷。溶液中单一电荷的蛋
离子交换层析在纯化蛋白质的层析手段中使用最为广泛。它对蛋白质的分辨率高，操作简易，重复性好，成本低。按照离子交换原理，蛋白质可从大量缓冲性溶液中被分离，所以此方法尤适于蛋白质粗提物的初始纯化。在分离蛋白质时，速度往往是很重要的。 如蛋白酶的初始分离和不稳定蛋白质的纯化。离子交換层析提供了很多加速分离
流动相相当于液相的血液，在使用过程中会有各种需要注意的事项。其中有些“坑”千万要注意。加入有机溶剂之后测量移动相酸碱度 校准pH计，得到水溶液的正确pH回读值——您要验证的缓冲液是含水的。如果你用有机添加剂测量pH值，得到的pH值会与添加有机溶剂之前的值不同。 然而，最重要的一点是要保持一致
实验方法原理离子交换色谱是将离子交换基因（CM、SP、Q、DEAE等）键合于一定的惰性载体（纤维素、交联葡聚糖，交联琼脂糖等）之上，并以此作为固定相，依据样品所带电荷的不同，从而与固定相上的离子交换基团相互作用的程度不同而进行分离的一种色谱方法。离子交换色谱技术已广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸、病毒
离子交换色谱 实验方法原理 离子交换色谱是将离子交换基因（CM、SP、Q、DEAE等）键合于一定
本研究利用BCPDA进行固相TRF IA研究,它克服了解离增强体系需增强溶液、易受环境铕离子污染、只能液相测量等缺点,简化了测量步骤。结合BCPDA标记BSA,研究标记过程中的蛋白质含量测定。为TRF IA体系提供理论依据和实验技术 。材料和方法1 材料1. 1 仪器 分光光度计,核酸蛋白检测仪,
其他 一、离子交换剂的选择 1. 剂型的选择 在决定选择离子交换剂的类别之前，先要了解所研究的生物大分子保持生物活性和可溶解性的pH范围，然后根据其等电点以及其在上述pH范围内的电泳行为观察大分子的带电情况，再据此选择合适的离子交换剂。具体方法是；在流动相pH条件下进
液相色谱柱的选择、应用、保护和故障排除一般分为正柱和反相柱。正相柱多为硅胶柱，或硅胶表面带有CN，-NH3等官能团的键合硅胶柱。反相柱主要以硅胶为填料，非极性十八烷基官能团(ODS)为C18柱。其他常用的逆柱是C8、C4、C2和苯基柱。还有离子交换柱、GPC柱、聚合物填充柱等。本文介绍了反相色谱柱的
液色迷人 的液相色谱峰柱严重拖尾该如何处理一个的话就是有干扰了，柱子不干净，试试不打样 进行走基线看看有没有这个小峰也就是你说的不完全的峰，如果有就是不干净，也可能是固定相有溶解。 两个组分如果还出现这个问题就是分离度不够了，这个就需要研究一下你的本分析物和流动相的关系了拖尾原因 解决方法 1、筛板
酸度计是测量pH值的较精密仪器，也可用来测电动势。使用方法：1）温度的输入 每次测定溶液的pH前先看一下温度，如果温度设定值与样品温度不同的话，务必输入新的溶液的温度值。2）温度的读数和输入 按一次（模式）进入温度方式，显示屏即有“℃”图样显示，同时显示屏将显示最近一次输入的温度值，小数点闪烁
流动相相当于液相的血液，在使用过程中会有各种需要注意的事项。其中有些“坑”千万要注意。 01、加入有机溶剂之后测量移动相酸碱度 如果你用有机添加剂测量pH值，得到的pH值会与添加有机溶剂之前的值不同。然而，最重要的一点是要保持一致。如果你总是在加入有机溶剂之后测量pH值，那么务必保证在使用的
如何更有效地进行液相方法开发，除了准确地设立一个新方法的目标外，选择方法开发的起点也是一个重要因素。从“液相故障排除”的宗旨来讲，在方法开发过程中的许多选择会决定一些问题会在最终方法中碰到或者避免。所以，每一个特性参数需要根据方法开发中可能出现的问题及完整的方法进行优化。 在方法开发中的第
毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内
制备液相色谱基础知识： 一、制备液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层
一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 色谱法最早是由俄
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。本
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合